一种新的盐酸头孢卡品酯中聚合物含量检测方法技术

本发明专利技术属于医药分析技术领域，具体公开了一种新的盐酸头孢卡品酯中聚合物含量检测方法。该方法主要采用高效分子排阻色谱(HPSEC)法应用紫外检测器来测定盐酸头孢卡品酯中聚合物的大小，其色谱条件为：色谱柱：BioCoreSEC

【技术实现步骤摘要】
一种新的盐酸头孢卡品酯中聚合物含量检测方法


[0001]本专利技术涉及医药分析
，具体是指一种新的盐酸头孢卡品酯中聚合物含量检测方法。

技术介绍

[0002]盐酸头孢卡品酯是第四代可口服头孢类抗生素，属于β
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内酰胺类抗生素，适用于链球菌属、葡萄球菌属、淋球菌属等引起的感染。研究表明，β
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内酰胺类抗生素引发的速发型过敏反应并非药物本身所致，与药物中存在的高分子聚合物有关。β
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内酰胺类抗生素中的各种高分子杂质虽然结构不同，但有相似的生物学特性(如高致过敏性)，故在质量控制中一般不需要对不同结构的聚合物进行逐一控制，而只需要控制其总量。头孢类抗生素中的高分子聚合物系指其中分子量大于药物本身的杂质总称，其分子量一般在1000
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5000Da，个别可达到15000Da左右。
[0003]由于高分子聚合物具有高度不均一性和不确定性，无法制备出具有固定含量的对照品，现有专利以及文献中无相关盐酸头孢卡品酯聚合物检测方法，国外药典如USP和EP也未收录相关测定方法。2020版《中国药典》收载的以自身对照外标法测定β
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内酰胺类抗菌药物中高分子聚合物的方法，采用以葡萄糖凝胶Sephadex G
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10为色谱柱的凝胶色谱法。通过两种流动相的切换，以药品自身对照品取代高分子聚合物对照品对其中的高分子聚合物进行检测，为目前常用技术，用于检测头孢类抗生素中的聚合物。但该方法存在凝胶色谱柱的柱效低(1000左右)、峰形拖尾、分析时间长、高聚物杂质分离效果差(所有高分子聚合物为一个峰、且该峰与主峰基线分离效果差)、高分子聚合物的检出量非常低等缺点。因此对于盐酸头孢卡品酯原料药生产过程以及成品的质量控制，存在非常大的不便，不能快速和准确的定量盐酸头孢卡品酯中聚合物的含量。
[0004]故此，提供一种操作简单、灵敏度高、快速有效测定盐酸头孢卡品酯中聚合物含量的检测方法十分重要。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于：克服现有凝胶色谱法技术中的不足之处，提供一种快速有效测定盐酸头孢卡品酯中聚合物含量的检测方法，区别于传统的应用于抗生素中聚合物检测的凝胶色谱法，本专利技术采用高效分子排阻色谱HPSEC法，具有操作简单、专属性强、灵敏度高等优点。
[0006]本专利技术采用高效分子排阻色谱(HPSEC)法来测定盐酸头孢酯中聚合物含量。高效分子排阻色谱法通过区分各组分分子的大小，大的组分分子可以渗入到凝胶的大孔内，而小的组分分子，大孔小孔都可以渗入，甚至进入很深，不易洗脱出来。因此，大的组分分子在色谱柱中停留时间短，很快被洗脱出来了，大的组分分子和小的组分分子在分子排阻色谱体系内，完成按分子大小而分离的洗脱过程。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采取以下技术方案：
[0008]一种新的盐酸头孢卡品酯中胆聚合物含量检测方法，采用高效分子排阻色谱(HPSEC)法应用紫外检测器来测定盐酸头孢卡品酯中聚合物的大小，其色谱条件为：
[0009]色谱柱：BioCoreSEC
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300mm，5μm或效能相当的色谱柱；
[0010]流动相：流动相A和流动相B按体积比95:5的混合溶液；
[0011]其中，所述流动相A为0.05mol/L磷酸氢二钠水溶液和0.05mol/L磷酸二氢钠水溶液按体积比1:1的混合溶液；所述流动相B为乙腈；
[0012]洗脱方式：等度洗脱；
[0013]流速：0.7～0.9ml/min；
[0014]柱温：25～35℃；
[0015]检测波长：254nm；
[0016]进样量：10ul。
[0017]本专利技术中所述紫外检测器为示差折光检测器，所述检测器温度为35℃。
[0018]本专利技术中，所述色谱柱的柱温优选30℃；流速优选0.8ml/min。
[0019]本专利技术中，所述新的盐酸头孢卡品酯中胆聚合物含量检测方法包括以下步骤：
[0020]a.配置空白溶液：使用稀释剂作为空白溶液；
[0021]b.配置供试品溶液：取盐酸头孢卡品酯供试品，用稀释剂溶解成浓度为0.1mg/ml的供试品溶液(临用新制)；
[0022]c.配置自身对照溶液：精密量步骤b中的供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度并摇匀，作为自身对照溶液；
[0023]d.分别取空白溶液、自身对照溶液以及供试品溶液各10ul注入液相色谱仪中，分别记录色谱图中盐酸头孢卡品酯的峰面积，按照峰面积自身对照外标法来计算盐酸头孢卡品酯样品中聚合物的含量。
[0024]本专利技术中所述稀释剂为流动相和甲醇按体积1:1的混合液。
[0025]综上所述，本专利技术的有益效果如下：
[0026]本专利技术方法能够快速准确的测定盐酸头孢卡品酯中聚合物的含量。相对现有的采用以葡萄糖凝胶Sephadex G
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10为色谱柱的凝胶色谱法。通过两种流动相的切换，以药品自身对照品取代高分子聚合物对照品对其中的高分子聚合物进行检测，本专利技术方法应用高效分子排阻色谱法，配合SEC色谱柱，该方法专属性强，准确性和灵敏度高。选用性价比较高的紫外检测器(UV)，应用反相超高效液相色谱法，可靠性强、检测成本低，适用于盐酸头孢卡品酯生产中间产品以及成品的质量考察。
附图说明
[0027]图1为实施例中空白溶剂S1的色谱图；
[0028]图2为实施例中盐酸头孢卡品酯供试品溶液S2的色谱图；
[0029]图3为实施例中盐酸头孢卡品酯对照溶液S3的色谱图；
[0030]图4为对比例1中盐酸头孢卡品酯对照溶液的色谱图；
[0031]图5为对比例2中盐酸头孢卡品酯对照溶液的色谱图。
具体实施方式
[0032]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但并不局限于此。
[0033]实施例
[0034]本实施例所选择的盐酸头孢卡品酯供试品为中山百灵生物技术股份有限公司自制的盐酸头孢卡品酯。
[0035]本实施例所采用的色谱条件如表1所示：
[0036]表1色谱系统条件
[0037][0038]盐酸头孢卡品酯聚合物含量测定的方法如下：
[0039]a.配置空白溶液：使用流动相:醇＝1:1的稀释剂作为空白溶液S1；
[0040]b.配置供试品溶液：取盐酸头孢卡品酯供试品，用稀释剂溶解成浓度为0.1mg/ml的供试品溶液S2(临用新制)；
[0041]c.配置自身对照溶液：精密量步骤b中的S2供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度并摇匀，作为自身对照溶液S3；
[0042]所述稀释剂为流动相与甲醇按体积比1:1的混合液。
[0043]d.分别取空白溶液S1、自身对照溶液S3以及供试品溶液S2各10ul注入液相色谱仪中，记录盐酸头孢卡品酯对照溶液色本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新的盐酸头孢卡品酯中胆聚合物含量检测方法，其特征在于，采用高效分子排阻色谱法应用紫外检测器来测定盐酸头孢卡品酯中聚合物的大小，其色谱条件为：色谱柱：BioCoreSEC
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120，7.8
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300mm，5μm或效能相当的色谱柱；流动相：流动相A和流动相B按体积比95:5的混合溶液；其中，所述流动相A为0.05mol/L磷酸氢二钠水溶液和0.05mol/L磷酸二氢钠水溶液按体积比1:1的混合溶液；所述流动相B为乙腈；洗脱方式：等度洗脱；流速：0.7～0.9ml/min；柱温：25～35℃；检测波长：254nm；进样量：10ul。2.根据权利要求1所述的新的盐酸头孢卡品酯中胆聚合物含量检测方法，其特征在于所述紫外检测器为示差折光检测器，所述检测器温度为35℃。3.根据权利要求1所述的新的盐酸头孢卡品酯中胆聚合物含量检测方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：娄良，张和平，郭然，楼秋霞，
申请(专利权)人：中山百灵生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：