N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法技术

本发明专利技术公开了N(2)

【技术实现步骤摘要】
N(2)
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L
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丙氨酰
‑
L
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谷氨酰胺的制备方法


[0001]本专利技术涉及氨基酸合成
，具体涉及N(2)
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L
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丙氨酰
‑
L
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谷氨酰胺的制备方法。

技术介绍

[0002]谷氨酰胺(Gln)是人体内游离氨基酸池和血浆中含量最丰富的氨基酸。人体内约80％的谷氨酰胺分布在骨髂肌，其浓度是血浆的30倍。肠道细胞消耗的能量主要来源于骨骼肌中释放的谷氨酰胺。尽管在正常情况下谷氨酰胺为非必需氨基酸，但对于危重和营养不良患者，谷氨酰胺为条件必需氨基酸。在诸如手术、创伤脓毒症等危重情况下，细胞内的谷氨酰胺浓度降低，体内谷氨酰胺将很快耗竭。体内谷氨酰胺池的耗竭会导致小肠上皮细胞的萎缩，并可能损害肠屏障功能，促进细菌移位。尽管给危重和营养不良患者补充谷氨酰胺在生理上具有必要性，但由于谷氨酰胺在高温消毒和存储时不稳定，故尚无可供临床应用的商品。虽然可通过在输注商用氨基酸溶液时加入结晶氨基酸的方式提供游离谷氨酰胺，然需每日在药房无菌间配液及膜滤过消毒。谷氨酰胺的不稳定性可通过使用稳定且易溶的丙氨酰——谷氨酰胺双肽加以克服。
[0003]N(2)
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L
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丙氨酰
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L
‑
谷氨酰胺(二肽)可在体内分解为谷氨酰胺和丙氨酸，这一特性使经由肠外营养输液补充谷氨酰胺成为可能。二肽分解释放出的氨基酸作为营养物质各自储存在身体的相应部位并随机体的需要进行代谢。对许多病症应用肠外营养支持时，病人均可能出现体内谷氨酰胺的耗减，而二肽的输注可阻止这一症状的出现，且二肽可被机体快速有效地分解为丙氨酸和谷氨酰胺，被机体利用，而无任何毒副反应。
[0004]传统N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺(二肽)的制备方法存在原料贵、工艺复杂、污染严重等问题。现有技术中，中国专利：N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺的制备方法，专利号：200610076056.0，说明书中记载其制备方法具有工艺简单、操作方便且污染少等优点。传统和现有技术的制备方法N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺的得率和纯度分别在70
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85％和88％
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95％，还有待提高。
[0005]文献报道的N(2)
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L
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丙氨酰
‑
L
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谷氨酰胺合成方法主要有以下几种，1、以苄氧羰基（CBz）保护的L
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丙氨酸和羧基保护的L
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谷氨酰胺为原料，在1,3
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二环己基碳二亚胺（DCC）缩合剂的存在下，缩合得到中间体，再脱去保护基后得到N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺，2、以L丙氨酸和光气的缩合物为原料，在与L
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谷氨酰胺反应后，脱去羧基即得N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺；3、以D
‑2‑
卤代丙酰氯为原料，经N
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(D
‑2‑
卤代丙酰)
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L
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谷氨酰胺中间体得到N(2)
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L
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丙氨酰
‑
L
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谷氨酰胺；4、专利号200610076056.0采用丙氨酸与乙酰乙酸乙酯，在氢氧化钾下制备得前体酸钾，前体酸钾与氯甲酸酯制备得混合酸酐，再与谷氨酰胺反应，制备得N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺。
[0006]比较这四条路线，路线一采用昂贵的DCC原料，且DCC反应后生产的DCU副产物不易出去，对产品的纯度影响较大，路线二采用剧毒试剂“光气”，身体环境的破坏限制了改工艺的产业化，路线三的起始原料D
‑2‑
卤代丙酰氯制备复杂，成本较高，且该工艺路线副产物
多，收率低，已经逐渐被淘汰，路线四中前体酸钾在缩合反应丙酮试剂中的溶解度较低，且氯甲酸酯的活性不足，造成反应不完全，对后续的纯化挑战大。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供一种新的N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺的制备方法，采用乙酰乙酸甲酯保护，异丙醇钠作为原料反应，生成的钠盐前体，增加其前体在有机溶剂中的溶解度，再采用高活性的特戊酰氯制备得到混酐，反应温和且彻底，制备得到高纯度、高收率的N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺。
[0008]本专利技术N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺的制备方法，包括如下步骤：S1、邓钠盐的制备：以L
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丙氨酸、异丙醇钠、乙酰乙酸甲酯为原料，异丙醇作为溶媒，混合反应生成L
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丙氨酸邓钠盐；该步骤中异丙醇钠和异丙醇作为碱剂和反应溶剂，得到的邓钠盐在下一步反应中，在二氯甲烷中的溶解度优于其他邓钾盐，利于反应的进行，提高得率。
[0009]S2、混合酸酐制备：将钠盐悬浮于二氯甲烷（DCM）中，控制温度小于5℃，加入二甲基乙酰胺（DMAC），三乙胺（TEA），特戊酰氯，反应液为白色浆状，静置1h，溶液逐渐澄清，同时有细小固体析出，然后搅拌1
‑
1.5h，可得混合酸酐；该步骤中形成混合酸酐的活性试剂为特戊酰氯，反应溶剂中含有催化剂二甲基乙酰胺（DMAC），反应温和且彻底，提高终产物的纯度和收率。
[0010]S3、N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺的制备：将L
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谷氨酰胺悬浮于二氯甲烷（DCM）中，控制温度小于5℃，添加三乙胺（TEA），溶液逐渐澄清，降温至
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10度以下，搅拌30min，制得L
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谷氨酰胺三乙胺，备用；将制备好的混合酸酐快速滴加到L
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谷氨酰胺三乙胺中，滴加完后在
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5～
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8℃温度下保温反应1h，然后搅拌约30min，加入盐酸至pH＝8，减压浓缩至干，将残留物中加入纯化水，搅拌溶解后过滤，滤液加入无水乙醇，搅拌至析出白色结晶，抽滤后在65℃真空干燥4h，制得N(2)...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、邓钠盐的制备：以L
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丙氨酸、异丙醇钠、乙酰乙酸甲酯为原料，异丙醇作为溶媒，混合反应生成L
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丙氨酸邓钠盐；S2、混合酸酐制备：将钠盐悬浮于二氯甲烷（DCM）中，控制温度小于5℃，加入二甲基乙酰胺（DMAC），三乙胺（TEA），特戊酰氯，反应液为白色浆状，静置1h，溶液逐渐澄清，同时有细小固体析出，然后搅拌1
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1.5h，可得混合酸酐；S3、N(2)
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L
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丙氨酰
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L
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谷氨酰胺的制备：将L
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谷氨酰胺悬浮于二氯甲烷（DCM）中，控制温度小...

【专利技术属性】
技术研发人员：文慧英，任思孝，江东，方巧玉，张小亮，
申请(专利权)人：重庆奥凯科技有限公司，
类型：发明
国别省市：