一种新冠病毒快速检测试剂盒制造技术

本发明专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒包括外壳(100)、样品垫(101)、结合垫(102)、硝酸纤维素膜(103)、C线(104)、T线(105)、吸水垫(106)，通过在结合垫(102)中添加了吐温80能够改善离子表面的润湿性，能够使被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液快速的混匀分布在结合垫(102)上，从而加快检测时间，能够加快显色，从而提高检测时间，提高检测的准确性。提高检测的准确性。提高检测的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种新冠病毒快速检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及医疗领域，特别是涉及一种新冠病毒快速检测试剂盒。

技术介绍

[0002]2019新型冠状病毒，2019
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nCoV，世卫组织2020年1月命名；SARS
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CoV
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2，国际病毒分类委员会2020年2月11日命名。
[0003]冠状病毒是一个大型病毒家族，已知可引起感冒、中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。
[0004]人感染了冠状病毒后的常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。
[0005]现有的检测技术包括荧光免疫层析试纸、胶体金层析试纸、乳胶层析试纸等。其中，荧光免疫层析试纸通过在偶合物垫中放置荧光微球与抗原或抗体结合形成的复合物，当样本经过偶合物垫时，样本中的抗体或抗原与复合物发生免疫反应产生荧光微球
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抗原抗体复合物，经过硝酸纤维素膜和膜上包被的质控线和检测限抗体所捕获，从而形成检测条带。但是，荧光层析试纸通常需要配套仪器，通过专业仪器读取荧光强度转化成信号值，无法直接通过肉眼获得结果，并且检测时间较长。其他方式还有核酸检测，具体方式为荧光定量PCR，病毒RNA需要首先逆转录为cDNA，再进行扩增检测。PCR扩增和检测应使用批准产品说明书中指定的荧光定量PCR仪，通过荧光定量PCR所得到的样本Ct值的大小，可以判断患者样本中是否含有新型冠状病毒。这种方式无法自行检测，并且检测结果较长，操作复杂，在检测过程中居民排队造成近距离接触；采样时必须去掉口罩，有时还要求“啊”，采样间隔时间很短，造成局部采样空间病毒可能富集，对采样人员和被采人员都增加感染几率。
[0006]目前乳胶法试纸是检测新冠病毒抗原最方便最快捷的一种方法，通过在偶合物垫中放置乳胶颗粒与抗原或抗体结合形成的复合物，当样本经过偶合物垫时，样本中的抗体或抗原与复合物发生免疫反应产生乳胶颗粒
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抗原抗体复合物，经过硝酸纤维素膜和膜上包被的质控线和检测限抗体所捕获，从而形成检测条带。但现有的乳胶颗粒在C/T线上吸附病毒的抗原和抗体时容易在硝酸纤维素膜的毛细拉力的作用下被水流冲走，从而导致病毒抗原漏检的问题，同时也存在一些假阴性的现象发生。
[0007]因此，目前亟需一种能够加快检测时间，提高检测的准确性的一种新冠病毒快速检测试剂盒。

技术实现思路

[0008]本专利技术要解决的技术问题是提供一种能够加快检测时间，提高检测的准确性的一种新冠病毒快速检测试剂盒。
[0009]本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒，包括外壳、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、C线、T线、吸水垫，其特征在于，所述结合垫的制备方法为：
[0010]S1.1、乳胶颗粒溶液的制备步骤：
[0011]S1.11、取1ml 6％羧基化的聚苯乙烯乳胶放入离心管中，加入2ml pH 6.0含0.01％十二烷基硫酸钠的碳酸缓冲液冲洗三次后，通过10000r/min的离心机离心12min，弃上清，获得羧基化的聚苯乙烯颗粒沉淀；
[0012]S1.12、在羧基化的聚苯乙烯颗粒沉淀中用3ml 0.01M pH 8.0的硼酸缓冲溶液冲洗三次并通过10000r/min的离心机离心12min，弃上清获得乳胶颗粒溶液；
[0013]S1.2、乳胶颗粒溶液与新冠病毒抗体的结合步骤：
[0014]S1.21、在乳胶颗粒溶液中加入0.1mol/L的K2CO3溶液调节至PH值为9.0得第一溶液；
[0015]S1.22、称取112μg的新冠病毒抗体用0.005mol/L的PH9.0的硼酸盐缓冲液稀释至25μg/ml，并加入50ml的第一溶液，超声混匀并室温震荡得第二溶液；
[0016]S1.23、在50ml的第一溶液中加入112μg新冠病毒抗原捕获抗体摇晃5
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10min，并加入5ml0.01MPBS溶液和5ml的体积分数为1.2％的100mg/ml的EDAC溶液，室温震荡15min得第三溶液；
[0017]S1.24、将第二溶液和第三溶液进行混合，放在离心机中通过10000r/min离心15min，弃上清并加入0.5mg/ml的叠氮钠溶液1.5μl，得到被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液；
[0018]S1.25、在被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液中加入0.0046g
‑
0.013g的吐温80，室温下均匀搅拌8min，静置1
‑
2h后均匀涂抹在结合垫上。
[0019]本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒，其中所述硝酸纤维素膜的制备方法为：
[0020]S2.1、将新冠抗原捕获抗体用孔径为0.2μm的硝酸纤维素膜包被液稀释至0.25wt％后加入0.0014
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0.0036g的Al2O3，通过滑膜机划线在所述硝酸纤维素膜上形成C线；
[0021]S2.2、将指控分子捕获抗体用孔径为0.2μm的硝酸纤维素膜包被液稀释至0.25wt％后加入0.0014
‑
0.0036g的Al2O3，通过滑膜机划线在所述硝酸纤维素膜上形成T线；
[0022]S2.3、将划线完成后的硝酸纤维素膜放置在35℃的烘干箱中烘干2
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2.5h。本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒，其中所述样品垫的制备方法为
[0023]S3.1、将样品垫浸泡在样品垫处理液中10
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15min；
[0024]S3.2、将浸泡后的样品垫放置在35℃的烘干箱中烘干2
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2.5h。
[0025]本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒，其中所述“0.0046g
‑
0.013g的吐温80”优选为0.013g。
[0026]本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒，其中所述“0.0014
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0.0036g的Al2O
3”优选为0.0036g。
[0027]本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒，其中所述结合垫的材质为玻璃纤维。
[0028]本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒，其中所述C线为质控分子捕获抗体的质控线，所述T线为新冠病毒抗原捕获抗体的检测线。
[0029]本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒与现有技术不同之处在于本专利技术一种新冠病毒快速检测试剂盒通过在被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液添加了吐温80，吐温80又称聚山梨酯
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80，是一种润湿剂，对电解质有显著的抵抗力，亲水性强，可以改善离子表面的润湿性，能够使被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液快速的混匀分布在结合垫上，能够当
样品垫上的新冠病毒抗原包被液流到了结合垫上后，由于吐温80能够加速其流动性和提高其活性，因此能够使新冠病毒抗原与被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液快速结合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新冠病毒快速检测试剂盒，包括外壳(100)、样品垫(101)、结合垫(102)、硝酸纤维素膜(103)、C线(104)、T线(105)、吸水垫(106)，其特征在于，所述结合垫(102)的制备方法为：S1.1、乳胶颗粒溶液的制备步骤：S1.11、取1ml 6％羧基化的聚苯乙烯乳胶放入离心管中，加入2ml pH 6.0含0.01％十二烷基硫酸钠的碳酸缓冲液冲洗三次后，通过10000r/min的离心机离心12min，弃上清，获得羧基化的聚苯乙烯颗粒沉淀；S1.12、在羧基化的聚苯乙烯颗粒沉淀中用3ml 0.01M pH 8.0的硼酸缓冲溶液冲洗三次并通过10000r/min的离心机离心12min，弃上清获得乳胶颗粒溶液；S1.2、乳胶颗粒溶液与新冠病毒抗体的结合步骤：S1.21、在乳胶颗粒溶液中加入0.1mol/L的K2CO3溶液调节至PH值为9.0得第一溶液；S1.22、称取112μg的新冠病毒抗体用0.005mol/L的PH9.0的硼酸盐缓冲液稀释至25μg/ml，并加入50ml的第一溶液，超声混匀并室温震荡得第二溶液；S1.23、在50ml的第一溶液中加入112μg新冠病毒抗原捕获抗体摇晃5
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10min，并加入5ml0.01MPBS溶液和5ml的体积分数为1.2％的100mg/ml的EDAC溶液，室温震荡15min得第三溶液；S1.24、将第二溶液和第三溶液进行混合，放在离心机中通过10000r/min离心15min，弃上清并加入0.5mg/ml的叠氮钠溶液1.5μl，得到被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液；S1.25、在被新冠病毒抗体标记的乳胶颗粒溶液中加入0.0046g
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0.013g的吐温80，室温下均匀搅拌8min，静置1
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2h后均匀涂抹在结合垫(102)...

【专利技术属性】
技术研发人员：宁启源，袁彩英，陈威尔，
申请(专利权)人：峰春源医疗器械深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：