TRBC2抗体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了TRBC2抗体及其应用，属于抗体及其应用领域。本发明专利技术要解决的技术问题是：如何有效治疗T细胞来源的癌症。为解决该技术问题，本发明专利技术提供特异性结合TRBC2蛋白的抗体或其抗原结合片段，所述抗体可为鼠源抗体、嵌合抗体或人源化抗体中的任一种或几种。本发明专利技术筛选获得了鼠源抗体分子27B10和10A5，27B10和10A5人源化改造后可以介导CD16a受体阳性的效应细胞对靶细胞的杀伤，从而具备抑制肿瘤的潜力。力。力。

【技术实现步骤摘要】
TRBC2抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及抗体及其应用领域，具体涉及TRBC2抗体及其应用。

技术介绍

[0002]从组织来源分辨，淋巴癌变大致上可以分为两类，即T细胞和B细胞来源。T细胞癌变临床及生物学意义上均较为异质，总体上各型T细胞淋巴瘤发病率低于B细胞淋巴瘤，在全体非霍奇金淋巴瘤中占10
‑
20％，而在急性白血病中占20％。最常见的组织亚型包括外周T细胞淋巴瘤(peripheral T
‑
cell lymphoma,PTCL
‑
NOS)，血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angio
‑
immunoblastic T
‑
cell lymphoma,AITL)和间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)。而急性淋巴母细胞白血病(acute Lymphoblastic Leukaemias,ALL)病人群体中，约有20％为T细胞表型。
[0003]T细胞淋巴恶性肿瘤往往侵袭性强于B细胞淋巴瘤，病人5年生存率仅有30％，多与播散性发病、预后评分不良以及结外发病关联。单独化疗效果较差，现有疗法仅对不到30％的病人有效。
[0004]针对B细胞淋巴瘤，有抗CD20治疗性单抗，如利妥昔单抗(美罗华)可以极大改善治疗效果，而对T细胞淋巴瘤来说，目前尚无有效、低毒性的免疫治疗手段。这是因为，癌性(克隆化Clonal)T细胞与正常T细胞表面标记物差别有限，开发特异性针对癌性T细胞的药物难度较大。在B细胞淋巴瘤药物开发中，也存在类似问题，但无差别的清除B细胞带来的免疫抑制效应相对较小，病人可以耐受，而且，正常B细胞长期清除带来的免疫球蛋白损失，可以通过输注外源性的IgG获得补充。然而，类似的策略不能够应用于T细胞癌变的治疗
‑‑‑
T细胞的清除往往造成严重的免疫抑制和严重副作用，并且，对T细胞的清除带来的副作用，尚无合理的临床补救措施。如Alemtuzumab，其靶点为CD52，对T细胞肿瘤具有一定的治疗效果，但其应用却因带来严重细胞免疫缺陷副作用而受到限制，这种副作用主要归因于T细胞清除，病人的感染率大为升高。
[0005]因此有必要开发治疗T细胞来源淋巴瘤/白血病的新治疗手段。Suman Paμl(S.Paμl et al.,Sci.Transl.Med.10.1126/scitranslmed.abd3595(2021).)等人开发了一种T细胞接合器形式的双特异性抗体(bispecific antibody，BsAb)，该型抗体一端特异性的靶向克隆性T细胞(肿瘤)表面的T细胞受体β分子的可变区，另一端靶向T细胞表面的CD3分子，从而介导正常T细胞对(T细胞)肿瘤的杀伤。这项研究是一次研发特异性针对T细胞肿瘤的有益尝试，颇具启发性。然而，该研究获得的两个BsAb用于T细胞肿瘤却具有以下成药性方面的问题：
[0006](i)由于T细胞β受体亚基可变区具有多态性，如果要做成货架(off
‑
the
‑
shelf)产品，则需要开发数十种分子实体(TRBV编码基因共有68种，分属于30个家族)，效率较低。
[0007](ii)采取scFv串联的形式，将针对T细胞受体β亚基可变区(TRBV)和CD3亚基的两臂相连构建的双抗分子仅含有250个左右氨基酸，分子量小于30KD，药物代谢不具备优势，从而预测其临床给药不友好，病人依从性较差。
[0008](iii)T细胞接合器形式的双抗诱发细胞因子风暴的几率较大，副作用发生率高且较严重。
[0009](iv)T细胞接合器形式的双抗用于T细胞肿瘤的疗法，原则上，难以避免顺式结合出现，进一步加剧副作用；而反式结合诱导的杀伤过程，也会由于两个T细胞之间的受体
‑
配体信号综合输出导致的药效/安全风险不完全可控。
[0010]Paμl M Maciocia等人曾开发了一种靶向TRBC的CAR
‑
T疗法(doi:10.1038/nm.4444)。但CAR
‑
T疗法由于其苛刻的制备和储运条件，难以推广，且该方法在临床应用上仍难以避开以上所述的弊端。
[0011]细胞受体(T cell receptor,TCR)是T细胞表面的特异性受体，负责识别由主要组织相容性复合体(MHC)所呈递的抗原，与B细胞受体不同，并不能识别游离的抗原。通常情况下，T细胞受体与抗原间拥有较低的亲和力，因而同一抗原可能被不同的T细胞受体所识别，某一受体也可能识别许多种抗原。
[0012]T细胞受体的β亚基恒定区(TRBC)仅有两种多态性，即TRBC1或TRBC2。带有TRBC1或者TRBC2的T细胞群体往往数量大致相同，有些情况下TRBC1/2占到35
‑
45％。这样一来，针对TRBC1或TRBC2进行靶向抗体药物开发并给药，则有望清除克隆化T细胞及与该癌性T细胞带有同样TRBC肽段正常T细胞的同时，仍有望保留一半的T细胞群体，从而避免免疫抑制带来的副作用。TRBC1和TRBC2高度同源，两者胞外区有145个氨基酸，其中仅有5个氨基酸的差异，且分布于不同的结构域。

技术实现思路

[0013]本专利技术要解决的技术问题是：如何有效治疗T细胞来源的癌症。
[0014]第一个方面，本专利技术提供特异性结合TRBC2蛋白的抗体或其抗原结合片段，
[0015]所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ IDNo.20第26
‑
35位、SEQ ID No.20第50
‑
66位和SEQ ID No.20第99
‑
109位的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.25第24
‑
38位、SEQ ID No.25第54
‑
60位和SEQ ID No.25第93
‑
101位的LCDR1、LCDR2和LCDR3(10A5)；
[0016]或，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.27第26
‑
33位、SEQ ID No.27第51
‑
58位和SEQ ID No.27第97
‑
107位的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.30第27
‑
32位、SEQ ID No.30第50
‑
52位和SEQ ID No.30第89
‑
97位的LCDR1、LCDR2和LCDR3(27B10)。
[0017]其中，HCDR1、HCDR2和HCDR3为重链可变区中的三个互补决定区(CDR)，LCDR1、LCDR2和LHCDR3为轻链可变区中的三个互补决定区(CDR)。互补决定区本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.特异性结合TRBC2蛋白的抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.20第26
‑
35位、SEQ ID No.20第50
‑
66位和SEQ ID No.20第99
‑
109位的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.25第24
‑
38位、SEQ ID No.25第54
‑
60位和SEQ IDNo.25第93
‑
101位的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.27第26
‑
33位、SEQ ID No.27第51
‑
58位和SEQ ID No.27第97
‑
107位的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.30第27
‑
32位、SEQ ID No.30第50
‑
52位和SEQ ID No.30第89
‑
97位的LCDR1、LCDR2和LCDR3。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体为鼠源抗体、嵌合抗体或人源化抗体。3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述重链可变区和轻链可变区可选自下述任一种：A1)、所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.20或与SEQ ID No.20具有至少90％的同一性，所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.25或与SEQ ID No.25具有至少90％的同一性；A2)、所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.27或与SEQ ID No.27具有至少90％的同一性，所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.30或与SEQ ID No.30具有至少90％的同一性；A3)、所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.5或与SEQ ID No.5具有至少90％的同一性，所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.6或与SEQ ID No.6具有至少90％的同一性；A4)、所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.7或与SEQ ID No.7具有至少90％的同一性，所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.8或与SEQ ID No.8具有至少90％的同一性。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述抗体还包括重链恒定区和轻链恒定区，所述重链恒定区的类别为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4中的一种，所述轻链恒定区的类别为κ链或λ链。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段为Fab片段、Fv片段、Fab
′
片段、F(ab
′
)2片段、单链抗体(ScFv)、纳米抗体(单域抗体)、双特异性抗体或最小识别单位(MRU)中的一种或其任意组合。6.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述中的任一种：B1)、编码权利要求1
‑
5中任一所述抗体或其抗原结合片段的重链...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋其峰，朱永强，李理想，张顺，
申请(专利权)人：北京星基贝勤生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：