天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及测定试剂盒，具体为天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，该天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，该测定试剂盒可以抑制s

【技术实现步骤摘要】
天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒


[0001]本专利技术涉及测定试剂盒，具体为天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒。

技术介绍

[0002]天门冬氨酸氨基转移酶(AST)主要分布于心肌，其次为肝脏、骨骼肌和肾脏等组织中，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以其在细胞内分布的部位不同分为两种同工酶，一种主要分布于胞浆中,称细胞质型AST(s
‑
AST)，另一种紧密附着于线粒体上，称线粒体AST(m
‑
AST)。在临床表现上，AST测定有助于判定心和肝细胞有无坏死及损伤程度，AST增高常见于急、慢性重症肝炎、肝硬变、心肌炎、心肌梗塞、肾炎、胆管炎、皮肌炎、胰腺炎等病症。
[0003]由于心肌含AST量最高，其次是肝脏，所以心和肝细胞损伤后血中酶活性能迅速升高，因为当这些器官损伤时,可使s
‑
AST和m
‑
AST大量释放入血,致其血清水平升高；但是m
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AST在血清中的半衰周期短,其消除速度比s
‑
AST快5倍以上，在正常人血清中AST主要是s
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AST，m
‑
AST含量很低甚至缺失。
[0004]当组织细胞轻度损伤时,主要是细胞浆内的s
‑
AST透过细胞膜释放入血,而线粒体内的m
‑
AST有两层线粒体膜的保护,不易释放入血；只有当肝细胞或心肌细胞损害严重，引起线粒体崩解时，附着在线粒体上的m
‑
AST会大量释放入血,导致血清中m
‑
AST急剧升高。
[0005]由于两种同工酶在细胞中的分布不同,其升高可提示不同的临床意义,可为临床提供有价值的线索，尤其是测定血清血清m
‑
AST增高可反映细胞结构损害的严重性，测定m
‑
AST有助于了解细胞超微结构损伤及线粒体损害的严重程度，是诊断肝细胞损害和心肌梗死的敏感指标，并可作为临床判断肝细胞和心肌细胞损害程度及临床疗效评估、预后判断的参考指标。鉴于此，我们提出天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒。

技术实现思路

[0006]为了弥补以上不足，本专利技术提供了天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒。
[0007]本专利技术的技术方案是：
[0008]天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，包括校准试剂，所述测定试剂盒由相互独立的试剂一、试剂二组成；
[0009]所述试剂一各组分包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、还原型辅酶Ⅰ、天门冬氨酸氨基转移酶s抗体；
[0010]所述试剂二各组分包括线粒体天门冬氨酸氨基转移酶抗体和L
‑
天门冬氨酸。
[0011]优选的，所述测定试剂盒采用免疫抑制法抑制s
‑
AST酶活性，m
‑
AST酶活性不被抑制，采用连续监测法测定m
‑
AST，具体测定反应式为：
[0012][0013][0014]优选的，所述试剂一各组分量具体为：
[0015][0016]优选的，所述试剂二各组分量具体为：
[0017]三羟甲基氨基甲烷缓冲液
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100mmol/L；
[0018]线粒体天门冬氨酸氨基转移酶抗体
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5ml/L；
[0019]L
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天门冬氨酸
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3mmol/L。
[0020]优选的，所述试剂一和试剂二的溶剂均采用水或纯化水。
[0021]优选的，所述校准试剂包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘油、牛血清白蛋白、液态生物防腐剂、线粒体天门冬氨酸氨基转移酶。
[0022]优选的，所述测定试剂盒目标样本采用人血清样本，且控制所述人血清样本为非高血脂或非溶血样本。
[0023]优选的，所述测定试剂盒控制所述人血清样本中含量范围为结合胆红素≤40mg/dL，非结合胆红素≤40mg/dL，维生素C≤10mg/dL，乳糜≤1450浊度。
[0024]优选的，所述人血清样本超出所述含量范围后通过水或纯化水稀释3倍，测定的m
‑
AST含量值乘以稀释倍数。
[0025]优选的，所述m
‑
AST含量值的测定公式为：
[0026][0027]其中：A1为人血清样品吸光度变化率
△
A/min；A2为校准试剂样品吸光度变化率
△
A/min；C为校准试剂样品浓度。
[0028]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0029]该天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，该测定试剂盒可以抑制s
‑
AST酶活性，不抑制m
‑
AST酶活性，使得测定结果不受细胞质型AST的干扰影响，有利于提高其m
‑
AST酶的测定结果更加准确，并且本试剂盒各试剂配置简单，由较少构成的组分有利于节省生产成本和降低试剂配置操作时间，该测定试剂盒能够作为诊断肝细胞损害和心肌梗死的敏感指标，能够提供临床判断肝细胞和心肌细胞损害程度及临床疗效评估、预后判断的参考指标。
具体实施方式
[0030]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范
围。
[0031]本专利技术通过以下实施例来详述上述技术方案：
[0032]实施例1
[0033]天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，包括校准试剂，测定试剂盒由相互独立的试剂一、试剂二组成；
[0034]试剂一各组分包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、还原型辅酶Ⅰ、天门冬氨酸氨基转移酶s抗体；
[0035]试剂二各组分包括线粒体天门冬氨酸氨基转移酶抗体和L
‑
天门冬氨酸。
[0036]测定试剂盒采用免疫抑制法抑制s
‑
AST酶活性，m
‑
AST酶活性不被抑制，采用连续监测法测定m
‑
AST，具体测定反应式为：
[0037][0038][0039]在测定过程中，天门冬氨酸氨基转移酶s抗体能够与血清样本中的s
‑
AST结合而形成一种免疫复合物，造成s
‑
AST酶活力被抑制，但是天门冬氨酸氨基转移酶s抗体不会影响m
‑
AST酶活性，此时测得的AST结果即为m
‑
AST结果，可以排除s
‑
AST的干扰，提高测定准确性。
[0040]试本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，包括校准试剂，其特征在于：所述测定试剂盒由相互独立的试剂一、试剂二组成；所述试剂一各组分包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、还原型辅酶Ⅰ、天门冬氨酸氨基转移酶s抗体；所述试剂二各组分包括线粒体天门冬氨酸氨基转移酶抗体和L
‑
天门冬氨酸。2.如权利要求1所述的天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，其特征在于：所述测定试剂盒采用免疫抑制法抑制s
‑
AST酶活性，m
‑
AST酶活性不被抑制，采用连续监测法测定m
‑
AST，具体测定反应式为：具体测定反应式为：3.如权利要求1所述的天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，其特征在于：所述试剂一各组分量具体为：4.如权利要求1所述的天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，其特征在于：所述试剂二各组分量具体为：三羟甲基氨基甲烷缓冲液100mmol/L；线粒体天门冬氨酸氨基转移酶抗体5ml/L；L
‑
天门冬氨酸3mmol/L。5.如权利要求1所述的天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒，其特征在于：所述试剂一和试剂二的溶剂均采用水或纯化...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄钦，吕伟军，沈燕文，杨春超，俞嫒嫒，
申请(专利权)人：绍兴圣康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：