假儒艮属菌株及其制备天然蓝紫色素方法及其应用技术

本发明专利技术假儒艮属菌株及其制备天然蓝紫色素方法及应用，公开了一株假儒艮菌（Pseudoduganella sp.）QHDZ（专利保藏号CCTCC NO:M 2021449）。通过该菌株发酵产生的菌体细胞经有机溶剂提取可获得蓝紫色素，该色素在570nm处具有最大吸收峰；该色素对热稳定性较高；本发明专利技术的菌株能利用多种碳源发酵生物合成蓝紫色素，该菌株发酵周期短、色素产量高，所产的色素热稳定性良好，具有抗氧化、抗肿瘤等生物活性。该菌株及其发酵液和发酵液提取物可作为染料、食用色素或指示剂，在印染、食品、医药、化学、化工和包装等领域有广阔的应用前景。该菌株为温度敏感菌，在环境监测、生物芯片等领域也有潜在的应用潜力。域也有潜在的应用潜力。

【技术实现步骤摘要】
假儒艮属菌株及其制备天然蓝紫色素方法及其应用


[0001]本专利技术涉及一种微生物菌株及其制备微生物源色素的方法与应用，特别是涉及假儒艮属菌株及其制备天然蓝紫色素的方法及其应用。

技术介绍

[0002]随着社会的发展和生活水平的提高，人们对健康更加关注，天然色素以其安全、绿色、无毒，甚至具有生物活性而备受青睐。目前，天然色素的获取主要有3条途径：一是从动植物中提取，二是化学合成，三是利用微生物发酵技术生产。其中利用微生物生产天然色素具有不受季节和原料限制、生产周期短、提取工艺比较简单等优势而具有良好的发展前景。利用微生物发酵技术发酵生产红曲色素、类胡萝卜素等天然色素已成为现实，但蓝紫色素、绿色素等天然色素的微生物发酵生产仍未实现。因此，选育具有天然色素合成能力的微生物，开发新的天然色素，具有广阔的市场前景。
[0003]已公开的国内外专利及期刊文献中均没有关于假儒艮属菌生产蓝紫色素的报道，也没有提供一种能够具有生产蓝紫色素能力的假儒艮属菌株。而本专利技术从土壤样品中分离筛选出一株假儒艮菌（Pseudoduganellasp.）QHDZ（专利保藏号CCTCCNO:M2021449），该菌株可利用多种碳源合成pH适应范围广、稳定性良好，且具有抗氧化、抗肿瘤生物活性的蓝紫色素，对于天然蓝紫色素的生产及其在多领域的应用具有现实意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供假儒艮属菌株及其制备天然蓝紫色素方法及其应用，本专利技术从土壤中分离筛选出一株假儒艮菌（Pseudoduganellasp.）QHDZ（专利保藏号CCTCCNO:M2021449），该菌株具有色素合成水平高、发酵周期短、生产成本低等优点。该菌株合成的蓝紫色素QHDZ
‑
P具有热稳定良好、弱碱及酸性条件下稳定、常见食品添加剂和配料对其稳定性影响小等特点。此外，假儒艮菌（Pseudoduganellasp.）QHDZ所产的蓝紫色素还具有抗氧化、抗肿瘤等生物活性，在食品、医药、印染、化工等领域具有潜在的应用价值。此外，还可将该菌株与其他菌株进行联合使用或将其发酵产物与其他化合物进行复配使用。
[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：假儒艮属菌株，所述菌株包括假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）GHDZCCTCCNO:M2021449；假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）QHDZCCTCCNO:M2021449的休止细胞；以及假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）QHDZCCTCCNO:M2021449的发酵液及其菌体细胞提取物。
[0006]假儒艮菌QHDZ制备微生物源蓝紫色素，包括以下制备方法：保藏的假儒艮菌（Pseudoduganellasp.）QHDZCCTCCNO:M2021449菌种常规方法活化，再挑取1环培养物接入液体种子培养基，在20
‑
30℃、150
‑
200r/min条件下培养18
‑
24h，制备液体种子；将制得的液体种子转接入发酵培养基中（接种量4%），在20
‑
30℃、150
‑
200r/min条件下培养1.5
‑
2d；所述培养基如下：
斜面培养基：可溶性淀粉2%，KNO30.1%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，琼脂2%，pH7.0
‑
7.2；种子培养基：可溶性淀粉2%，KNO30.1%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，琼脂2%，pH7.0
‑
7.2；所述发酵培养基配方1：蔗糖5%，硝酸钾0.2%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，pH6.0
‑
7.0；按照上述方法发酵制得的发酵液离心收集菌体后，提取蓝紫色素；将发酵液在10000r/min离心10min收集菌体后，用去离子水洗涤3次，然后按照菌体量与无水乙醇溶液1:40
‑
60的比例加入无水乙醇混匀，40℃500W超声处理30min，10000r/min离心10min收集上清，所获得的上清即为蓝紫色素提取液；将该提取液于60℃恒温条件下真空浓缩，然后在
‑
80℃、0.01MPa条件下真空冷冻干燥24h，所得干物质即为蓝紫色素提取物。
[0007]所述的假儒艮属菌株制备天然蓝紫色素方法，所述发酵培养基配方1：蔗糖5%，硝酸钾0.2%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，pH6.0
‑
7.0。
[0008]所述的假儒艮属菌株制备天然蓝紫色素方法，所述发酵培养基配方2：可溶性淀粉4%，牛肉膏0.1%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，pH6.0
‑
7.0。所述的假儒艮属菌株制备天然蓝紫色素方法，所述发酵培养基配方3：可溶性淀粉3%，蔗糖3%，硝酸钾0.1%，K2PO4·
3H2O0.05%，MnSO4·
H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，pH6.0
‑
7.0。
[0009]所述的假儒艮属菌株制备天然蓝紫色素方法，所述提取剂为甲醇、丙酮、乙酸乙酯或其他有机溶剂。
[0010]假儒艮属菌株的应用，所述假儒艮属菌株应用包括以下：1）假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）GHDZCCTCCNO:M2021449的发酵液、菌体细胞及细胞提取物用于医药制造；2）假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）QHDZCCTCCNO:M2021449的发酵液、菌体细胞及细胞提取物用于印染、食品、化学、化工和包装领域；3）假儒艮菌（Pseudoduganellasp.）QHDZCCTCCNO:M2021449菌体细胞、产生的酶类及其DNA提取物在环境检测、生物芯片制造领域应用；4）假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）QHDZCCTCCNO:M2021449制备的蓝紫色素及其应用；5）假儒艮菌（Pseudoduganellasp.）QHDZCCTCCNO:M2021449所产蓝紫色素在制备治疗恶性肿瘤的药物中的应用，其化合物为该菌株的发酵液或细胞提取物；恶性肿瘤包括但不限于人肺癌细胞A549和人退行性肺癌细胞Calu
‑
6。
[0011]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.假儒艮属菌株，其特征在于，所述菌株包括假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）CCTCCNO:M2021449；假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）CCTCCNO:M2021449的休止细胞；以及假儒艮属菌（Pseudoduganellasp.）CCTCCNO:M2021449的发酵液及其发酵液提取物。2.假儒艮属菌株制备天然蓝紫色素方法，其特征在于，假儒艮菌GHDZ制备微生物源蓝紫色素，包括以下制备方法：保藏的假儒艮菌（Pseudoduganellasp.）GHDZCCTCCNO:M2021449菌种常规方法活化，再挑取1环培养物接入液体种子培养基，在20
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30℃、150
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200r/min条件下培养18
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24h，制备液体种子；将制得的液体种子转接入发酵培养基中（接种量4%），在20
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30℃、150
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200r/min条件下培养1.5
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2d；所述培养基如下：斜面培养基：可溶性淀粉2%，KNO30.1%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，琼脂2%，pH7.0
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7.2；种子培养基：可溶性淀粉2%，KNO30.1%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，琼脂2%，pH7.0
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7.2；所述发酵培养基配方1：蔗糖5%，硝酸钾0.2%，K2PO4·
3H2O0.05%，MgSO4·
7H2O0.05%，NaCl0.05%，FeSO4·
7H2O0.001%，pH6.0
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7.0；按照上述方法发酵制得的发酵液离心收集菌体后，提取蓝紫色素；将发酵液在10000r/min离心10min收集菌体后，用去离子水洗涤3次，然后按照菌体量与无水乙醇溶液1:40
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60的比例加入无水乙醇混匀，40℃500W超声处理30min，10000r/min离心10min收集上清，所获得的上清即为蓝紫色素提取液；将该提取液于60℃恒温条件下真空浓缩，然后在
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80℃、0.01MPa条件下真空冷冻干燥24h...

【专利技术属性】
技术研发人员：张卉，杨乐，
申请(专利权)人：沈阳化工大学，
类型：发明
国别省市：