微紫青霉菌株PQxj3、菌剂制品及其在促进烟草生长方面的应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，具体涉及一株能促进烟草生长的微紫青霉菌株PQxj3，其分类命名为Penicillium janthinellum，该菌株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为：CGMCC NO：40147。本发明专利技术还利用所述菌株PQxj3制成菌剂，并经试验验证发现：该菌株PQxj3和菌剂可以促进烟草生长；用于烟草的种植，烟草根系生长会更加发达，植株会更高更壮，烟叶生长会更大更好。烟叶生长会更大更好。

【技术实现步骤摘要】
微紫青霉菌株PQxj3、菌剂制品及其在促进烟草生长方面的应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一种微紫青霉菌株PQxj3、菌剂制品及其在促进烟草生长方面的应用。

技术介绍

[0002][0003]烟草是一种忌连作的经济作物，长期连作会引起植烟土壤性质恶化，地力下降，增加病虫害发生程度，进而影响烟草的产量和品质（高林,王新伟,申国明,田峰,陈前锋,张明发,张成省.不同连作年限植烟土壤细菌和真菌群落结构差异[J].中国农业科技导报,2019,21(08):147
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152.）。烟草产区常年种植烟草，使得烟草产量严重下降，为提高烟草产量，大量使用药剂防治，长期大量施用化学药剂容易使病菌产生抗药性，引起土壤质地的变化，造成环境污染和药剂残留，严重影响人体健康等，同时严重制约着烟草的可持续发展。而促生微生物及其微生物菌剂不仅可以提高作物产量，并且相对于化学药剂也具有更高的经济效益，符合绿色环保的发展理念（高峰,尤垂淮,刘朝科,张涛,汤术开,古力,丁博锐,张重义.施用微生物菌剂对烤烟经济性状及其根际微生态变化的影响[J].福建农业学报,2014,29(12):1230
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1235.）。
[0004]植物根际促生菌(plant growth promoting rhizobacteria，PGPR)是可促进植物生长及其对矿质营养的吸收和利用，并能抑制有害生物，自由生活在土壤或附生于植物根系的一类的有益微生物。PGPR不仅能促进植物生长，降低化肥的使用量，还可以在一定程度上减少农药的施用，起到“减肥、减药”的作用。目前，有关PGPR的研究与应用主要集中在水稻、小麦、高粱、玉米等重要粮食作物上，烟草根际促生菌研究主要集中在病害生防方面，对促进烟草生长的影响方面研究较少，并且PGPR促进烟草生长方面在实验室和温室取得的成果，实地调查结果却缺乏一致性；这使得真正可以促生烟草生长的根际微生物及其制品少之又少。
[0005]针对烟草产量逐年下降的技术问题，为提高烟草产量，符合绿色环保的发展理念，使烟草可持续发展，对烟草促生菌进行资源开发，找出对烟草有促生功能的微生物以解决烟草产量低的实际问题；为提高烟草产量而开发优质促生菌剂制品，优化栽培措施、提高经济效益，则具有广泛而现实的意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术目的在于克服现有技术缺陷，提供一种微紫青霉菌株（Penicillium janthinellum）PQxj3、菌剂制品及其在促进烟草生长方面的应用。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一株微紫青霉菌株PQxj3，其分类命名为Penicillium janthinellum，该菌株PQxj3在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为：CGMCC NO：40147，
保藏日期：2022年3月17日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0008]本专利技术提供了一种利用所述微紫青霉菌株PQxj3制成的菌剂，其将菌株PQxj 3置于添加有麸皮固体培养基的三角瓶中，在28
±
2℃环境下培养14
±
2d。
[0009]上述的菌剂中，所述麸皮固体培养基经下述步骤制备获得：称取麸皮40g，添加32
±
5ml蒸馏水，混匀，121℃灭菌20
‑
30min，即获得麸皮固体培养基。
[0010]本专利技术提供了上述微紫青霉菌株PQxj3在促进烟草生长方面的应用。
[0011]本专利技术还提供了上述菌剂在促进烟草生长方面的应用。
[0012]上述的应用，进一步的，大田移栽使用时，将烟苗的根系在菌剂中进行蘸根，然后正常移栽种植即可。
[0013]和现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术挖掘土壤中有益微生物资源，发现一株有益微生物微紫青霉菌PQxj3，该菌株可以显著促进烟草的生长，并且在相关领域从未报道；将其制成菌剂用于烟草的种植，烟草根系生长会更加发达，植株会更高更壮，烟叶生长会更大更好；该微生物菌剂也可以提高烟草的综合抗病能力，减少烟株死亡，使烟草生长更加齐整；提高烟草的产量，并且优于现有市场上的菌剂。
附图说明
[0014]图1 为菌株PQxj 3处理20d对烟草生长的影响；图2 为菌株PQxj 3处理40d对烟草生长的影响；图3为菌株PQxj3与商用菌剂对烟草生长影响的对比结果；图4为菌株PQxj3 的形态图，左图为平板培养产孢面，右图为平板培养背面；图5为ITS序列与NCBI数据库的比对结果；图6为构建菌株PQxj3的系统发育树；图7为菌株PQxj3处理大田烟草的生长情况；图8为不同处理大田烟草成熟期的农艺性状统计，图中，S指代市售哈茨木霉菌剂。
具体实施方式
[0015]以下结合实施例对本专利技术的技术方案作进一步地详细介绍，但本专利技术的保护范围并不局限于此。
[0016]实验过程中，涉及的培养基组成如下。
[0017]PDA培养基：将洗净去皮的土豆切成小块，称取200 g加水煮烂，煮沸20~30 min，用八层纱布过滤，加热，加15 g琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖20 g，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1L，pH自然，115℃灭菌20 min（分装试管灭菌可制成试管斜面培养基；液体培养基则不加琼脂即可）。
[0018]微生物
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烟草共培养筛选培养基：MS粉（Murashige ＆ Skoog Basal Medium with Vitamins）0.94 g，PDA液体培养基100 ml，蔗糖8 g，琼脂粉10 g，补充水分至1L，pH 5.78～5.82，115℃灭菌30 min。
[0019]麸皮固体培养基（250ml三角瓶）：称取麸皮40g，添加32ml的蒸馏水，混合均匀后，121℃灭菌20min。
[0020]实验材料与方法：（一）促生菌微紫青霉菌株（Penicillium janthinellum）PQxj3的筛选：1）土壤样品中微生物的分离纯化。
[0021]在信阳市烟草公司罗山县楠杆烟站和平桥区邢集镇兰店烟站的烟草种植田中，采集不同条件、不同种植环境以及烟草生长不同时期的根际土壤20 g，将其溶解在200 ml的无菌水中，震荡溶解30 min，之后对样品进行梯度稀释，取10
‑4、10
‑5、10
‑6三个梯度涂布于PDA培养基的培养皿中，28℃培养3 d，挑取单菌落，并再次纯化培养3次，获取纯种微生物；共分离纯化到161株霉菌，用于分离筛选促进烟草生长的微生物。
[0022]2）将获得的161株纯种霉菌与烟草无菌苗共培养，筛选促生效果较好的霉菌。
[0023]微生物
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烟草共培养筛选促生菌：组培获取烟草无菌苗，把烟草无菌苗转移至微生物
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烟草共培养筛选培养基上，再将纯种霉菌接种于烟草无菌苗根系，在温度28℃、湿度60%，光照本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株微紫青霉菌株PQxj3，其分类命名为Penicillium janthinellum，该菌株PQxj3在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为：CGMCC NO：40147。2.一种利用权利要求1所述微紫青霉菌株PQxj3制成的菌剂，其特征在于，将菌株PQxj 3置于添加有麸皮固体培养基的三角瓶中，在28
±
2℃环境下培养14
±
2d。3.如权利要求2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王明道，郝尚华，谢久凤，崔光周，张斌，张森，罗梦香，史明子，曹宏丽，沈笑天，李港琛，李国策，肜书新，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：