SNORA14A在肝母细胞瘤诊断和治疗中的应用制造技术

本发明专利技术涉及SNORA14A在肝母细胞瘤诊断和治疗中的应用。本发明专利技术通过在4对肝母细胞瘤组织和癌旁正常肝组织中进行snoRNA测序分析，发现SNORA14A在肝母细胞瘤中显著低表达，并进一步在患者血浆中得到验证，表明其可作为肝母细胞瘤的诊断标志物。同时发现过表达SNORA14A后明显抑制肝母细胞瘤细胞的增殖和克隆形成能力，促进细胞凋亡，表明SNORA14A可作为潜在的抗癌药物靶点加以应用。本发明专利技术为肝母细胞瘤的诊断和治疗提供了新的临床手段。诊断和治疗提供了新的临床手段。诊断和治疗提供了新的临床手段。

【技术实现步骤摘要】
SNORA14A在肝母细胞瘤诊断和治疗中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体地说，涉及SNORA14A在肝母细胞瘤诊断和治疗中的应用。

技术介绍

[0002]肝母细胞瘤(Hepatoblastoma,HB)是儿童最常见的肝脏恶性肿瘤，起源于产生肝脏上皮成分的肝脏干细胞。目前，肝切除术、新辅助化疗和肝移植是HB的主要治疗手段。尽管近年来早期患者的5年生存率提高到70％以上，但由于HB起病隐匿、肿瘤生长迅速，并且缺乏特异的诊断标志物，部分患者就诊时已处于进展期，无法切除肿瘤。广谱化疗药物对这类患者效果很差，严重影响了患者的预后。甲胎蛋白(α
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fetoproteinprotein,AFP)是目前临床唯一可用的HB血清诊断标志物，在近90％的患者血清中可检测到AFP水平显著升高。但是，婴幼儿血清AFP基线水平较高，并且在儿童肝细胞癌以及良性肝肿瘤中也明显增加，对于HB的鉴别诊断缺乏特异性。此外，β
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catenin、整合酶相互作用分子1和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3等免疫组化标志物特异性同样不佳。目前，HB的血清诊断标志物和治疗靶点都非常有限。因此，迫切需要深入研究调控HB发生发展的分子机理，开发兼具敏感性和特异性的血清诊断标志物，挖掘治疗干预的新策略，从而在疾病的早期对其进行干预治疗，提高HB患者的治愈率和生存质量。
[0003]SNORA14A是来源于细胞色素P450氧化还原酶基因第1个内含子的box H/ACA核仁小RNA(small nucleolar RNA,snoRNA)。SNORA14A的相关研究鲜少，仅有一篇报道(Kiss,A.M.,et al.,Humanbox H/ACApseudouridylation guide RNAmachinery.Mol Cell Biol,2004.24(13):p.5797
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807)证实其能够指导18S rRNAU966位点发生假尿嘧啶修饰。尽管目前尚未有文献报道过snoRNAs与HB发生发展的相关性，但很多研究表明有相当数目的snoRNAs与肿瘤发生发展密切相关。例如，文献(Wang,H.,et al.,Small nucleolar RNA U2_19promotes hepatocellular carcinoma progression by regulating Wnt/β
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catenin signaling.Biochem Biophys Res Commun,2018.500(2):p.351
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356)和(Wu,L.,et al.,Clinical significance ofC/D box small nucleolar RNA U76 as an oncogene and aprognostic biomarker in hepatocellular carcinoma.Clin Res Hepatol Gastroenterol,2018.42(1):p.82
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91)报道了snoU2_19和SNORD76通过活化Wnt/β
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catenin信号通路促进肝癌细胞增殖和迁移。Cui等证实在荷瘤裸鼠体内注射反义寡核苷酸干扰SNORA23表达，能够显著抑制胰腺导管腺癌的生长、播散与肝转移，提示SNORA23有望成为胰腺癌的治疗新靶点(Cui,L.,et al.,Small Nucleolar Noncoding RNA SNORA23,Up
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Regulated in Human Pancreatic Ductal Adenocarcinoma,Regulates Expression of Spectrin Repeat
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Containing Nuclear Envelope 2to Promote Growth and Metastasis of Xenograft Tumors in Mice.Gastroenterology,2017.153(1):p.292
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306.e2)。中国专利文献CN110229912A，公开日2019.09.13，公开了一种用于肾透明细胞癌诊断的循环snoRNA生物标志物和试剂盒及用途，所述循环snoRNA生物标志物有如下循环snoRNA组成：
SNORA2、SNORD12B、SNORA59B、SNORA70B、SNORD93、SNORD116
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2，所述的snoRNA生物标志物可以有效用于肾透明细胞癌诊断和预后。ACA11在肝细胞癌组织中显著高表达，具有较好的诊断效能(AUC＝0.81)；还有研究报道(Wu,L.,et al.,Small nucleolar RNA ACA11 promotes proliferation,migration and invasion in hepatocellular carcinoma by targeting the PI3K/AKT signaling pathway.Biomed Pharmacother,2017.90:p.705
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712)其表达的增加与患者生存时间减少密切相关，可作为肝细胞癌的预后标志物。snoRNAs表达非常稳定，在肿瘤患者的血浆、血清、尿液等体液中都能检测到，是一类非常有潜力的新型生物标志物。然而，目前未见SNORA14A在肝母细胞瘤诊断和治疗中的应用。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供SNORA14A在肝母细胞瘤诊断和治疗中的应用。
[0005]第一方面，本专利技术提供了SNORA14A转录本作为诊断标志物在制备肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒中的应用。
[0006]第二方面，本专利技术提供了检测SNORA14A转录本含量的试剂在制备肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒中的应用。
[0007]作为本专利技术的一个优选例，所述检测SNORA14A转录本含量的试剂选自特异性扩增SNORA14A基因的引物。
[0008]作为本专利技术的另一优选例，所述肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒包括：核酸抽提试剂；和/或聚合酶链反应试剂。
[0009]作为本专利技术的另一优选例，所述肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒的检测样品为组织、血浆、血清或尿液。
[0010]第三方面，本专利技术提供了SNORA14A基因或其转录本的补充剂在制备治疗肝母细胞瘤的药物中的应用。
[0011]作为本专利技术的一个优选例，所述补充剂选自生物大分子。
[0012]更优选地，所述生物大分子选自能够输送SNORA14A基因或其转录本到靶部位的逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、阳离子脂质体、阳离子聚合物。
[0013]更优选地，所述生物大分子为SNORA14A基因慢病毒表达载体(SNORA14A
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pGMLV
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CMV
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MCS
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SNORA14A转录本作为诊断标志物在制备肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒中的应用。2.检测SNORA14A转录本含量的试剂在制备肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测SNORA14A转录本含量的试剂选自特异性扩增SNORA14A基因的引物。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒包括：核酸抽提试剂；和/或聚合酶链反应试剂。5.根据权利要求1
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4任一所述的应用，其特征在于，所述肝母细胞瘤诊断试剂或试剂盒的检测样品为组织、血浆、血清或尿液。6.SNORA14A基因或其转录本的补充剂在制备治疗肝母细胞瘤的药物中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述补充剂选自生物大分子。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述生物大分子选自能够输送SNORA14A基因或其转录本到靶部...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘秋辉，孙奋勇，朱佳蓓，马纪，甄妮，毛思薇，邾国庆，陈天舒，丁苗，谢怡，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心，
类型：发明
国别省市：