一种培南类抗生素药物杂质聚合物的鉴别及含量测定方法技术

本发明专利技术涉及一种培南类抗生素药物中聚合物杂质的检测方法，包括杂质聚合物鉴别和基于鉴别结果的含量测定方法。通过将样品在进行降解反应后得到的色谱峰来鉴别培南类抗生素中的聚合物的色谱峰。通过采用聚合物杂质对照品的外标法来准确计算培南类抗生素中药物聚合物的含量。物的含量。物的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种培南类抗生素药物杂质聚合物的鉴别及含量测定方法


[0001]本专利技术涉及药物分析领域，特别是涉及一种培南类抗生素药物中杂质聚合物的含量测定方法。

技术介绍

[0002]抗生素致敏原并非药物本身，而是其降解形成的高分子聚合物，与体内大分子载体发生不可逆结合，引起抗原
‑
抗体反应，从而出现一系列过敏反应症状。药品中高分子聚合物的含量直接影响过敏反应的发生率，所以越来越多的抗生素药品要求严格控制培南类抗生素药物中的高分子聚合物的含量。
[0003]抗生素药物原料及其制剂的高分子聚合物检测方法，传统方法是采用分子排阻色谱法，但分子排阻色谱法对抗生素药物中聚合物的含量测定不准确，目前大部分抗生素聚合物的检测采用反相高效液相色谱法。

技术实现思路

[0004]基于以上问题，本专利技术旨在提供了一种能够更为准确的对抗生素药物中杂质聚合物进行鉴定和含量测定的方法。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供了一种培南类抗生素药物中杂质聚合物的鉴别方法，通过在特定条件下将样品降解反应产生聚合物色谱峰，产生主峰后相对保留时间约为2.0～2.6的色谱峰确定为培南类抗生素药物中的聚合物。
[0006]进一步地，降解反应过程为，将培南类抗生素药物适量，加入培南类抗生素药物10倍体积份的酸溶液，静置30分钟后，加碱溶液中和后，再加水稀释至100体积份，制得降解溶液。
[0007]优选地，降解反应中的酸溶液为盐酸、硫酸、硝酸、醋酸中至少一种，所述浓度为0.05mol/L～10mol/L。
[0008]本专利技术的一种培南类抗生素药物中聚合物的鉴别方法，通过高效液相色谱法通过色谱峰的保留时间来确定供试品溶液中的杂质聚合物，具体包括如下步骤：
[0009](1)进行降解反应，将适量培南类抗生素药物样品，约为30
‑
100mg，加入10体积份浓度为0.05mol/L～10mol/L的酸，静置30min后，加碱溶液中和，加水稀释至100体积份；
[0010](2)通过高效液相色谱法对降解反应的溶液中相对保留时间约在2.0～2.6的杂质进行检测，其中相对保留时间为2.0附近的色谱峰为聚合物1，相对保留时间为2.6附近的色谱峰为聚合物2。
[0011](3)通过高效液相色谱法对供试品中相对保留时间约在2.0～2.6的杂质进行检测，如果有相对保留时间为2.0附近的色谱峰为鉴定为杂质聚合物1，相对保留时间为2.6附近的杂质鉴定为杂质聚合物2。
[0012]优选地，聚合物1的最大吸收波长为280nm附近，聚合物2的最大吸收波长为370nm附近。
[0013]本专利技术还提供了一种基于上述鉴定方法的培南类抗生素药物中聚合物的检测方法，包括聚合物的含量测定方法，其特征在于，将供试品溶液中经鉴别后的聚合物，采用聚合物1的对照品按外标法对培南类抗生素药物供试品中杂质聚合物1和聚合物2的含量进行检测。
[0014]进一步地，培南类抗生素药物中聚合物的鉴定和含量测定方法中色谱条件相同，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合相为固定相；磷酸二氢钾溶液
‑
乙腈为流动相A，乙腈为流动相B；检测波长300nm；色谱条件A流动相在0～10分钟范围内保持90％～100％，在10～20分钟的范围内100％～50％；流速为0.8mL/min～1.2mL/min，进样体积20μl；
[0015]其中，流动相A制备方法：磷酸二氢钾溶液
‑
乙腈的配置方法：取磷酸二氢钾1.36g，加水1000ml，用磷酸调节pH值至7.00
±
0.05，取990ml加10ml乙腈混匀；固定相十八烷基硅烷键合相为ODS
‑
Hypersil Thermo Scientific 4.6
×
150mm 5μm或等效柱。
[0016]一种优选的洗脱方式为：A流动相在0～5分钟范围内保持100％，A流动相在5～20分钟的范围内100％～8％；按下表进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min；柱温25℃。
[0017]时间(min)A％B％0100051000208020
[0018]本专利技术的培南类抗生素药物中杂质聚合物的含量测定方法，适用于亚胺培南原料及美罗培南极其制剂产品检测为最佳。
附图说明
[0019]图1为实施例1中的酸降解样品溶液中聚合物的HPLC色谱图；
[0020]图2为实施例1中的酸降解溶液聚合物1的UV图；
[0021]图3为实施例1中的酸降解溶液聚合物1的MS图；
[0022]图4为实施例1中的酸降解溶液聚合物2的UV图；
[0023]图5为实施例1中的酸降解溶液聚合物2的MS图；
[0024]图6为实施例3中的供试品溶液的HPLC色谱图。
具体实施方式
[0025]实施例1
[0026]培南类抗生素药物中杂质聚合物的制备及结构确认，包括如下步骤：
[0027]取样品约30mg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加入约10ml 0.1mol/l的盐酸溶液溶解，静置30min，加入10ml 0.1mol/l氢氧化钠溶液，再加水稀释至刻度，摇匀，即得降解溶液。
[0028]色谱条件为：以十八烷基硅烷键合相(ODS
‑
Hypersil Thermo Scientific4.6
×
150mm 5μm或等效柱)为固定相；
[0029]磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾1.36g溶于1L水中，用磷酸调节pH至7.00
±
0.05)
‑
乙腈(99:1)为流动相A，乙腈为流动相B；
[0030]按下表进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min；检测波长300nm；柱温25℃；进样体积20μ
l。
[0031][0032][0033]聚合物1的相对保留时间为2.02，聚合物2的相对保留时间2.60。如图1所示为酸降解后聚合物1和聚合物2的HPLC色谱图。
[0034]相对保留时间为2.02的聚合物，在206nm和286nm有最大紫外吸收为亚胺培南的聚合物1。
[0035]相对保留时间为2.02的聚合物，该峰MS扫描的M+2H峰为600.2046，分子量为598.69，如图3，为亚胺培南的聚合物1，由于紫外光谱显示该物质在286nm左右具有吸收峰，样品在酸性条件下降解开环后形成酰胺二聚物，如图2所示。
[0036]相对保留时间为2.60的聚合物，在214nm和372nm有最大紫外吸收，为亚胺培南的聚合物2。如图4所示。
[0037]相对保留时间为2.60的聚合物，该峰MS扫描的M+2H峰为600.2052，分子量为598.69，为亚胺培南的聚合物2，如图5，由于紫外光谱显示该物质在370nm左右具有吸收峰，是样品在酸性条件下降解后形成具有更多共轭体系的聚合物，如图4所示。
[0038]实施例2...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种培南类抗生素药物中杂质聚合物的鉴别方法，其特征在于，将培南类抗生素药物样品降解反应后，通过高效液相色谱产生聚合物色谱峰，产生主峰后相对保留时间2.0～2.6的色谱峰确定为杂质聚合物。2.根据权利要求1所述的一种培南类抗生素药物中杂质聚合物的鉴别方法，其特征在于，所述降解反应过程为，将培南类抗生素药物样品加入10体积份的酸溶液，静置30分钟后，加入碱溶液中和后，再加水稀释至100体积份，制得降解溶液。3.根据权利要求1所述的一种培南类抗生素药物中杂质聚合物的鉴别方法，其特征在于，所述降解反应中的酸溶液为盐酸、硫酸、硝酸和醋酸中至少一种，所述浓度为0.05mol/L～10mol/L。4.根据权利要求1所述一种培南类抗生素药物中杂质聚合物的鉴别方法，其特征在于，鉴定杂质聚合物的具体步骤包括：(1)进行降解反应，将培南类抗生素药物样品加入10体积份浓度为0.05mol/L～10mol/L的酸，静置30min后，加碱溶液中和，加水稀释至100体积份；(2)通过高效液相色谱法对所述降解反应溶液中相对保留时间在2.0～2.6的杂质进行检测，其中相对保留时间为2.0附近的色谱峰为聚合物1，相对保留时间为2.6附近的色谱峰为聚合物2；(3)通过高效液相色谱法对供试品中相对保留时间在2.0～2.6的杂质进行检测，相对保留时间为2.0附近的色谱峰对应物质鉴定为杂质聚合物1，相对保留时间为2.6附近的色谱峰对应物质鉴定为杂质聚合物2。5.根据权利要求4所述一种培南类抗生素药物中杂质聚合物的鉴别方法，其特征在于所述聚合物1的最大紫外吸收波长为280nm附近，聚合物2的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘军，沈载宽，
申请(专利权)人：泊诺天津创新医药研究有限公司，
类型：发明
国别省市：