Z-藁本内酯在抗轮状病毒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种Z

【技术实现步骤摘要】
Z
‑
藁本内酯在抗轮状病毒中的应用


[0001]本专利技术涉及医药
，更具体的说是涉及Z
‑
藁本内酯在抗轮状病毒中的应用。

技术介绍

[0002]轮状病毒(Rotavirus，RV)属于呼肠孤病毒科的一种双链RNA病毒，是导致5岁以下婴幼儿腹泻的主要病原体，RV具有高度传染性和致病性。目前临床缺乏特效药物，而上市疫苗种类有限，价格昂贵，且由于RV毒株的变异性、多样性使其预防毒株的范围有限。
[0003]因此，如何有效防治轮状病毒是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术提供Z
‑
藁本内酯在抗轮状病毒中的应用。
[0005]Z
‑
藁本内酯(Z
‑
Ligustilide)，属于苯酞类化合物，化学结构如下：
[0006][0007]Z
‑
藁本内酯主要存在于当归、川芎等中药材的挥发油中。研究表明，Z
‑
Ligustilide具有抗炎镇痛、抗动脉粥样硬化、抗氧化应激、抗老年痴呆、抗肿瘤、神经保护、抑制心肌肥大和抗骨质疏松、骨关节炎等药理活性，同时对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、阪崎肠杆菌等细菌和黑曲霉和酿酒酵母等真菌均有抑制作用，但有关Z
‑
Ligustilide抗RV的作用尚未报道。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0009]Z
‑/>藁本内酯在制备抗轮状病毒制剂中的应用。
[0010]本专利技术研究显示，Z
‑
藁本内酯通过抑制轮状病毒VP6的基因表达，进一步抑制轮状病毒的生物合成，实现对轮枝病毒的防治效果。
[0011]优选的，所述Z
‑
藁本内酯的有效浓度为70μM
‑
85μM，更优选的，80μM。
[0012]本专利技术的另一目的是，提供Z
‑
藁本内酯在制备由抗轮状病毒引起的疾病的制剂中的应用。
[0013]优选的，所述Z
‑
藁本内酯的有效浓度为70μM
‑
85μM，更优选的，80μM。
[0014]本专利技术的另一目的是，提供一种抗轮状病毒的制剂，包括Z
‑
藁本内酯。
[0015]优选的，所述Z
‑
藁本内酯的有效浓度为70μM
‑
85μM，更优选的，80μM。
[0016]优选的，所述制剂还包括药学上允许的辅料。
[0017]优选的，所述制剂为固体、半固体或液体的形式。
[0018]优选的，所述制剂为非水溶液、混悬液、锭剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂或散剂。
[0019]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了Z
‑
藁本内酯在制备抗轮状病毒制剂中的应用。Z
‑
藁本内酯在60μM
‑
95μM，对细胞没有药物毒性，且在70μM
‑
85μM能够有效抑制轮状病毒的生物合成。Z
‑
藁本内酯通过抑制结构蛋白VP6，发挥抗轮状病毒生物合成的作用，对轮状病毒无吸附和直接杀灭作用。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0021]图1为正常MA104细胞；
[0022]图2为轮状病毒感染48h后的MA104细胞；
[0023]图3为Z
‑
Ligustilide对细胞的毒性结果(N组，代表未用药组)；
[0024]图4为Z
‑
Ligustilide抗RV吸附作用结果，(与Ribavirin组比较，****p<0.0001)；
[0025]图5为Z
‑
Ligustilide对RV直接杀灭作用(与Ribavirin组比较，****p<0.0001)；
[0026]图6为Z
‑
Ligustilide对RV抗生物合成作用(与Ribavirin组比较，*p<0.05，**p<0.01)；
[0027]图7为Z
‑
Ligustilide对RV感染MA104细胞病毒结构蛋白VP6基因表达的影响(与Rotavirus组相比，**p<0.01)。
具体实施方式
[0028]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]实施例1
[0030]1.材料与仪器见表1。
[0031]表1
[0032][0033][0034][0035]2.主要试剂配制方法
[0036]Z
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藁本内酯母液：称取Z
‑
Ligustilide标准品5.2mg，纯度≥98％,在超净台内加1ml细胞级DMSO溶解，用一次性无菌针管将药液通过0.22μM滤膜过滤除菌，配置母液为1mM。
[0037]DMEM培养基(含10％胎牛血清、1％双抗)：在超净工作台内将50ml胎牛血清和5ml双抗依次加入400ml的高糖DMEM培养基中，充分混匀后分装置标记好的50ml离心管中，封口，4℃保存。
[0038]10μg/mL不含EDTA的胰酶：不含EDTA的0.25％胰蛋白酶消化液和不含胎牛血清的DMEM培养基以1：250的体积比比例稀释至10μg/mL。
[0039]RV生长维持液：10μg/mL不含EDTA的胰酶和不含胎牛血清的DMEM培养基以1：10的体积比比例稀释至1μg/mL。
[0040]实施例2
[0041]轮状病毒感染MA104细胞形态变化
[0042]将RV病毒置于37℃水浴锅中融化，经过胰蛋白酶预处理30min后，将病毒溶液加入到生长到80～90％的MA104细胞中，RV感染所用的细胞培养基中不添加血清。病毒感染后的MA104细胞会发生细胞病变CPE(Cytopathic effect)，当病变程度达到75％时，
‑
20℃冰箱中冻存。重复冻存和融化过程3次后，低温离心，收取上清，即为所得病毒液。重复上述过程，扩增RV。
[0043]如附图1所示，正常MA104细胞形状为三角形或梭形，细胞轮廓明显清晰；如附图2所示，感染RV后的MA104细胞，细胞发生明显本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Z
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藁本内酯在制备抗轮状病毒制剂中的应用。2.Z
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藁本内酯在制备由抗轮状病毒引起的疾病的制剂中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述Z
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藁本内酯的有效浓度为70
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85μM。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述Z
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藁本内酯的有效浓度为80μM。5.一种抗轮状病毒的制剂，其特征在于，包括Z
‑
藁本...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋丽军，赵文昌，钱余培，
申请(专利权)人：广东医科大学，
类型：发明
国别省市：