一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠及制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠及其制备方法和应用，包括步骤：（a）将螺旋拟柱孢藻接种于液体培养基Ⅰ中进行基础培养，之后接种于液体培养基Ⅱ中扩大培养，得螺旋拟柱孢藻悬液；(b)将螺旋拟柱孢藻悬液和海藻酸钠水溶液混合，配成藻胶混合液；(c)将藻胶混合液滴入氯化钙水溶液中，即得固定化螺旋拟柱孢藻藻珠。本发明专利技术以对虾养殖池有益的微藻螺旋拟柱孢藻为主要成分，该藻株为虾池水体自然来源，非外来添加，固定化该藻株所制成的微藻藻株能明显降低虾池氨氮、亚硝氮、磷酸盐等物质及铅、镉、铜等重金属水平，也能抑菌对虾致病弧菌，稳定和改善水质，促进对虾健康生态养殖，具有广阔的应用前景。阔的应用前景。阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠及制备方法和应用


[0001]本专利技术属于水产养殖
，具体涉及一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]凡纳滨对虾(Penaeus vannamei Boone,1931)俗称南美白对虾，因其适应性强，耐盐范围广，海水及淡水均可养殖，此外肉质鲜美，蛋白质含量高，虾体离水存活时间长等优点，是世界三大对虾(中国明虾、斑节对虾、南美白对虾)养殖中单产最高的虾种，也是世界上产值居首次的虾种。中国是全球最大的水产养殖生产国，南美白对虾自1988年由中国科学院海洋研究所从美国引进以来，尤其是1994年首次育苗和养殖关键技术取得成功，南美白对虾已成为我国虾类养殖产量最高的品种，约占我国对虾养殖量的70%以上。但随着近年养殖规模和密度扩大、种质退化，水质恶化，病害频繁及长期、大量使用抗生素及弧菌等致病菌等原因，使得南美白对虾养殖受到很大的影响，因此，预防南美白对虾养殖的病害问题，寻求对虾的健康、生态养殖尤为迫切而重要。
[0003]水产微生态制剂因其绿色、环保，无残留污染，可替代传统的抗生素，在水产健康养殖中正在被广泛的应用和推广，业已成为水产生态健康和高效养殖的一个新方向。21世纪以来，对虾养殖市场上的微生态制剂主要有光合细菌,酵母菌和芽孢杆菌类、益生素以及双歧杆菌制剂等为数不多的较单一的产品，而由藻类生物所引起的微生态作用则研究较少，藻类作为养殖水体中重要的组成成分，是重要的初级生产者和水化学调节者，在维持养殖生态系统的多样性、物质循环和能量传递方面发挥着重要作用。
[0004]固定化微藻应用在生物监测和废水处理等环境领域中时间不长，水产养殖领域的研究较少。因此，开发一种适用于对虾健康生态养殖的固定化微藻藻珠将具有较好的市场前景。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的首要目的在于提供一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠，该固定化螺旋拟柱孢藻藻珠可以改善虾池水质、降低铅、镉、铜等重金属水平，又能抑菌对虾致病弧菌等效果，有助于对虾健康生态养殖。
[0006]本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠的制备方法，包括如下步骤：（a）将螺旋拟柱孢藻接种于液体培养基Ⅰ中进行基础培养，之后接种于液体培养基Ⅱ中扩大培养，得螺旋拟柱孢藻悬液；(b) 将螺旋拟柱孢藻悬液和海藻酸钠水溶液混合，配成藻胶混合液；(c)将藻胶混合液滴入氯化钙水溶液中，即得固定化螺旋拟柱孢藻藻珠。
[0007]优选地，步骤（a）中，所述液体培养基Ⅰ的组分按重量份包括：硝酸钙0.15克、硝酸钾0.1克、硫酸镁0.04克、甘油磷酸钠0.025克、维生素B
12 0.1微克、生物素0.1微克、硫胺素
10微克、乙二胺四乙酸二钠2.25毫克、氯化锰123微克、氯化锌15微克、钼酸钠12微克、氯化铁291微克、氯化钴6微克、三羟甲基甲胺基丙磺酸0.4克、蒸馏水1000mL，pH值为8.2；优选地，步骤（a）中，所述液体培养基Ⅱ的组分按重量份包括：硝酸钠0.38克、硫酸镁75毫克、氯化钙36毫克、柠檬酸6毫克、碳酸钠20毫克、柠檬酸铁铵6毫克、磷酸氢二钾40毫克、硫酸锌0.22毫克、硼酸2.86毫克、氯化锰1.86毫克、硝酸钴50微克、硫酸铜80微克、钼酸钠0.36微克、蒸馏水1000mL，pH值为8.2。
[0008]优选地，步骤（1）中，所述螺旋拟柱孢藻悬液的密度8.0～10.0
×
107.L
‑1。
[0009]优选地，步骤（2）中，所述螺旋拟柱孢藻悬液和海藻酸钠水溶液的体积比为1～2:1。
[0010]优选地，所述海藻酸钠水溶液的质量浓度为3～3.5%，更优选为3.5%；所述氯化钙水溶液的质量浓度为2.5～3%，更优选为3%。
[0011]本专利技术还提供了一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠，由上述制备方法制备得到。
[0012]本专利技术还提供了上述固定化螺旋拟柱孢藻藻珠在对虾健康生态养殖中的应用。
[0013]优选地，所述固定化螺旋拟柱孢藻藻珠应用在降低虾池水体中氨氮、亚硝酸盐、磷酸盐的水平。
[0014]优选地，所述固定化螺旋拟柱孢藻藻珠应用在对虾池污染重金属离子的吸附，包括但不限于铅、镉、铜。
[0015]优选地，所述固定化螺旋拟柱孢藻藻珠应用在抑制虾池病原菌，包括但不限于副溶血弧菌、鳗弧菌。
[0016]本专利技术与现有技术相比，具有如下有益效果：本专利技术以对虾养殖池有益的微藻螺旋拟柱孢藻为主要成分，该藻株为虾池水体自然来源，非外来添加，固定化该藻株所制成的微藻藻株能明显降低虾池氨氮、亚硝氮、磷酸盐等物质及铅、镉、铜等重金属水平，也能抑菌对虾致病弧菌，稳定和改善水质，促进对虾健康生态养殖，具有广阔的应用前景。
附图说明
[0017]图1为本专利技术制备得到的固定化螺旋拟柱孢藻藻珠（SA藻胶珠）与SA空胶对水体三种理化因子的去除率；图2为本专利技术制备得到的固定化螺旋拟柱孢藻藻珠（SA藻胶珠）对铅、镉、铜等重金属离子的生物吸附量；图3为本专利技术制备得到的固定化螺旋拟柱孢藻藻珠（SA藻胶珠）对虾池水体氨氮、亚硝酸盐、磷酸盐及微生物的抑制率（乙池）。
具体实施方式
[0018]下面通过具体实施方式来进一步说明本专利技术，以下实施例为本专利技术较佳的实施方式，但本专利技术的实施方式并不受下述实施例的限制。
[0019]本专利技术采用的螺旋拟柱孢藻由揭阳职业技术学院制备、鉴定及提供（参见：一株虾池来源的螺旋拟柱孢藻藻珠的分离鉴定及重金属离子Cu
2+
、Cd
2+
、Pb
2+
对其生产的影响，微生物学报，2019,59（7）：1307
‑
1317）。
[0020]实施例1：一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠的制备方法，包括如下步骤：（1）将螺旋拟柱孢藻接种于已灭菌的液体培养基Ⅰ中进行培养，培养器皿先后采用灭菌的24孔培养板、10mL试管、50mL、100mL、250mL三角锥形瓶，培养周期依次为1～2月(培养板)、1个月(试管)、14天(锥形瓶)。培养环境及条件为：恒温光照培养箱，光强25
µ
E/m2.s，光暗周期12:12h，温度(25
±
1)℃；所述液体培养基Ⅰ的组分按重量份包括：硝酸钙0.15克、硝酸钾0.1克、硫酸镁0.04克、甘油磷酸钠0.025克、维生素B
12
0.1微克、生物素0.1微克、硫胺素10微克、乙二胺四乙酸二钠2.25毫克、氯化锰123微克、氯化锌15微克、钼酸钠12微克、氯化铁291微克、氯化钴6微克、三羟甲基甲胺基丙磺酸0.4克、蒸馏水1000mL，pH值为8.2；（2）将在250mL三角锥形瓶培养至对数生长期（约培养周期第6～9天）的藻种接种于液体培养基Ⅱ中进行扩大培养，培养器皿选用无菌的3～10L三角锥形瓶或培养罐进行，通以无菌过滤空气搅拌，通气速率为1.5L/min，培养环境及条件同（1）；所述液体培养基Ⅱ的组分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种固定化螺旋拟柱孢藻藻珠的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（a）将螺旋拟柱孢藻接种于液体培养基Ⅰ中进行基础培养，之后接种于液体培养基Ⅱ中扩大培养，得螺旋拟柱孢藻悬液；(b) 将螺旋拟柱孢藻悬液和海藻酸钠水溶液混合，配成藻胶混合液；(c)将藻胶混合液滴入氯化钙水溶液中，即得固定化螺旋拟柱孢藻藻珠。2.根据权利要求1所述的固定化螺旋拟柱孢藻藻珠的制备方法，其特征在于，步骤（a）中，所述液体培养基Ⅰ的组分按重量份包括：硝酸钙0.15克、硝酸钾0.1克、硫酸镁0.04克、甘油磷酸钠0.025克、维生素B
12 0.1微克、生物素0.1微克、硫胺素10微克、乙二胺四乙酸二钠2.25毫克、氯化锰123微克、氯化锌15微克、钼酸钠12微克、氯化铁291微克、氯化钴6微克、三羟甲基甲胺基丙磺酸0.4克、蒸馏水1000mL，pH值为8.2；所述液体培养基Ⅱ的组分按重量份包括：硝酸钠0.38克、硫酸镁75毫克、氯化钙36毫克、柠檬酸6毫克、碳酸钠20毫克、柠檬酸铁铵6毫克、磷酸氢二钾40毫克、硫酸锌0.22毫克、硼酸2.86毫克、氯化锰1.86毫克、硝酸钴50微克、硫酸铜80微克、钼酸钠0.36微克、蒸馏水1000m...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂利华，肖璐，王美霞，林壮森，黄润嘉，方玉芳，古牡芳，
申请(专利权)人：揭阳职业技术学院，
类型：发明
国别省市：