一株产绿原酸的侧孢短芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物，具体涉及一株产绿原酸的侧孢短芽孢杆菌及其应用，该菌株被命名为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1

【技术实现步骤摘要】
一株产绿原酸的侧孢短芽孢杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物，具体涉及一株产绿原酸的侧孢短芽孢杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]本专利技术
技术介绍
中公开的信息旨在增加对本专利技术总体背景的理解，而该公开不应必然被视为承认或以任何形式暗示该信息已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]绿原酸(Chlorogenic acid)又称咖啡鞣酸，是由咖啡酸与奎尼酸组成的缩酚酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用，是国际公认的“植物黄金”，在医药、日用化工和食品等行业被广泛应用。
[0004]绿原酸作为一种绿色饲料添加剂被广泛的应用于动物饲料中，其获得途径主要是通过从各种药用植物中提取。常用的提取方法主要有石硫醇法、水提
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醇析法、醇提
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铅盐沉淀法、聚酰胺柱层析法等。应用中存在提取过程繁琐、成本高等问题，尤其是以这些方法提取的绿原酸，以饲料添加剂应用于畜禽养殖时可能会对动物机体健康带来隐患。
[0005]以微生物发酵产绿原酸是一种新的制备方法。目前报道的属于《饲料添加剂品种目录(2013)》微生物，并且可用于发酵产绿原酸的菌株为枯草芽孢杆菌，但是产量较低。因此，分离筛选能够高产绿原酸的益生菌作为饲料添加剂，既能发挥绿原酸功效，又能兼具发酵菌株自身益生性能，应用前景广阔。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了一株侧孢短芽孢杆菌，该菌株能够高产绿原酸，为扩大绿原酸药源、保护珍稀药用植物资源，丰富菌种资源，以及促进植物内生菌的开发利用奠定基础；该菌株还具备良好的抑菌能力、抗氧化能力、产酸性能和对小鼠溃疡性结肠炎的防治作用，并且对小鼠机体应激状态具有一定的干预和缓解作用。
[0007]具体地，本专利技术提供了下述的技术特征，以下技术特征的一个或多个的结合构成本专利技术的技术方案。
[0008]在本专利技术的第一方面，本专利技术提供了一株高产绿原酸的侧孢短芽孢杆菌，该菌株被命名为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170，该菌已于2022年06月20日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，地址为：中国武汉，武汉大学)，保藏编号为：CCTCC NO：M 2022932。
[0009]该菌株芽孢侧生，芽孢呈梭形，可在常温、有氧条件下良好生存，具有良好的生长性能，对金黄色葡萄球菌、产气荚膜杆菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌和鸡肠炎沙门氏菌等具有良好的抑菌效果；该菌株还具备良好的抗氧化能力，能够清除1,1
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二苯基
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苦基肼自由基(DPPH
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)和羟自由基(HO
·
)，同时具备良好的产酸性能，比如在本专利技术的一个实施方式中，发酵培养该菌株24h时，发酵上清液中乳酸和乙酸的含量可分别达到1.42g/L和1.84g/L。
[0010]该菌株具有产绿原酸的能力。在本专利技术的实施方式中，以LB培养基进行培养时，所述LB培养基的组成(质量百分数)为：葡萄糖0.2％、蛋白胨1.0％、酵母膏0.5％、NaCl 0.5％，pH 7.0，该菌株表现出良好的产绿原酸的能力。并且，经过培养基优化能够进一步显著提升绿原酸的产量。比如，在本专利技术的实施方式中，以葡萄糖、玉米淀粉、玉米浆干粉中的一种或多种作为碳源(特别是以葡萄糖为碳源)，以有机氮源为氮源(特别是以蛋白胨为氮源)时能够获得更高的绿原酸产量。比如，培养基中添加铜离子(比如硫酸铜)，相较于没有铜离子的情况，绿原酸的产量会有改善，比如当铜离子的添加量为0.001
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0.005％(质量百分数)时可改善绿原酸的产量，特别是，当铜离子的添加量为0.003％(质量百分数)时，绿原酸的产量相较于其他添加量或不添加时会显著提高。
[0011]在此基础上，本专利技术提供了一种优化的培养基，使用该培养基培养侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170，能够高产绿原酸。所述培养基以葡萄糖作碳源、以蛋白胨作氮源，蛋白胨的添加量为1
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2％(质量百分数)、并添加硫酸铜，硫酸铜的添加量为0.002
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0.005％(质量百分数)。在本专利技术的一些实施方式中，所述培养基的示例组成(质量百分数)为：葡萄糖0.2％、蛋白胨1.5％、酵母膏0.5％、NaCl 0.5％、硫酸铜0.003％，pH 7.0。
[0012]在本专利技术的实施方式中，将侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170分别在LB培养基及本专利技术的优化培养基中发酵培养，以优化培养基发酵培养48h时绿原酸含量达11.81μg/mL，相较于在LB培养基中培养48h(绿原酸产量1.61μg/mL)，绿原酸的产量可提高7.3倍，并且随着发酵时间的增加，采用优化配方发酵产生的绿原酸的含量增长显著，而LB培养基中随着发酵时间的延长，绿原酸的含量的变化并不明显。
[0013]在本专利技术的第二方面，本专利技术提供了一种菌剂或饲料，其包含上述第一方面中所述的侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170和/或其发酵物。
[0014]在本专利技术的第三方面，本专利技术提供了侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170和/或其发酵物的一系列应用，包括在制备具有下述功能中的一种或多种的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；
[0015]1)在制备抗氧化的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；
[0016]2)在制备抑菌的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；
[0017]3)在制备防治肠炎的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；
[0018]4)在制备提高动物抗氧化应激能力的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用。
[0019]在本专利技术的实施方式中，侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170和/或其发酵物具备良好的抗菌能力，对金黄色葡萄球菌、产气荚膜杆菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌和鸡肠炎沙门氏菌等菌株具有良好的抑菌效果。
[0020]在本专利技术的实施方式中，侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170和/或其发酵物具备良好的抗氧化能力，抗氧化能力包括清除DPPH自由基和羟自由基。
[0021]在本专利技术的实施方式中，侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170能够防治肠炎，所述肠炎尤其指溃疡性结肠炎，包括改善溃疡病结肠炎、及其导致的体重降低、结肠变短的情况，并且能够调控血清炎症因子水平，包括提升抗炎本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株高产绿原酸的侧孢短芽孢杆菌，其特征在于，其命名为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)BLCC1
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0170，该菌已于2022年06月20日保藏于位于中国湖北省武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2022932。2.一种菌剂或饲料，其特征在于，其包含权利要求1所述的侧孢短芽孢杆菌和/或其发酵物。3.权利要求1所述的侧孢短芽孢杆菌和/或其发酵物在制备具有下述功能中的一种或多种的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；1)在制备抗氧化的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；2)在制备抑菌的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；3)在制备防治肠炎的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用；4)在制备提高动物抗氧化应激能力的药品、菌剂或饲料添加剂中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗氧化包括清除羟自由基和/或清除DPPH自由基。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述肠炎为溃疡性结肠炎。6.一种生产绿原酸的方法，其包括发酵培养权利要求1中所述的侧孢短芽孢杆菌。7.根据权利要求6...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷巍，汪祥燕，徐海燕，王红，辛国芹，李金敏，孙尹双，张宫胤，翟延庆，张冠军，单宝龙，陈雷，郝木强，盛永杰，崔海英，
申请(专利权)人：山东宝来利来生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：