耐热性多聚体蛋白支架、耐热性多聚体蛋白支架在疫苗中的应用制造技术

本申请属于生物医药技术领域，尤其涉及耐热性多聚体蛋白支架、耐热性多聚体蛋白支架在疫苗中的应用。本申请提供了耐热性多聚体蛋白支架，包括：用于偶联的第一标签和耐热性多聚体蛋白；所述第一标签连接在所述耐热性多聚体蛋白的N端；所述耐热性多聚体蛋白具有SeqIDNO.1～SeqIDNO.4所示序列中的一种或多种。本申请提供了耐热性多聚体蛋白支架、耐热性多聚体蛋白支架在疫苗中的应用，通过免疫原性较高的新型耐热性多聚体蛋白，用于制备各种疫苗抗原的耐热性多聚体蛋白支架和佐剂，从而建立一种基于耐热性多聚体蛋白制备疫苗热稳定性支架并增强抗原免疫原性的方法。定性支架并增强抗原免疫原性的方法。定性支架并增强抗原免疫原性的方法。

【技术实现步骤摘要】
耐热性多聚体蛋白支架、耐热性多聚体蛋白支架在疫苗中的应用


[0001]本申请属于生物医药
，尤其涉及耐热性多聚体蛋白支架、耐热性多聚体蛋白支架在疫苗中的应用。

技术介绍

[0002]传统疫苗主要基于减毒或灭活的活病原体。尽管其通常在宿主体内诱导保护性免疫反应方面非常有效，但该类型疫苗通常存在安全问题。例如，减毒活疫苗可能通过恢复为野生型而重新获得致病性，尤其是在免疫缺陷人群中。此外，此类疫苗通常需要严格的储存条件以保持其免疫活性，意外暴露于环境压力(例如，光照或温度)可能会导致免疫原性丧失。批次间变异性也可能是此类疫苗的一个问题，尤其是在大规模生产培养病原体期间。改良的亚单位疫苗与减毒活疫苗或灭活疫苗相比，具有更高的安全性和更小的批次间差异，但一直存在低免疫原性的缺陷，需要以高剂量和佐剂给药。
[0003]为了解决传统疫苗的问题，一种策略是通过将抗原与多聚体蛋白支架组合以赋予抗原高的稳定性或免疫原性。其工作原理主要是多聚体蛋白支架具有明确定义的平行多聚体结构，具有高稳定性，允许引入目标结合抗原和铰链区，并在不破坏目标抗原结合的情况下通过自组装实现所需的多价性。多聚体蛋白支架可在表面呈现多个副本的抗原或抗原表位，产生高局部密度的结构有序表位，并能够与B细胞受体进行高亲和力相互作用，诱发B细胞受体信号传导和强免疫刺激(例如T辅助细胞独立的B细胞活化)；其次，由于多聚体蛋白支架的颗粒性质和相对较大的尺寸，其可被专职抗原递呈细胞(例如树突状细胞和巨噬细胞)有效摄取和处理，进而促进强烈的体液和细胞免疫反应。/>[0004]但是，现有多聚体蛋白抗原支架种类少，存在候选抗原远多于抗原支架的问题，导致机体先对抗原支架的免疫反应会抑制对抗原
‑
支架组合的免疫反应，急需开发新型疫苗抗原支架。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本申请提供了耐热性多聚体蛋白支架、耐热性多聚体蛋白支架在疫苗中的应用，将新型耐热性多聚体蛋白作为各种疫苗抗原的耐热性多聚体蛋白支架和佐剂，建立一种基于耐热性多聚体蛋白制备疫苗热稳定性支架并增强抗原免疫原性的方法。
[0006]本申请第一方面提供了耐热性多聚体蛋白支架，包括：
[0007]用于偶联的第一标签和耐热性多聚体蛋白；
[0008]所述第一标签连接在所述耐热性多聚体蛋白的末端；
[0009]所述耐热性多聚体蛋白具有Seq ID NO.1、Seq ID NO.2、Seq ID NO.3和Seq ID NO.4所示序列中的一种或多种。
[0010]具体的，所述第一标签连接在所述耐热性多聚体蛋白的N端或C端，优选为N端；保证多聚体蛋白的N端或C端暴露在颗粒蛋白表面。
[0011]另一实施例中，所述第一标签选自SpyCatcher、SnoopCatcher、SdCatcher和DogCatcher中的一种或多种。
[0012]另一实施例中，所述标签通过连接肽连接在所述耐热性多聚体蛋白的末端，可以为N端或C端；所述连接肽的序列为(GGGGS)
n
(1≤n≤4)或(GGGGA)
n
(1≤n≤4)。
[0013]具体的，所述连接肽为柔性连接肽，柔性连接肽是一类以甘氨酸Gly为主要成分的柔软易弯折的连接肽，可根据连接蛋白的不同，长度适当进行调整，本申请所述连接肽选择GGGGSGGGGSGGGGS效果最佳。
[0014]本申请第二方面提供了所述的耐热性多聚体蛋白支架在制备疫苗中的应用。
[0015]本申请第三方面提供了一种疫苗，包括：所述耐热性多聚体蛋白支架和连接有第二标签的抗原；
[0016]所述第二标签可与所述第一标签重组形成异肽键偶联；所述抗原为可递呈病毒或/和细菌的特征性或保护性抗原；所述第二标签为与所述第一标签对应的标签，所述第二标签包括：SpyTag、SnoopTag、SdTag和DogTag中的一种或多种。
[0017]具体的，本申请的耐热性多聚体蛋白支架用于递呈各种病毒或细菌的特征性抗原，以制备相应的纳米颗粒的疫苗。
[0018]具体的，耐热性多聚体蛋白具有Seq ID NO.1的序列，Seq ID NO.1的序列为：
[0019]MAFEFKLPAFEFKLIHEGEIVKWFVKPGDEVNEDDVLCEVQNDKAVVEIPSPVKGKVLEILVPEGTVATVGQTLITLDAPAFEFKLLKDKSKKKRKKRKKRKRCRKRKRLTLSLPMHRQLKRRLARTAASSPCRPCASMRAKKASIFGLSKERAAFEFKLKEDIDAFLAGGAKPAPAAAEEKAAPAAAKPATTEGEFPETREKMSGIRRAIAKAPHVTLMDEADVTKLVAHRKKFKAIAAEKGIKLTFLPYVVKALVSALREYPVLNTSIDDETEEIIQKHYYNIGIAADTDRGLLVPVIKHADRKPIFALAQEINELAEKARDGKLTPGEMKGASCT。
[0020]具体的，耐热性多聚体蛋白具有Seq ID NO.1的序列，其核苷酸序列为：
[0021]ATGGCTTTTGAATTTAAGCTGCCGGCTTTTGAATTTAAGCTGATCCACGAAGGTGAAATTGTCAAATGGTTTGTGAAACCGGGCGATGAAGTGAACGAAGACGATGTATTGTGCGAAGTGCAAAATGACAAGGCGGTTGTCGAAATTCCCTCCCCGGTCAAAGGGAAAGTGCTTGAAATCCTCGTCCCGGAGGGAACAGTGGCAACGGTCGGGCAAACGCTCATCACGCTCGATGCGCCGGCTTTTGAATTTAAGCTGTTAAAGGACAAGAGCAAGAAGAAGCGAAAAAAGAGGAAAAAACGGAAACGGTGTCGAAAGAGGAAAAGGTTGACGCTGTCGCTCCCAATGCACCGGCAGCTGAAGCGGAGGCTGGCCCGAACCGCCGCGTCATCGCCATGCCGTCCGTGCGCAAGTATGCGCGCGAAAAAGGCGTCGATATTCGGCTTGTCCAAGGAACGGGCAGCTTTTGAATTTAAGCTGAAAGAAGATATTGACGCTTTCCTTGCCGGCGGCGCAAAACCGGCACCGGCCGCAGCGGAGGAAAAAGCGGCGCCGGCCGCAGCGAAACCGGCGACGACAGAAGGCGAATTCCCGGAAACGCGCGAGAAAATGAGCGGCATCCGTCGGGCGATTGCCAAAGCTCCGCACGTGACGCTGATGGACGAAGCCGATGTGACGAAGCTTGTTGCTCACCGAAAAAAATTCAAGGCTATTGCCGCGGAAAAAGGCATCAAGCTGACGTTTTTGCCGTACGTCGTCAAAGCGCTCGTTTCCGCGCTG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.耐热性多聚体蛋白支架，其特征在于，包括：用于偶联的第一标签和耐热性多聚体蛋白；所述第一标签连接在所述耐热性多聚体蛋白的末端；所述耐热性多聚体蛋白具有Seq ID NO.1、Seq ID NO.2、Seq ID NO.3和Seq ID NO.4所示序列中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的耐热性多聚体蛋白支架，其特征在于，所述第一标签选自SpyCatcher、SnoopCatcher、SdCatcher和DogCatcher中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的耐热性多聚体蛋白支架，其特征在于，所述标签通过连接肽连接在所述耐热性多聚体蛋白的末端；所述连接肽的序列为(GGGGS)
n
或(GGGGA)
n
，其中，1≤n≤4。4.权利要求1～3任一项所述的耐热性多聚体蛋白支架在制备疫苗中的应用。5.一种疫苗，其特征在于，包括：权利要求1～3任一项所述的耐热性多聚体蛋白支架和连接有第二标签的抗原；所述第二标签可与所述第一标签重组形成异肽键偶联；所述抗原为可递呈病毒或/和细菌的特征性或保护性抗原；所述第二标签为与所述第一标签对应的标签，所述第二标签包括：SpyTag、SnoopTag、SdTag和DogTag中的一种或多种。6.根据权利要求5所述的疫苗，其特征在于，所述抗原为病原的保护性抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈泽良，张劲松，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：