一种测定食用油脂中甘油的不可交换氢位点稳定同位素比值的方法技术

本发明专利技术提出一种测定食用油脂中甘油的不可交换氢位点稳定同位素比值的方法，属于稳定同位素分析技术领域。所述方法，包括如下步骤：a)甘油初样品的制备；b)采用气相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种测定食用油脂中甘油的不可交换氢位点稳定同位素比值的方法


[0001]本专利技术属于稳定同位素分析
，具体涉及一种测定食用油脂中甘油的不可交换氢位点稳定同位素比值的方法。

技术介绍

[0002]油脂的补充是人类膳食中必不可少的环节，作为日常生活必需品对大众身体健康有着至关重要的意义。随着国家提出的健康政策以及国民的健康需求，食用油行业也迎来新的机遇与挑战，对食用油的真实性及品质的鉴别提出了更高的要求。
[0003]国内外研究表明，不同于当前针对于分子含量的特征分析，稳定同位素技术研究的是化合物原子水平的信息，已成功应用于果汁、蜂蜜、饮料酒的掺假检测和真实性鉴别，在食用油领域也已有一些研究报道。如S.Kelly根据脂肪酸碳同位素的特征研究花生油、棕榈油和葵花油的差异，Jorge E.Spangenberg研究了橄榄油的脂肪酸的稳定碳同位素比值，Fronza根据食用油脂中甘油的碳同位素比值区分C3植物油和C4植物油，Fronza,G通过测定甘油的稳定氧同位素比值鉴定植物油的品种和源产地，国内金青哲等利用碳同位素比值法进行了花生油和玉米油掺合物的检测研究，Camin等人根据脂肪酸的稳定氢同位素比值研究橄榄油的产地和种类特征等。
[0004]可见，稳定同位素的大部分研究主要集中于油脂整体、甘油和脂肪酸的碳氧同位素分析与利用，尚未有油脂中甘油氢同位素比值的应用报道。

技术实现思路

[0005]为了解决食用油脂中甘油不可交换氢位点稳定同位素比值难以测定的问题，本专利技术建立了一种可批量化处理样品，并相对于核磁共振法可在短时间内完成快速分析的方法。
[0006]油脂的主要成分为食用油脂，而食用油脂主要以甘油为骨架，结合各脂肪酸而成。通过油脂的理化特征可知，不仅不同种类的油脂中脂肪酸种类、含量不同，即使是同一品种油脂，由于生物代谢过程不同物质的稳定同位素比值不一致，并且，油脂易吸潮，油脂基质中的水分容易影响甘油氢同位素比值测定，因此，油脂整体的氢同位素比值难以用于油脂掺假检测的精确分析。脂肪酸(甲酯)作为较优选择，但不同样品的脂肪酸含量会有差异，导致在测定(常用GC
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C
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IRMS体系)过程中须严格进样量使之产生合适的信号强度，信号强度一旦不达标则需重新测定，影响分析效率和结果准确。
[0007]与之相比，甘油的同位素分析具有更大的优势，其为食用油脂的骨架成分，容易控制进样量。因此，如何测定甘油不可交换氢的同位素比值决定甘油能否得到应用的关键。
[0008]本专利技术一实施例提出一种测定食用油脂中甘油的不可交换氢位点稳定同位素比值的方法，包括如下步骤：
[0009]a)甘油初样品的制备
[0010]a1)向食用油脂中添加反应助剂，水解反应，离心，取下层溶液，添加盐酸溶液调节pH至5～6；
[0011]a2)向步骤a1)所得溶液中添加醇试剂溶解后烘干，重复添加醇试剂溶解后烘干至少一次，得甘油固形物；
[0012]a3)采用有机试剂溶解步骤a2)所得甘油固形物，得甘油初样品；
[0013]b)采用气相色谱
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裂解
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稳定同位素比值质谱仪，测定上述甘油初样品中甘油的稳定氢同位素比值；
[0014]c)选择不可交换氢位点稳定同位素比值已知的甘油作为工作标准物质，按步骤a2)
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a3)进行处理，按步骤b)进行测定，得甘油工作标准物质的稳定氢同位素比值；
[0015]d)通过对比甘油工作标准物质的稳定氢同位素比值的测定结果和已知的甘油工作标准物质的不可交换氢位点稳定同位素比值，结合甘油初样品的稳定氢同位素比值测定结果，相应计算得出待测食用油脂中甘油不可交换氢位点稳定同位素比值。
[0016]本专利技术一实施例中，步骤a1)中，反应助剂为碱性试剂的有机溶液。
[0017]本专利技术一实施例中，步骤a1)中，碱性试剂的有机溶液为氢氧化钾的甲醇溶液。具体地，氢氧化钾的甲醇溶液的浓度为1
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50g/200ml。优选的，氢氧化钾的甲醇溶液的浓度为23.2g/200ml。氢氧化钾的甲醇溶液主要为了使得待测食用油脂进行水解得待测甘油。
[0018]本专利技术实施例中，步骤a1)中，添加盐酸溶液主要为了中和反应助剂中的氢氧化钾。
[0019]本专利技术一实施例中，步骤a1)中，反应助剂还包括异辛烷。异辛烷主要为了将水解后产生的脂肪酸溶解，使之与甘油、甲醇分层，便于离心分离。优选的，食用油脂、氢氧化钾的甲醇溶液、异辛烷的用量比可以为0.4g：1mL：8mL。
[0020]本专利技术一实施例中，步骤a1)中，所述食用油脂包括橄榄油、大豆油或花生油中至少一种。
[0021]本专利技术一实施例中，步骤a2)中，所述醇试剂包括甲醇、乙醇或丙醇中至少一种。添加醇试剂，主要为了用醇试剂中的羟基，替换甘油的羟基，使之达到平衡，如此可消除甘油可交换氢的影响。醇试剂与食用油脂的用量比可以为10ml：0.1
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0.5g。
[0022]本专利技术实施例中，步骤a2)中，烘干是为了除去样品中的水分，包括脂肪水解过程中产生的水和盐酸溶液中的水，防止进色谱柱时，色谱柱不好分离水和甘油。优选的，使用恒温干燥箱进行烘干处理。
[0023]本专利技术一实施例中，步骤a3)中，采用无水丙酮溶解，可排除甘油初样品中水分和碱性试剂等的影响。
[0024]需要注意，本专利技术实施例步骤c)中，甘油工作标准物质按照步骤a2)和步骤a3)，采用完全相同的试剂，进行前处理后，再测定甘油工作标准物质整个分子的稳定氢同位素比值，以保证溶液体系中的稳定氢同位素比值稳定且固定不变。
[0025]本专利技术一实施例中，步骤d)中，具体地，通过对比甘油工作标准物质的稳定氢同位素比值和已知的甘油工作标准物质不可交换氢位点稳定同位素比值之间的偏差，相应去掉甘油初样品的稳定氢同位素比值测定结果与待测食用油脂中甘油不可交换氢位点稳定同位素比值的相同偏差，计算得出待测食用油脂中甘油不可交换氢位点稳定同位素比值。
[0026]本专利技术具有以下优势：
[0027]本专利技术提供了一种测定食用油脂中甘油不可交换氢位点稳定同位素比值的方法，通过水解食用油脂，排除溶液体系中含氢组分对甘油的不可控干扰，利用稳定同位素比值质谱仪测定样品和甘油工作标准中的稳定氢同位素比值，最后计算得出食用油脂中甘油不可交换氢位点稳定同位素比值。该方法快速、准确，为油脂的掺假检测分析和真实性控制提供了一种新的分析方法。
具体实施方式
[0028]需要说明的是，在不冲突的情况下，本专利技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0029]实施例1：食用油脂(橄榄油、大豆油、花生油)中甘油稳定氢同位素比值测定
[0030]a)配制KOH
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甲醇溶液：称取23.2g氢氧化钾固体溶于200ml甲醇中。
[0031]b)分别称取0.4g食用油脂(橄榄油、大豆油、花生油本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定食用油脂中甘油的不可交换氢位点稳定同位素比值的方法，包括如下步骤：a)甘油初样品的制备a1)向食用油脂中添加反应助剂，水解反应，离心，取下层溶液，添加盐酸溶液调节pH至5～6；a2)向步骤a1)所得溶液中添加醇试剂溶解后烘干，重复添加醇试剂溶解后烘干至少一次，得甘油固形物；a3)采用无水丙酮溶解步骤a2)所得甘油固形物，得甘油初样品；b)采用气相色谱
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裂解
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稳定同位素比值质谱仪，测定上述甘油初样品中甘油的稳定氢同位素比值；c)选择不可交换氢位点稳定同位素比值已知的甘油作为工作标准物质，按步骤a2)
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a3)进行处理，按步骤b)进行测定，得甘油工作标准物质的稳定氢同位素比值；d)通过对...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟其顶，王道兵，岳红卫，
申请(专利权)人：中轻食品检验认证有限公司，
类型：发明
国别省市：