终末耗竭T细胞群“TCF19+PD1+TIM3+CD8+”的鉴定及应用制造技术

本发明专利技术属于肿瘤免疫治疗技术领域，具体涉及终末耗竭T细胞群“TCF19

【技术实现步骤摘要】
终末耗竭T细胞群“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
+”的鉴定及应用


[0001]本专利技术属于肿瘤免疫治疗
，具体涉及终末耗竭T细胞群“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
+”的鉴定及应用。

技术介绍

[0002]在慢性感染及癌症中，T细胞一直暴露于炎症环境及抗体中，长期处于激活状态，最终诱发T细胞耗竭。耗竭T细胞有以下几大特征：逐渐丢失细胞杀伤功能；多种抑制性受体的共同持续性表达上调，如PD
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1、CTLA4、TIM3、LAG3及TIGIT等；关键转录因子的表达发生改变；代谢紊乱并且无法形成非抗原依赖性记忆T细胞。随着研究的深入，人们发现耗竭T细胞并不是单一的一群细胞，而是存在异质性。耗竭T细胞的形成需经过四个发育阶段，前期耗竭T细胞过表达TCF1转录因子，细胞驻留于组织内并处于静息状态，随后进入第二阶段，细胞具有增殖能力并进入血液循环。因此，TCF1阳性耗竭T细胞也被称为“干性”初期耗竭T细胞。中期耗竭细胞逐渐失去TCF1的表达，但此时耗竭T细胞重新获得一些细胞毒性效应功能，尤其对免疫检查点抑制剂疗法敏感。最终细胞进入耗竭末期，高表达各种免疫检查点受体，形成终末耗竭T细胞，并且此时的T细胞对于免疫检查点阻断疗法不再产生应答。在早期耗竭T细胞的发展过程中，TCF1介导Tbet与Tox及Eomes转录因子之间的转换，通过上调Eomes及c
‑<br/>Myb的表达，从而调控Bcl
‑
2及细胞的存活。
[0003]目前针对耗竭T细胞的免疫检查点抑制剂疗法已在包括胃癌、肠癌、黑色素瘤、卵巢癌等癌症治疗中大放异彩，成为一线标准治疗方案。虽然PD
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1/PD
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L/CTLA4免疫检查点疗法应用广泛，但只有小部分患者表现出较好的反应性，大部分患者对于免疫治疗不敏感。因此，鉴于耗竭T细胞的异质性，深入研究耗竭T细胞的发生发展机制，抑制耗竭T细胞的形成具有重要的临床治疗意义。
[0004]另外，现有针对耗竭T细胞的研究主要集中于前期耗竭T细胞群，即TCF1
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PD1
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TIM3
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CD8
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T细胞，研究表明这群细胞能够对免疫治疗PD1响应，逆转耗竭T细胞，重新激活CD8
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T细胞对肿瘤的杀伤功能。而针对终末耗竭T细胞的研究较少。

技术实现思路

[0005]为了克服上述现有技术的不足，本专利技术通过对终末耗竭T细胞的异质性进行研究，发现“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
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T细胞”属于低分化高增殖T细胞群，这群细胞的存在使得患者对于免疫治疗不敏感，对提高肿瘤患者的免疫治疗敏感性提供了新的思路。
[0006]为实现上述目的，本专利技术是通过以下技术方案来实现的：
[0007]本专利技术提供了抑制终末耗竭T细胞群“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
+”的试剂在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用。
[0008]为探究免疫治疗疗效的差异，本专利技术选择深入分析对其无应答的终末耗竭T细胞群的。基于单细胞测序技术，对肿瘤内部的细胞组分进行深层次解析，筛选出高表达PD
‑
1、CTLA4、TIM3、TIGIT、LAG3的终末耗竭T细胞，并利用CytoTRACE及CCAT算法计算分化度，发现
了一群低分化度的细胞群。通过对这群细胞进行进一步分析，发现其表达上调的基因主要富集在cell cycle及DNA replication的通路中，与细胞增殖显著相关，并且高表达TCF19转录因子，因此，本专利技术在终末耗竭T细胞中筛选出一群低分化高增殖T细胞群，定义为“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
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T细胞”，后期通过结合PD1治疗临床信息，发现这群细胞与PD1治疗敏感度低相关。因此，“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
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T细胞”的存在，可能是患者对免疫治疗不敏感的根本原因，有望用于提高肿瘤患者对免疫治疗的敏感性，提高免疫治疗的效果。
[0009]优选地，所述肿瘤包括但不限于结直肠癌、黑色素瘤。淋巴瘤、肺癌，肝癌、前列腺癌、胃癌、食管癌、胆管癌、胆囊癌等也适用于本专利技术。
[0010]优选地，所述药物还包括药学上可接受的载体。
[0011]更优选地，所述载体是药物领域中可接受的功能性药用辅料，包括表面活性剂、助悬剂、乳化剂以及一些新型药用高分子材料，如环糊精、壳聚糖、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸聚乳酸共聚物(PLGA)、透明质酸等。还可以包括稀释剂、黏合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稳定剂等赋形剂。
[0012]优选地，所述药物的剂型包括片剂、囊剂、粒剂、滴丸剂、液剂和注射剂。药物制剂可以是经口服或胃肠外方式(例如静脉、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可将其制备成肠衣片剂。
[0013]本专利技术还提供了一种肿瘤免疫治疗药物，所述药物包括抑制终末耗竭T细胞群“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
+”的试剂。
[0014]本专利技术还提供了一种肿瘤免疫治疗药物，所述药物包括抑制终末耗竭T细胞群“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
+”的试剂和常见的免疫检查点抑制剂。
[0015]优选地，所述免疫检查点抑制剂为PD
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1/PD
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L/CTLA4免疫检查点抑制剂。
[0016]更优选地，所述PD
‑
L1抑制剂包括atezolizumab、durvalumab、avelumab，所述PD
‑
1抑制剂包括nivolumab、pembrolizumab、Tislelizumab，所述CTLA4抑制剂包括Ipilimumab、Tremelimumab。
[0017]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0018]为探究终末耗竭T细胞的异质性及其与肿瘤免疫治疗的相关性，本专利技术基于对终末耗竭T细胞群的单细胞测序数据进行分析，发现肿瘤组织内部，存在一群低分化高增殖终末耗竭T细胞群(“TCF19
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PD1
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TIM3
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CD8
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T细胞”)，这群细胞的存在，导致患者对于免疫治疗不敏感。提示针对这群细胞的形成机制进行研究，有望进一步扩展免疫治疗敏感人群，提升治疗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抑制终末耗竭T细胞群“TCF19
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PD1
+
TIM3
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CD8
+”的试剂在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括结直肠癌、黑色素瘤。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的载体。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、囊剂、粒剂、滴丸剂、液剂和注射剂。5.一种肿瘤免疫治疗药物，其特征在于，所述药物包括抑制终末耗竭T细胞群“TCF19
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PD1
+
TIM3
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CD8
+”的试剂。6.一种肿瘤免疫治疗药物，其特征在于，所述药物包括抑制终末耗竭T细胞群...

【专利技术属性】
技术研发人员：张常华，王付卉，董楠，朱澂明，霍明宇，
申请(专利权)人：中山大学附属第七医院深圳，
类型：发明
国别省市：