一种PLGA@M2纳米药物及其在制备治疗或清除血液炎症药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种PLGA@M2纳米药物及其在制备治疗或清除血液炎症药物中的应用。本发明专利技术通过在RAW细胞膜上过表达IL1R,IL6R和TNFR膜蛋白，并用IL

【技术实现步骤摘要】
一种PLGA@M2纳米药物及其在制备治疗或清除血液炎症药物中的应用


[0001]本专利技术属于医药领域，具体涉及一种PLGA@M2纳米药物及其在制备治疗或清除血液炎症药物中的应用。

技术介绍

[0002]炎症被认为是慢性肾脏病(Chronic kidney disease，CKD)常见的共病，尤其是在慢性透析患者中，几种循环标记物通常被评估为全身性炎症的指标。IL
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1β是急性和慢性炎症的促炎介质，可诱导数百种继发炎症介质的合成。IL
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6是一种促炎细胞因子，通过激活和增殖淋巴细胞、B细胞分化、白细胞募集和诱导急性期反应蛋白来促进炎症。TNF
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α是一种主要由单核和巨噬细胞产生的可溶性受体，位于IL
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6的下游，是易损性斑块和心血管事件风险的特异性标志物，并在动脉粥样硬化发生中发挥直接作用。
[0003]巨噬细胞是一种异质性极强的可塑性细胞，不仅在生理条件中发挥重要作用，而且在炎症过程中发挥重要作用(包括炎症的起始和消退)。巨噬细胞有两种不同表型:一种称为经典促炎巨噬细胞(M1)，另一种称为抗炎巨噬细胞(M2)。极化的M2具有重要的治疗价值，尤其是在抗炎中发挥着重要作用。
[0004]PLGA(聚乳酸
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羟基乙酸共聚物)是一种可降解的功能高分子有机化合物，具有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜性能，被视为优良的医用材料，受到广泛研究，包括药物递送、抗体制备、一瞄佐剂等。目前，FDA已经批准了多种基于PLGA微球的药物制剂进入临床，如LupronDeport等。2009年，中国SFDA也批准了2种可注射性的微球药物制剂上市。
[0005]如何研制出一种安全、可用于静脉注射的纳米药物来治疗缺血性低血压或心血管手术引起的肾脏损伤恢复不良造成的炎症性疾病，精准靶向吸附血液中常见的IL
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1β、IL
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6和TNF
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α等炎症因子，一直是医药科研工作者苦思冥想的领域。
[0006]而且，在目前血液透析治疗方法中，除了干预透析患者炎症产生外，如何在血液透析过程中，迅速降低、清除透析患者血液中的炎症，是一个新的治疗策略。

技术实现思路

[0007]有鉴于此，为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种PLGA@M2纳米药物及其在制备治疗或清除血液炎症药物中的应用。
[0008]本专利技术提供的一种PLGA@M2纳米药物，所述PLGA@M2纳米药物由M2巨噬细胞膜包裹PLGA颗粒形成，所述M2巨噬细胞膜上过表达IL1R,IL6R和TNFR炎症受体膜蛋白。
[0009]本专利技术还提供上述PLGA@M2纳米药物的制备方法，所述方法包括步骤：
[0010]1)在RAW细胞中上过表达IL1R,IL6R和TNFR；
[0011]2)IL
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4和IL
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13诱导所述过表达IL1R,IL6R和TNFR RAW的细胞极化为M2；
[0012]3)收集所述极化为M2的RAW细胞，冷冻后解冻，离心，提取细胞膜；
[0013]4)将所述提取的细胞膜与PLGA混合，获得所述的M2巨噬细胞膜包裹PLGA颗粒的
PLGA@M2纳米药物。
[0014]进一步，所述步骤3)所述极化为M2的RAW细胞
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80℃冷冻10
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30min后解冻，4℃5000
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14000rmp 10min重复5次，弃上清，加入0.1
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1ml PBS，超声打碎细胞膜，得到含有细胞膜的溶液，测定所述含有细胞膜溶液的蛋白浓度。
[0015]进一步，所述步骤4)所述细胞膜与PLGA的质量摩尔比为0.1
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1ug/ml：0.5
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5mol/ml。
[0016]本专利技术还提供上述PLGA@M2纳米药物在制备治疗血液炎症中的应用。
[0017]进一步，所述血液炎症为慢性肾脏病CKD病人的血液炎症。
[0018]本专利技术还提供上述PLGA@M2纳米药物在制备清除透析患者血液炎症药物中的应用。
[0019]本专利技术还提供一种药物制剂，所述药物制剂包括上述PLGA@M2纳米药物和一种或多种药学上可接受的药物载体。
[0020]本专利技术还提供一种清除透析患者血液炎症的吸附柱，所述吸附柱加载了上述的PLGA@M2纳米药物。
[0021]进一步，所述吸附柱包含纤维素膜和电转到纤维素膜上的PLGA@M2纳米药物。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0023]1.本专利技术提供一种PLGA@M2纳米药物由M2巨噬细胞膜包裹PLGA颗粒形成，所述M2巨噬细胞膜上过表达IL
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1R、IL
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6R和Tnfr1炎症受体膜蛋白。
[0024]2.本专利技术通过在RAW细胞膜上过表达IL
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1Ra,IL
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6R和TNFR膜蛋白，并用IL
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4和IL
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13诱导RAW极化为M2，然后用这种极化为M2并过表达炎症受体的巨噬细胞膜包裹PLGA成功合成了PLGA@M2纳米药物，PLGA@M2纳米药物可精准靶向吸附血液中常见的三种炎症因子。PLGA@M2纳米药物与一种或多种药学上可接受的药物载体制成的药物，可通过体内注射、口服等治疗患者血液炎症。其生物相容性性好、毒性小、疗效显著。
[0025]3.本专利技术的PLGA@M2纳米药物加载于吸附柱中，研制出的高效靶向清除血液炎症的吸附柱，可清除透析患者血液中的炎症，为透析患者全身性炎症提供可行性防治措施。
附图说明
[0026]为了使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术作优选的详细描述，其中：
[0027]图1为PLGA@M2纳米药物合成示意图；
[0028]其中，A为需要在细胞膜上过表达的IL1R,IL6R和TNFR，B为RAW细胞示意图，C为在RAW细胞膜上过表达的IL1R,IL6R和TNFR示意图，D为RAW细胞膜上过表达的IL1R,IL6R和TNFR后使用IL4和IL13诱导成M2型的示意图，E为过表达的IL1R,IL6R和TNFR后M2型细胞膜示意图，F为PLGA，G为使用表达的IL1R,IL6R和TNFR后M2型细胞膜包裹PLGA制作的PLGA@M2纳米药物；
[0029]图2为IL1R,IL6R和TNFR在RAW细胞中过表达的结果图；
[0030]A为IL1R在RAW细胞中过表达的免疫荧光结果照片，B为IL6R在RAW细胞中过表达的免疫荧光结果照片，C为TNFR在RAW细胞中过表达的免疫荧光结果照片，D为IL1R,IL6R和TNFR在RAW细胞中过表达后的mRNA的含量，E为IL1R,IL6R和TNFR在RAW细胞中过表达后的蛋
白免疫印迹和定量分析结果图本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PLGA@M2纳米药物，其特征在于，所述PLGA@M2纳米药物由M2巨噬细胞膜包裹PLGA颗粒形成，所述M2巨噬细胞膜上过表达IL1R,IL6R和TNFR炎症受体膜蛋白。2.根据权利要求1所述的PLGA@M2纳米药物的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：1)在RAW细胞中上过表达IL1R,IL6R和TNFR；2)IL
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4和IL
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13诱导所述过表达IL1R,IL6R和TNFR的RAW细胞极化为M2；3)收集所述极化为M2的RAW细胞，冷冻后解冻，离心，提取细胞膜；4)将所述提取的细胞膜与PLGA混合，获得所述的M2巨噬细胞膜包裹PLGA颗粒的PLGA@M2纳米药物。3.根据权利要求2所述的PLGA@M2纳米药物的制备方法，其特征在于，所述步骤3)所述极化为M2的RAW细胞
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80℃冷冻10
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30min后解冻，4℃5000
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14000rmp 10min重复5次，弃上清，加入0.1
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【专利技术属性】
技术研发人员：王少博，赵景宏，熊加川，黄英辉，王成，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：