一种B7H3/PDL1双特异性抗体及其药物组合物及应用制造技术

本发明专利技术涉及一种B7H3/PDL1双特异性抗体及其药物组合物及应用。所述双特异性抗体可靶向结合B7H3以及PDL1，其包括：单克隆抗体单元，其针对PDL1并且包括2条重链和2条轻链；纳米抗体单元，其针对B7H3并且包括2个相同的纳米抗体，其中，所述2个纳米抗体的C端分别通过连接肽与所述单克隆抗体单元的2条重链的Fc片段的C端连接。本发明专利技术的双特异性抗体可以同时结合B7H3和PDL1，可在靶向肿瘤细胞的同时解除PDL1对T细胞的抑制，表现出优于单克隆抗体联合用药的抗肿瘤活性。抗肿瘤活性。抗肿瘤活性。

【技术实现步骤摘要】
一种B7H3/PDL1双特异性抗体及其药物组合物及应用


[0001]本专利技术属于生物制药领域，具体涉及一种B7H3/PDL1双特异性抗体及其药物组合物及应用。

技术介绍

[0002]B7
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CD28家族作为T淋巴细胞活化的共刺激信号，在T淋巴细胞参与的免疫反应中起着至关重要的作用。研究表明，不同的B7分子类型对免疫细胞反应有正向或负向调节。B7H3(也称为CD276)是B7家族的成员，主要表达在肿瘤细胞表面，Chapoval AI等人首次发现它对CD4
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和CD8
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T细胞具有共刺激作用，B7H3信号传导诱导细胞免疫并在T细胞受体信号传导下选择性增强干扰素
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γ(IFN
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γ)的产生。然而，随着对B7H3的研究不断深入，B7H3的抑制功能逐渐被发现，例如，它可以抑制CD4
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T和CD8
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T细胞的增殖。此外，研究表明B7H3的异常表达与多种癌症的发生、发展和转移有关，有大量证据表明，其高表达与各种恶性肿瘤的不良预后相关。
[0003]B7H3在所有测试的癌症类型中均高度表达，且异质性有限，在正常组织中很少表达。这表明B7H3可以被认为是一种肿瘤抗原(TA)，为针对B7H3高表达肿瘤细胞的靶向治疗提供了可能。目前，B7H3靶向治疗策略主要包括阻断性单克隆抗体、放射免疫疗法、抗体
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药物偶联物(ADCs)、介导细胞毒性的单克隆抗体和双特异性抗体(BsAbs)等。由MacroGenics开发的靶向B7H3的人源化单克隆抗体Enoblituzumab(MGA271)基于抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)，作用于多种恶性肿瘤，如黑色素瘤、骨肉瘤和尤文氏肉瘤等。Enoblituzumab在多种异种移植肿瘤模型中被证明具有强的抗肿瘤活性，并且在灵长类动物的安全性评价中没有明显的毒性。Enoblituzumab目前处于II期临床研究阶段，并显示出良好的治疗潜力。
[0004]靶向免疫检查点PD1/PDL1的抑制剂无疑是肿瘤免疫治疗的焦点。PDL1表达于肿瘤细胞表面，具有细胞毒性的PDL1抑制性抗体理论上具有更好的抗肿瘤作用。然而据报道上市的PDL1单克隆抗体中只有Avelumab可介导针对肿瘤的ADCC效应，并显示出与其他PDL1抗体相当的安全性。一个重要原因是ADCC的作用主要取决于抗原表达的丰度，而PDL1不能被视为典型的肿瘤抗原，而且它在肿瘤细胞中具有很大的异质性。
[0005]PD1/PDL1通路阻断抗体常与细胞毒抗体联合应用，以增强免疫治疗的效果。Enoblituzumab和Pembrolizumab(一种靶向PD1的单克隆抗体)联合使用，一方面，可以阻断PD1/PDL1通路的免疫抑制，另一方面，可通过Enoblituzumab发挥肿瘤杀伤作用。该联合疗法已进入临床II期(NCT04129320)。数据显示，联合治疗的不良反应发生率与单药治疗相似，且联合治疗的客观缓解率(ORR)优于PD1单克隆抗体治疗。这证明了同时阻断B7H3通路和PD1/PDL1通路的可行性。
[0006]双特异性抗体(BsAb)是可以同时靶向两个不同抗原表位的基因工程抗体。针对B7H3的双特异性抗体已经被开发出来，其中大部分依赖于T细胞重定向策略，例如CD3/B7H3双特异性抗体。然而，理论上基于细胞毒性的双特异性抗体可能更好地作用于B7H3高表达
肿瘤细胞，因为B7H3可作为肿瘤抗原具有丰度高、异质性低的表达特点。目前，仅有5款双特异性抗体药物曾获批上市，而限制其应用的主要原因是稳定性和活性问题。因此，获得具有稳定性好以及优异生物活性的双特异性抗体仍是业界努力的方向。

技术实现思路

[0007]本专利技术的一个技术目的是提供一种B7H3/PDL1双特异性抗体制备方法及应用。
[0008]一方面，本专利技术提供一种B7H3/PDL1双特异性抗体，其靶向结合B7H3以及PDL1，所述双特异性抗体包括：
[0009]单克隆抗体单元，其针对PDL1并且包括2条重链和2条轻链；
[0010]纳米抗体单元，其针对B7H3并且包括2个相同的纳米抗体(VHH)，
[0011]其中，所述2个纳米抗体C端分别通过连接肽与所述单克隆抗体单元的2条重链的Fc片段的C端连接。
[0012]本专利技术中，所述连接肽是指一段包含甘氨酸和丝氨酸并且具有一定弹性及蛋白酶抗性的多肽。
[0013]在一个实施方式中，所述连接肽的氨基酸序列为SEQ ID No.:11。
[0014]在一个实施方式中，所述单克隆抗体单元的轻链可变区包括氨基酸序列为SEQ ID NO.：1的CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO.：2的CDR2以及氨基酸序列为SEQ ID NO.：3的CDR3，所述单克隆抗体单元的重链可变区包括氨基酸序列为SEQ ID NO.：5的CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO.：6的CDR2以及氨基酸序列为SEQ ID NO.：7的CDR3，以及所述纳米抗体包括氨基酸序列为SEQ ID NO.：12的CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO.：13的CDR2以及氨基酸序列为SEQ ID NO.：14的CDR3。
[0015]在一个实施方式中，所述单克隆抗体单元的轻链可变区包括如SEQ ID NO.：4的氨基酸序列，所述单克隆抗体单元的重链可变区包括如SEQ ID NO.：8的氨基酸序列。
[0016]在一个实施方式中，所述单克隆抗体单元的轻链包括如SEQ ID NO.：9的氨基酸序列，所述单克隆抗体单元的重链包括如SEQ ID NO.：10的氨基酸序列。
[0017]在一个实施方式中，所述纳米抗体包括如SEQ ID NO.：15的氨基酸序列。
[0018]在一个实施方式中，所述单克隆抗体单元的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.：4所示，所述单克隆抗体单元的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.：8所示。
[0019]在一个实施方式中，所述单克隆抗体单元的轻链全长氨基酸序列如SEQ ID NO.：9所示，所述单克隆抗体单元的重链全长氨基酸序列如SEQ ID NO.：10所示。
[0020]在一个实施方式中，所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.：15所示。
[0021]在一个实施方式中，所述双特异性抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO.：16所示，轻链氨基酸序列如SEQ ID NO.：17所示。
[0022]另一方面，本专利技术还提供了一种编码所述B7H3/PDL1双特异性抗体的多核苷酸。
[0023]再一方面，本专利技术还提供了一种表达载体，其包含编码所述B7H3/PDL1双特异性抗体的多核苷酸。
[0024]另一方面，本专利技术提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的上述B7H3/PDL1双特异性抗体，以及药学上可接受的载体。
[0025]另一方面，本专利技术提供一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种B7H3/PDL1双特异性抗体，其靶向结合B7H3以及PDL1，所述双特异性抗体包括：单克隆抗体单元，其针对PDL1并且包括2条重链和2条轻链；纳米抗体单元，其针对B7H3并且包括2个相同的纳米抗体，其中，所述2个纳米抗体的C端分别通过连接肽与所述单克隆抗体单元的2条重链的Fc片段的C端连接。2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中，所述连接肽为一段包含甘氨酸和丝氨酸并且具有一定弹性及蛋白酶抗性的多肽，优选地，所述连接肽的氨基酸序列为SEQ ID No.:11。3.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中，所述单克隆抗体单元的轻链可变区包括氨基酸序列为SEQ ID NO.：1的CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO.：2的CDR2以及氨基酸序列为SEQ ID NO.：3的CDR3，所述单克隆抗体单元的重链可变区包括氨基酸序列为SEQ ID NO.：5的CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO.：6的CDR2以及氨基酸序列为SEQ ID NO.：7的CDR3，以及所述纳米抗体包括氨基酸序列为SEQ ID NO.：12的CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO.：13的CDR2以及氨基酸序列为SEQ ID NO.：14的CDR3；优选地，所述单克隆抗体单元的轻链可变区包括如SEQ ID NO.：4的氨基酸序列，所述单克隆抗体单元的重链可变区包括如SEQ ID NO.：8的氨基酸序列；以及所述纳米抗体包括如SEQ ID NO.：15的氨基酸序列；进一步，优选地，所述单克隆抗体单元的轻链包括如SEQ ID NO.：9的氨基酸序列，所述单克隆抗体单元的重链包括如SEQ ID NO.：10的氨基酸序列，以及所述纳米抗体包括如SEQ ID NO.：15的氨基酸序列；更优选地，所述单克隆抗体单元的轻链全长氨基酸序列如SEQ ID NO.：9所示，所述单克隆抗体单元的重链全长氨基酸序列如SEQ ID NO....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈艺丽，王春河，李欢欢，刘国键，谭杰，唐磊，
申请(专利权)人：上海迈石生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：