非放射性物质标记的药剂的药代动力学的测定方法技术

本发明专利技术提供药剂的标记方法，其包括：(i)使非放射性物质螯合到具有反应基的螯合剂的工序，以及(ii)使在工序(i)中螯合了非放射性物质的螯合剂经由所述反应基与药剂结合的工序，所述方法为用于在药代动力学的评价中使用的方法；本发明专利技术还提供其他方面。本发明专利技术还提供其他方面。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】非放射性物质标记的药剂的药代动力学的测定方法


[0001]本专利技术涉及用非放射性物质标记药剂的方法、测定用非放射性物质标记的药剂的药代动力学的方法、筛选具有所需药代动力学的药剂的方法等。

技术介绍

[0002]以往，在医药品候选物质(例如以抗体为代表的高分子量的蛋白质制剂等)的开发过程中，作为评价候选物质的器官分布或血中浓度推移等药代动力学的常规方法，已知将用放射性同位素(RI)标记的医药品候选物质向小鼠或猿猴等实验用动物施用，测定一定期间后采集的组织或血液中的放射能，由此评价该药品候选物质的药代动力学的方法(非专利文献1)。
[0003]该方法的优点在于，为了直接测定来自RI的放射能，能够进行医药品候选物质的绝对定量，并且几乎不受组织或血液中含有的基质(即，测定对象物以外的物质)的影响。在常规定量法中，需要进行通过有机溶剂或柱等将测定对象物从基质中分离并回收的操作。此时，由于不能充分回收对象物等问题，有时分析变得困难。在利用RI的方法中，几乎不需要考虑这样的问题。
[0004]另一方面，使用RI的实验的实施从放射线辐射的观点出发，另外从封入放射性物质的必要性出发，仅限于得到特别许可的专用设施。因此，使用RI的实验只有具有关于RI使用的特别知识的人使用设置在RI设施内的机器或动物饲养设施才能进行。另外，使用RI的实验伴随着各种各样的缺点，即为了防止放射线辐射必须采取特殊的防护措施进行实验的作业上的繁琐、防止被放射性物质污染的措施的必要性、被放射性物质污染的废弃物的处理问题等。
[0005]进一步地，各核素的使用量仅限于得到监管机构许可的范围内。在医药品开发的初期阶段需要评价多个候选物质，但是由于这样的使用量的限制，不能使用RI评价所有候选物质。为了使用RI进行药代动力学评价，需要预先检索候选物质。
[0006]为了避免如上所述使用RI的实验的缺点，使用了不使用RI而评价药代动力学的方法。作为这样的方法，例如已知荧光(fluorescent)标记的候选物质的方法。
[0007]另外，作为不标记候选物质而进行评价的方法，已知使用LC
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MS或免疫测定(immunoassay)的方法。血液中的候选物质的浓度通常通过免疫测定进行测定。在免疫测定中，通常使用酶标记抗体、荧光标记抗体等，测定化学发光或荧光，定量候选物质在血液中的浓度。另外，还报道了利用用铕、钐、铽、镝等金属或金胶体标记的抗体的免疫测定方法(专利文献1及2、非专利文献2及3)。在该方法中，金属的检测中使用ICP
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MS(电感耦合等离子体质谱法，inductively coupled plasma
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mass spectrometry)，检测灵敏度高，因此在临床检查中也被采用。
[0008]ICP
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MS是能够对以金属元素为中心的许多无机元素进行超微量分析(ppt水平)的技术。该技术具有能够同时分析多元素、能够进行同位素比的测定、而且能够高精度且迅速地实行分析的许多特长，在半导体等材料产业、地质学或环境等领域中被广泛应用(专利文
献3)。ICP
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MS也被用作医药品中元素杂质的个别定量法。另外，还报道了向生物体施用金属胶体，用ICP
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MS高灵敏度地评价金属的体内动态的例子。
[0009]现有技术文献
[0010]专利文献
[0011]专利文献1：US2004/0072250A1
[0012]专利文献2：US7767407B2
[0013]专利文献3：日本特许第4585069号
[0014]非专利文献
[0015]非专利文献1：Glassman et a1.，The Journal of Clinical Pharmacology Vol 55No.53(2015)，529
‑
538
[0016]非专利文献2：J.Anal.At.Spectrom.，2001，16，1393
‑
1396
[0017]非专利文献3：Mass Spec Rev 29：326
‑
348，2010

技术实现思路

[0018]专利技术要解决的课题
[0019]如上所述，使用RI的药代动力学的评价方法存在各种各样的缺点。特别是，在医药品开发的初期阶段进行基于药代动力学的筛选由于存在RI的使用量的限制，所以是困难的。因此，对于不使用RI而评价药代动力学的方法有很大的需求。然而，以往已知的方法并不能代替使用RI的方法。例如，在利用荧光标记的情况下，由于受到组织或血液中含有的基质的影响，因此需要从生物试样提取测定对象物的操作。提取效率不能达到100％，测定对象物的一部分丢失，难以进行与使用RI的方法相同程度的正确分析。
[0020]另一方面，如果用非放射性物质标记测定对象物，通过ICP
‑
MS等对非放射性物质进行定量，由此能够评价测定对象物的药代动力学，则不需要进行上述的提取操作。然而，迄今为止还没有存在用非放射性物质标记测定对象物，将其向动物施用，追踪非放射性物质的动态，由此评价测定对象物的药代动力学的例子。作为其理由，可举出难以去除未掺入测定对象物中的非放射性物质等，难以制备适合药代动力学评价的标记物。
[0021]本专利技术的目的在于提供1)用非放射性物质标记成为抗体等医药品候选物质的药剂的方法、2)测定采用该方法用非放射性物质标记的药剂的药代动力学的方法、3)筛选具有所需药代动力学的药剂的方法等。
[0022]用于解决课题的手段
[0023]本专利技术人等进行了深入研究，结果发现了能够以适合药代动力学评价的形式用非放射性物质标记药剂的新方法。以往，在用RI标记药剂的情况下，使螯合剂与药剂结合后使RI螯合。本专利技术人等发现了在将该标记方法应用于非放射性物质的情况下，即使基于生物体中的非放射性物质的含量评价药剂的药代动力学，也不能得到正确的结果。与此相对，出乎意料地，在使非放射性物质螯合到螯合剂后将该螯合剂与药剂结合的情况下，能够正确地评价药剂的药代动力学。本专利技术人等基于这些见解，通过进一步研究，完成了本专利技术。
[0024]即，本专利技术提供以下的专利技术。
[0025][1]一种药剂的标记方法，包括：
[0026](i)使非放射性物质螯合到具有反应基的螯合剂的工序，以及
[0027](ii)使在工序(i)中螯合了非放射性物质的螯合剂经由所述反应基与药剂结合的工序，
[0028]其中，所述方法为用于在药代动力学的评价中使用的方法。
[0029][2]根据[1]所述的方法，其中，非放射性物质为金属。
[0030][3]根据[2]所述的方法，其中，非放射性物质为锂、铍、钠、镁、铝、钾、钙、钪、钛、钒、铬、锰、铁、钴、镍、铜、锌、镓、铷、锶、钇、锆、铌、钼、钌、铑、钯、银、镉、铟、锡、铯、钡、镧、铈、镨、钕、钐、铕、钆、铽、镝、钬、铒、铥、镱、镥本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种药剂的标记方法，包括：(i)使非放射性物质螯合到具有反应基的螯合剂的工序，以及(ii)使在工序(i)中螯合了非放射性物质的螯合剂经由所述反应基与药剂结合的工序，其中，所述方法为用于在药代动力学的评价中使用的方法。2.根据权利要求1所述的方法，其中，非放射性物质为金属。3.根据权利要求2所述的方法，其中，非放射性物质为锂、铍、钠、镁、铝、钾、钙、钪、钛、钒、铬、锰、铁、钴、镍、铜、锌、镓、铷、锶、钇、锆、铌、钼、钌、铑、钯、银、镉、铟、锡、铯、钡、镧、铈、镨、钕、钐、铕、钆、铽、镝、钬、铒、铥、镱、镥、铪、钽、钨、铼、锇、铱、铂、金、汞、铊、铅、铋或钍。4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，具有反应基的螯合剂为具有氨基或羧基作为配位基的螯合剂。5.根据权利要求4所述的方法，其中，具有反应基的螯合剂为在选自DOTA、EDTA、HEDTA、DHEDDA、1,3
‑
PDTA、DTPA、TTHA、NTA、葡糖酸、HIMDA、ASDA、NTMP、HEDP、3
‑
羟基
‑
2,2
’‑
亚氨基二琥珀酸四钠和卟啉中任一种化合物导入反应基的螯合剂。6.根据权利要求1～5中任一项所述的方法，其中，药剂为抗体、肽化合物、细胞或核酸。7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中，反应基为能够与氨基或硫醇基反应而形成化学键的基团。8.一种测定药剂的药代动力学的方法，包括：(i)通过权利要求1～7中任一项所述的方法，用非放射性物质标记药剂的工序，(ii)将在工序(i)中被标记的...

【专利技术属性】
技术研发人员：南部健，尾关和久，高野阳子，渡边美穗，
申请(专利权)人：中外制药株式会社，
类型：发明
国别省市：