可用于治疗庞贝病的组合物制造技术

本文提供了一种用于在患者中减少异常肌肉病理的进展和/或逆转异常肌肉病理的方法，其中所述患者已经被诊断患有庞贝病或被怀疑患有庞贝病。所述方法包括向所述患者施用具有AAV衣壳和包装在其中的载体基因组的重组AAV(rAAV)，其中所述载体基因组包括：(a)5'反向末端重复序列(ITR)；(b)启动子；(c)编码嵌合融合蛋白的核苷酸序列，所述嵌合融合蛋白包括信号肽和与人酸性

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】可用于治疗庞贝病的组合物

技术介绍

[0001]庞贝病(Pompe disease)(也被称为II型糖原病)是一种由酸
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葡萄糖苷酶(GAA)基因的突变引起的溶酶体贮积病，导致心脏(心肌病)、肌肉和运动神经元(神经肌肉疾病)中的糖原累积。在典型的婴儿庞贝病中，严重的GAA活性丧失导致多系统和早发性糖原贮积，尤其是在心脏和肌肉内，并且在头几年期间因心肺衰竭而死亡。婴儿庞贝病的特征还在于神经元(特别是运动神经元)和神经胶质细胞内显著的糖原贮积。目前的护理标准酶替代疗法(ERT)对矫正肌肉的效率次优，并且不能穿过血脑屏障，导致典型婴儿庞贝病的长期存活者的进行性神经功能恶化。接受ERT的患者(其由于心脏矫正而活得更长)揭示了具有进行性神经表型的新自然病史。此外，重组人类GAA是高度免疫原性的，并且由于骨骼肌摄取不良，必须以非常大的量给药。
[0002]对庞贝病的治疗存在几个未满足的需求，包含需要纠正该疾病的CNS组分，需要改善肌肉纠正，以及需要一种对当前ERT更有效、更低免疫原性和/或更方便的替代方案。

技术实现思路

[0003]在一个方面中，本文提供了一种用于在患者中减少异常肌肉病理的进展和/或逆转异常肌肉病理的方法，其中所述患者已经被诊断患有庞贝病或被怀疑患有庞贝病，所述方法包括向所述患者施用具有AAV衣壳和包装在其中的载体基因组的重组AAV(rAAV)，其中所述载体基因组包括：(a)5'反向末端重复序列(ITR)；(b)启动子；(c)编码嵌合融合蛋白的核苷酸序列，所述嵌合融合蛋白包括信号肽和与人酸性
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葡萄糖苷酶(hGAA)融合的vIGF2肽，其中编码嵌合融合蛋白的序列与指导其表达的调节序列可操作地连接，并且包括SEQ ID NO:7或与其至少95％相同的编码SEQ ID NO:6的氨基酸1至氨基酸982的序列；(d)polyA；和(e)3'ITR。在某些实施例中，所述启动子是组成型启动子，任选地，CAG启动子或CB7启动子。在某些实施例中，所述异常肌肉病理的特征在于以下中的一种或多种：i)具有中央核的肌肉细胞的百分比升高；ii)肌纤维萎缩，iii)肌细胞纤维中的红细胞大小不均(anisocytosis)，iv)自噬积聚，v)空泡化，和vi)无力。在某些实施例中，所述患者患有晚发性庞贝病。在某些实施例中，所述患者患有婴儿发病的庞贝病。在某些实施例中，所述载体基因组进一步包括至少四个、至少五个、至少六个、至少七个或至少八个miR靶序列，任选地，其中每个所述miR靶序列对miR
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183是特异性的。在某些实施例中，所述AAV衣壳是AAVhu68衣壳。在某些实施例中，所述rAAV通过静脉内和/或鞘内施用。在某些实施例中，所述rAAV经由双重施用途径被施用于患者，任选地，其中双重途径是静脉内施用和枕大池内(ICM)施用。
[0004]在一个方面中，本文提供了一种药物组合物，所述组合物包括具有AAV衣壳和包装在其中的载体基因组的重组AAV(rAAV)，其中所述载体基因组包括：(a)5'反向末端重复序列(ITR)；(b)启动子；(c)编码嵌合融合蛋白的核苷酸序列，所述嵌合融合蛋白包括信号肽和与人酸性
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葡萄糖苷酶(hGAA)融合的vIGF2肽，其中所述编码嵌合融合蛋白的序列与指导其表达的调节序列可操作地连接，并且包括SEQ ID NO:7，或与其至少95％相同的编码
SEQ ID NO:6的氨基酸1至氨基酸982的序列；(d)polyA；和(e)3'ITR。在某些实施例中，所述启动子是组成型启动子，任选地，CAG启动子或CB7启动子。在某些实施例中，所述载体基因组包括至少四个、至少五个、至少六个、至少七个或至少八个miR靶序列，任选地，其中每个所述miR靶序列对miR
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183是特异性的。在某些实施例中，所述AAV衣壳是AAVhu68衣壳。在某些实施例中，所述组合物被配制用于静脉内和/或鞘内递送。
[0005]在一个方面中，本文提供了一种用于治疗患有庞贝病的患者的药物组合物，其中所述治疗在患者中减少异常肌肉病理的进展和/或逆转异常肌肉病理。在某些实施例中，所述异常肌肉病理的特征在于以下中的一种或多种：i)具有中央核的肌肉细胞的百分比升高；ii)肌纤维萎缩，iii)肌细胞纤维中的红细胞大小不均，iv)自噬积聚，v)空泡化，和vi)无力。在某些实施例中，所述患者患有晚发性庞贝病(late
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onset Pompe disease)。在某些实施例中，所述患者患有婴儿发病的庞贝病。在某些实施例中，所述rAAV经由双重施用途径被施用于患者，任选地，其中双重途径是静脉内施用和枕大池内(ICM)施用。
[0006]在一个方面中，本文提供的药物组合物适合于施用于已经被诊断患有庞贝病的症状后患者。在某些实施例中，所述组合物适合于逆转患有庞贝病的症状后患者的异常肌肉病理。在某些实施例中，所述异常肌肉病理的特征在于以下中的一种或多种：i)具有中央核的肌肉细胞的百分比升高；ii)肌纤维萎缩，iii)肌细胞纤维中的红细胞大小不均，iv)自噬积聚，v)空泡化，和vi)无力。在某些实施例中，所述药物组合物适用于联合疗法，任选地，其特征在于所述患者进一步接受使用支气管扩张剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂、呼吸肌强度训练(RMST)、酶替代疗法和/或膈肌起搏疗法的治疗。
[0007]在一个方面，提供了药物组合物的用途，其包括施用本文所述的rAAV以治疗本文所提供的有需要的患者的庞贝病，其中所述治疗在患者中减少异常肌肉病理的进展和/或逆转患者的异常肌肉病理。
[0008]根据本专利技术的以下详细描述，本专利技术的其他方面和优点将变得显而易见。
附图说明
[0009]图1A和图1B示出了在CB6(第三列)、CAG(第四列)或UbC启动子(最后一列)的指导下，静脉内施用具有hGAAV780I的工程改造的编码序列的各种AAVhu68.hGAA四周后Pompe(
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)小鼠肝脏中的hGAA活性。(图1A)低剂量(1x10
11
GC)。(图1B)高剂量(1x10
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)。
[0010]图2A和图2B示出了在CB6(第三列)、CAG(第四列)或UbC启动子(最后一列)的指导下，静脉内施用具有hGAAV780I的工程改造的编码序列的各种AAVhu68.hGAA四周后Pompe(
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)小鼠心脏中的hGAA活性。(图2A)低剂量(1x10
11
GC)。(图2B)高剂量(1x10
12
)。
[0011]图3A和图3B示出了在CB6(第三列)、CAG(第四列)或UbC启动子(最后一列)的指导下，静脉内施用具有hGAAV780I的工程改造的编码序列的各种AAVhu68.hGAA四周后Pompe(
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于在患者中减少异常肌肉病理的进展和/或逆转异常肌肉病理的方法，其中所述患者已经被诊断患有庞贝病或被怀疑患有庞贝病，所述方法包括向所述患者施用具有AAV衣壳和包装在其中的载体基因组的重组AAV(rAAV)，其中所述载体基因组包括：(a)5'反向末端重复序列(ITR)；(b)启动子；(c)编码嵌合融合蛋白的核苷酸序列，所述嵌合融合蛋白包括信号肽和与人酸性
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葡萄糖苷酶(hGAA)融合的vIGF2肽，其中编码所述嵌合融合蛋白的所述序列与指导其表达的调节序列可操作地连接，并且包括SEQ ID NO:7或与其至少95％相同的编码SEQ ID NO:6的氨基酸1至氨基酸982的序列；(d)polyA；和(e)3'ITR。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述启动子是组成型启动子，任选地CAG启动子或CB7启动子。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述异常肌肉病理的特征在于以下中的一种或多种：i)具有中央核的肌肉细胞的百分比升高；ii)肌纤维萎缩，iii)肌细胞纤维中的红细胞大小不均，iv)自噬积聚，v)空泡化，和vi)无力。4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述患者患有晚发性庞贝病。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述患者患有婴儿发病的庞贝病。6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述载体基因组进一步包括至少四个、至少五个、至少六个、至少七个或至少八个miR靶序列，任选地，其中每个所述miR靶序列对miR
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183是特异性的。7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述AAV衣壳是AAVhu68衣壳。8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述rAAV通过静脉内和/或鞘内施用。9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述rAAV经由双重施用途径被施用于所述患者，任选地，其中所述双重途径是静脉内施用和枕大池内(ICM)施用。10.根据权利要求1所述的方法，其中，所述rAAV以约1x 10
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基因组拷贝(GC)/kg至约5x 10
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GC/kg的剂量被静脉内施用。11.根据权利要求1所述的方法，其中，所述rAAV以约1x 10
12
GC至约5x 10
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GC的剂量经由ICM施用。12.根据权利要求1所述的方法，其中，所述rAAV以约1x 10
11
GC/kg至约5x 10
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GC/kg的剂量被IV施用并且以约1x 10
12
GC至约5x 10
13
GC的剂量经由ICM施用。13.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括所述患者接受施用联合疗法，任选地，其中所述联合疗法是支气管扩张剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂、呼吸肌强度训练(RMST)、酶替代疗法和/或膈肌起搏疗法。14.一种药物组合物，所述药物组合物包括具有AAV衣壳和包装在其中的载体基因组的重组AA...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：阿米库斯治疗学公司，
类型：发明
国别省市：