新型脂质及其纳米颗粒组合物制造技术

本文提供的脂质具有式(I)及其药学上可接受的盐，其中R1、R2、a和b如本文所定义。本文还提供脂质纳米颗粒(LNP)组合物，其包含具有式(I)的脂质和无衣壳的非病毒载体(例如，ceDNA)。在本文任何方面或实施方式的一个方面中，这些LNP可用于将无衣壳的非病毒DNA载体递送至所关注的靶位点(例如，细胞、组织、器官等)。等)。等)。等)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型脂质及其纳米颗粒组合物
[0001]相关申请
[0002]本申请要求于2020年3月27日提交的美国临时申请第63/000,990号的优先权的权益，所述美国临时专利申请的内容通过引用并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请含有序列表，其已经以ASCII格式以电子形式提交并在此通过全文引用的方式并入。所述ASCII副本创建于2021年3月18日，被命名为131698_07720_SL.txt，大小为417字节。

技术介绍

[0005]基因治疗旨在改善因基因表达谱异常引起的基因病症或获得性疾病的患者的临床结果。迄今为止，已经开发出各种类型的基因治疗，它们将治疗性核酸作为治疗疾病的药物递送到患者的细胞中。
[0006]矫正基因在患者靶细胞中的递送和表达可以通过多种方法进行，这些方法包括使用工程化病毒基因递送载体，以及潜在质粒、小基因、寡核苷酸、小环或各种封闭端DNA。在许多可用的病毒衍生载体(例如，重组逆转录病毒、重组慢病毒、重组腺病毒等)中，重组腺相关病毒(rAAV)作为基因治疗中一种多功能且相对可靠的载体而获得认可。然而，特别是在重复给药方面，病毒载体(如腺相关载体)可以是高度免疫原性的，并引发体液和细胞介导的免疫，从而影响疗效。
[0007]非病毒基因递送规避了与病毒转导相关的某些缺点，特别是由于对形成载体颗粒的病毒结构蛋白的体液和细胞免疫应答以及任何从头病毒基因表达所致的缺点。在非病毒基因递送技术中，使用阳离子脂质作为载体。
[0008]可电离脂质大致由胺部分和脂质部分组成，阳离子胺部分和聚阴离子核酸的静电相互作用以形成带正电荷的脂质或脂质膜结构。因此，促进细胞摄取，并将核酸递送到细胞中。
[0009]一些广泛使用的可电离脂质是CLinDMA、DLinDMA(也称为DODAP)和阳离子脂质，例如DOTAP。值得注意的是，这些脂质已被用于将siRNA递送至肝脏，但在较高剂量下递送效率并非最佳并且产生肝毒性。鉴于目前阳离子脂质的缺点，该领域需要提供不仅能提高疗效和降低毒性，而且能改善药代动力学和细胞内动力学(如细胞摄取和脂质载体的核酸释放)的脂质支架。

技术实现思路

[0010]在一个方面，本文提供了具有式(I)的可电离脂质：
[0011][0012]及其药学上可接受的盐，其中R1、R2、a和b如本文所定义。
[0013]还提供了包含公开的可电离脂质或其药学上可接受的盐的药物组合物；和药学上可接受的载体。
[0014]本公开的另一方面涉及脂质纳米颗粒(LNP)的组合物，该脂质纳米颗粒(LNP)包含本文所述的可电离脂质或其药学上可接受的盐和核酸。在本文的任何方面或实施方式的一个实施方式中，核酸被包封在可电离脂质中。在具体实施方式中，所述核酸是封闭端DNA(ceDNA)。
[0015]根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述LNP进一步包括甾醇。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，甾醇可以是胆固醇或β
‑
谷甾醇。
[0016]根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述胆固醇以约20％至约40％，例如约20％至约35％、约20％至约30％、约20％至约25％、约25％至约35％、约25％至约30％或约30％至约35％的摩尔百分比存在，并且所述可电离脂质以约80％至约60％，例如约80％至约65％、约80％至约70％、约80％至约75％、约75％至约60％、约75％至约65％、约75％至约70％、约70％至约60％或约70％至约60％的摩尔百分比存在。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述胆固醇以约20％至约40％，例如约20％、约21％、约22％、约23％、约24％、约25％、约26％、约27％、约28％、约29％、约30％、约31％、约32％、约33％、约34％、约35％、约36％、约37％、约38％、约39％或约40％的摩尔百分比存在，并且其中所述可电离脂质以约80％至约60％，例如约80％、约79％、约78％、约77％、约76％、约75％、约74％、约73％、约72％、约71％、约70％、约69％、约68％、约67％、约66％、约65％、约64％、约63％、约62％、约61％或约60％的摩尔百分比存在。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述胆固醇以约40％的摩尔百分比存在，并且其中所述可电离脂质以约50％的摩尔百分比存在。
[0017]根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述组合物进一步包括胆固醇、PEG
‑
脂质缀合物和非阳离子脂质。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述PEG
‑
脂质缀合物以约1.5％至约3％，例如约1.5％至约2.75％、约1.5％至约2.5％、约1.5％至约2.25％、约1.5％至约2％、约2％至约3％、约2％至约2.75％、约2％至约2.5％、约2％至约2.25％、约2.25％至约3％、约2.25％至约2.75％或约2.25％至约2.5％存在。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述PEG
‑
脂质缀合物以1.5％、约1.6％、约1.7％、约1.8％、约1.9％、约2％、约2.1％、约2.2％、约2.3％、约2.4％、约2.5％、约2.6％、约2.7％、约2.8％、约2.9％或约3％存在。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述胆固醇以约30％至约50％、例如约30％至约45％、约30％至约40％、约30％至约35％、约35％至约50％、约35％至约45％、约35％至约40％、约20％至约40％、约40％至约50％或约45％至约50％的摩尔百分比存在。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述胆固醇以约30％、约31％、约32％、约33％、约34％、约35％、约36％、约37％、约
38％、约39％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约46％、约47％、约48％、约49％或约50％的摩尔百分比存在。
[0018]根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述LNP进一步包括聚乙二醇(PEG)脂质。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述PEG脂质是l
‑
(单甲氧基聚乙二醇)
‑
2,3
‑
二甲基甘油(PEG
‑
DMG)。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述LNP进一步包括非阳离子脂质。根据本文中任何方面或实施方式中的一些实施方式，所述非阳离子脂质选自由以下组成的组：二硬脂酰基
‑
sn
‑
甘油
‑
磷酸乙醇胺、二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二油酰基磷脂酰胆碱(DOPC)、二棕榈酰基磷脂酰胆碱(DPPC)、二油酰基磷脂酰甘油(DOPG)、二棕榈酰基磷脂酰甘油(DPPG)、二油酰基
‑
磷脂酰乙醇胺(DOPE)、棕榈酰基油酰基磷脂酰胆碱(PO本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种具有式(I)的脂质：或其药学上可接受的盐，其中：a为1至20范围内的整数；b为2至10范围内的整数；R1不存在或选自(C2‑
C
20
)烯基、
‑
C(O)O(C2‑
C
20
)烷基和被(C2‑
C
20
)烷基取代的环丙基；和R2是(C2‑
C
20
)烷基。2.根据权利要求1所述的脂质，其中所述脂质具有式(II)：或其药学上可接受的盐，其中c和d各自独立地为1至8范围内的整数。3.根据权利要求2所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中c和d各自独立地为2至8范围内的整数。4.根据权利要求2或3所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中c和d各自独立地为4至8范围内的整数。5.根据权利要求2至4中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中c和d各自独立地为6至8范围内的整数。6.根据权利要求2所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中c和d各自独立地为1、3、5或7。7.根据权利要求2至6中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中c和d中的至少一个为7。8.根据权利要求1至7中任一项所述的脂质，其中所述化合物具有式(III)：或其药学上可接受的盐。9.根据权利要求1至8中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中b为3至9范围内的整数。10.根据权利要求1至9中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中b为5至7范围内的整数。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中b为5或7。12.根据权利要求1至11中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为2至18范围内的整数。13.根据权利要求1至12中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为3至17范围内的整数。14.根据权利要求1至12中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为6至18范围内的整数。15.根据权利要求1至12中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为4至12范围内的整数。16.根据权利要求1至12中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为2至5范围内的整数。17.根据权利要求16所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为3。18.根据权利要求1至12中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为6至8范围内的整数。19.根据权利要求18所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为7。20.根据权利要求18所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为8。21.根据权利要求1至12中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为16至18范围内的整数。22.根据权利要求21所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为17。23.根据权利要求1至12中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为9至11范围内的整数。24.根据权利要求23所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中a为10。25.根据权利要求1至24中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1不存在或选自(C5‑
C
15
)烯基、
‑
C(O)O(C4‑
C
18
)烷基，和被(C4‑
C
16
)烷基取代的环丙基。26.根据权利要求1至25中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1不存在或选自(C5‑
C
12
)烯基、
‑
C(O)O(C4‑
C
12
)烷基，和被(C4‑
C
12
)烷基取代的环丙基。27.根据权利要求1至26中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1不存在或选自(C5‑
C
10
)烯基、
‑
C(O)O(C4‑
C
10
)烷基，和被(C4‑
C
10
)烷基取代的环丙基。28.根据权利要求1至27中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1为C
10
烯基。29.根据权利要求1至27中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1的
‑
C(O)O(C2‑
C
20
)烷基、
‑
C(O)O(C4‑
C
18
)、
‑
C(O)O(C4‑
C
12
)烷基或
‑
C(O)O(C4‑
C
10
)烷基是无支链烷基。30.根据权利要求29所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1是
‑
C(O)O(C9烷基)。31.根据权利要求25至27中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中
‑
C(O)O(C4‑
C
18
)烷基、
‑
C(O)O(C4‑
C
12
)烷基或
‑
C(O)O(C4‑
C
10
)烷基是支链烷基。32.根据权利要求31所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1是
‑
C(O)O(C
17
烷基)。33.根据权利要求1至24中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R1选自表1中列出的任何组。34.根据权利要求1所述的脂质，或其药学上可接受的盐，其中R2选自表2中所列的任何
组。35.根据权利要求1所述的脂质，其中所述脂质选自表3中列出的任何脂质，或其药学上可接受的盐。36.一种脂质纳米颗粒(LNP)，其包含根据权利要求1至35中任一项所述的脂质，或其药学上可接受的盐；以及核酸。37.根据权利要求36所述的脂质纳米颗粒，其中所述核酸被包封在所述脂质中。38.根据权利要求36或37所述的脂质纳米颗粒，其中所述核酸选自由以下组成的组：小基因、质粒、小环、小干扰RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)、反义寡核苷酸(ASO)、核酶、ceDNA、线性共价封闭DNA、doggybone
TM
、前端粒封闭端DNA或哑铃状线性DNA、切丁酶
‑
底物dsRNA、小发夹RNA(shRNA)、不对称干扰RNA(aiRNA)、微RNA(miRNA)、mRNA、tRNA、rRNA、DNA病毒载体、病毒RNA载体、非病毒载体及它们的任意组合。39.根据权利要求38所述的脂质纳米颗粒，其中所述核酸是封闭端DNA(ceDNA)。40.根据权利要求36至39中任一项所述的脂质纳米颗粒，其进一步包含甾醇。41.根据权利要求40所述的脂质纳米颗粒，其中所述甾醇是胆固醇或β
‑
谷甾醇。42.根据权利要求36至41中任一项所述的脂质纳米颗粒，其进一步包括PEG
‑
脂质缀合物。43.根据权利要求42所述的脂质纳米颗粒，其中所述PEG
‑
脂质缀合物是1
‑
(单甲氧基
‑
聚乙二醇)
‑
2,3
‑
二肉豆蔻酰基甘油(PEG
‑
DMG)。44.根据权利要求36至43中任一项所述的脂质纳米颗粒，其进一步包括非阳离子脂质。45.根据权利要求44所述的脂质纳米颗粒，其中所述非阳离子脂质选自由以下组成的组：二硬脂酰基
‑
sn
‑
甘油
‑
磷酸乙醇胺、二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二油酰基磷脂酰胆碱(DOPC)、二棕榈酰基磷脂酰胆碱(DPPC)、二油酰基磷脂酰甘油(DOPG)、二棕榈酰基磷脂酰甘油(DPPG)、二油酰基磷脂酰
‑
乙醇胺(DOPE)、棕榈酰基油酰基磷脂酰胆碱(POPC)、棕榈酰基油酰基磷脂酰乙醇胺(POPE)、二油酰基
‑
磷脂酰乙醇胺4
‑
(N
‑
马来酰亚胺甲基)
‑
环己烷
‑1‑
羧酸酯(DOPE
‑
mal)、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二肉豆蔻酰基磷酸乙醇胺(DMPE)、二硬脂酰基
‑
磷脂酰
‑
乙醇胺(DSPE)、单甲基
‑
磷脂酰乙醇胺(例如16
‑
O
‑
单甲基PE)、二甲基
‑
磷脂酰乙醇胺(例如16
‑
O
‑
二甲基PE)、18
‑1‑
反式PE、1
‑
硬脂酰基
‑2‑
油酰基
‑
磷脂酰乙醇胺(SOPE)、氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)、卵磷脂酰胆碱(EPC)、二油酰基磷脂酰丝氨酸(DOPS)、鞘磷脂(SM)、二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱(DMPC)、二肉豆蔻酰基磷脂酰甘油(DMPG)、二硬脂酰基磷脂酰甘油(DSPG)、二芥子酰基磷脂酰胆碱(DEPC)、棕榈酰基油酰基磷脂酰甘油(POPG)、二反式油酰基
‑
磷脂酰乙醇胺(DEPE)、1，2
‑
二月桂酰基
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸乙醇胺(DLPE)；1，2
‑
二植烷酰基
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸乙醇胺(DPHyPE)；卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、溶血卵磷脂、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、鞘磷脂、卵鞘磷脂(ESM)、脑磷脂、心磷脂、磷脂酸、脑苷脂、二十六烷基磷酸酯、溶血磷脂酰胆碱、二亚油酰基磷脂酰胆碱或其混合物。46.根据权利要求45所述的脂质纳米颗粒，其中所述非阳离子脂质选自由以下组成的组：二油酰基磷脂酰胆碱(DOPC)、二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)和二油酰基
‑
磷脂酰乙醇胺(DOPE)。47.根据权利要求46所述的脂质纳米颗粒，其中所述PEG
‑
脂质缀合物以约1.5％至约4％的摩尔百分比存在。
48.根据权利要求47所述的脂质纳米颗粒，其中所述PEG
‑
脂质缀合物以约2％至约3％的摩尔百分比存在。49.根据权利要求48所述的脂质纳米颗粒，其中所述PEG
‑
脂质缀合物以约2.5至约3％的摩尔百分比存在。50.根据权利要求49所述的脂质纳米颗粒，其中所述PEG
‑
脂质缀合物以约3％的摩尔百分比存在。51.根据权利要求42至50中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中所述PEG
‑
脂质缀合物是DMG
‑
PEG。52.根据权利要求36和51中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中所述胆固醇或β
‑
谷甾醇以约20％至约40％的摩尔百分比存在，并且其中所述脂质以约80％至约60％的摩尔百分比存在。53.根据权利要求52所述的脂质纳米颗粒，其中所述胆固醇或β
‑
谷甾醇以约40％的摩尔百分比存在，并且其中所述脂质以约50％的摩尔百分比存在。54.根据权利要求36至39中任一项所...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：世代生物公司，
类型：发明
国别省市：