抑制SCUBE2，一种新颖VEGFR2辅助受体，抑制肿瘤血管发生制造技术

本发明专利技术揭示抑制SCUBE2，一种新颖VEGFR2辅助受体，抑制肿瘤血管发生。具体地，本申请涉及分离的抗SCUBE2(含有信号肽

【技术实现步骤摘要】
抑制SCUBE2，一种新颖VEGFR2辅助受体，抑制肿瘤血管发生
[0001]本申请是申请号为201780023573.8(国际申请号为：PCT/US2017/026855)，申请日为2017年4月10日，专利技术名称为“抑制SCUBE2，一种新颖VEGFR2辅助受体，抑制肿瘤血管发生”的专利技术专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术主要涉及抗生成血管疗法，更具体而言，涉及用于抗生成血管疗法的抗SCUBE2抗体。

技术介绍

[0003]血管内皮生长因子(VEGF)是血管发生的主要调节者；其结合至内皮细胞(EC)表面上的其受体VEGFR2(受体酪氨酸激酶，RTK)且触发二聚化及转磷酸化，以活化信号级联放大，包括EC迁移、增殖及管腔生成(tubulogenesis)所需要的p44/42丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)及AKT。这些VEGF反应可进一步受到少数VEGFR2辅助受体(co
‑
receptor)(诸如神经毡蛋白、类肝素硫酸蛋白聚糖类、CD44及CD146)促进。然而，其他可能存在的调控VEGF诱导的血管发生的VEGFR2辅助受体仍待发现。
[0004]SCUBE2为最初由从人类EC鉴别出的三个不同基因(SCUBE1、2及3)组成的小的演化保守基因家族的第二个成员。该基因编码～1,000个氨基酸多肽，以具有5个蛋白质区域的模块形式构成：NH2端信号肽(signal peptide)、9个连续重复的EGF样基序、间隔区域(spacer region)、3个富含半胱氨酸(cysteine
‑
rich；CR)的重复区域及1个在COOH端的CUB区域。这些SCUBE蛋白可藉由两个不同的膜锚定机制(即，静电及凝集素
‑
聚糖相互作用(electrostatic and lectin
‑
glycan interactions))经由其间隔区域及CR重复区域结合于细胞表面上作为周边膜蛋白质(peripheral membrane protein)，且为多种生长因子的辅助受体。除在正常内皮中表达以外，SCUBE2亦在低氧肿瘤微血管中高表达。然而，SCUBE2是否可作为VEGFR2的辅助受体及其在VEGF诱导的血管发生中扮演的角色仍待探究。

技术实现思路

[0005]在一个方面中，本专利技术涉及分离的抗SCUBE2抗体或其结合片段，其包含特异性结合于位于SCUBE2(SEQ ID NO：66)内的标靶域的抗原结合区，且呈现抑制VEGF诱导的血管发生的特性。该标靶域选自由以下组成的群：SCUBE2(SEQ ID NO：66)的a.a.位置175至323范围内的EGF样基序(EGF
‑
like motifs)4至6，或a.a.位置441至659范围内的间隔区域(spacer region)，或a.a.位置668至725范围内的第一富含半胱氨酸基序(cys
‑
rich motif)。
[0006]在一个实施方式中，本专利技术的分离的抗SCUBE2抗体或其结合片段呈现抑制肿瘤血管发生及VEGF诱导的内皮细胞增殖及毛细管形成的特性。
[0007]在另一个实施方式中，本专利技术的分离的抗SCUBE2抗体或其结合片段包含重链可变域(V
H
)及轻链可变域(V
L
)，其中：
[0008](a)V
H
包含SEQ ID NO：17的氨基酸序列，且V
L
包含SEQ ID NO：18的氨基酸序列；或
[0009](b)V
H
包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列，且V
L
包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列；或
[0010](c)V
H
包含SEQ ID NO：33的氨基酸序列，且V
L
包含SEQ ID NO：34的氨基酸序列；或
[0011](d)V
H
包含SEQ ID NO：49的氨基酸序列，且V
L
包含SEQ ID NO：50的氨基酸序列。
[0012]在另一个实施方式中，本专利技术的抗SCUBE2抗体的V
H
及V
L
各自包含如下互补决定区(CDR)1、CDR2、CDR3：
[0013](i)V
H
包含含有SEQ ID NO：19的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：20的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：21的氨基酸序列的CDR3；且V
L
包含含有SEQ ID NO：22的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：23的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：24的氨基酸序列的CDR3；或
[0014](ii)V
H
包含含有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的CDR3；且V
L
包含含有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：7的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：8的氨基酸序列的CDR3；或
[0015](iii)V
H
包含含有SEQ ID NO：35的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：36的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：37的氨基酸序列的CDR3；且V
L
包含含有SEQ ID NO：38的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：39的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：40的氨基酸序列的CDR3；或
[0016](iv)V
H
包含含有SEQ ID NO：51的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：52的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：53的氨基酸序列的CDR3；且V
L
包含含有SEQ ID NO：54的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：55的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：56的氨基酸序列的CDR3。
[0017]在另一个实施方式中，本专利技术的分离的抗SCUBE2抗体或其结合片段是单克隆抗体，是人源化的，是融合蛋白质，或选自由以下组成的群：Fv片段、片段抗原结合(Fab)片段、F(ab')2片段、Fab'片段、Fd'片段、及Fd片段及单链抗体可变片段(scFv)。
[0018]在另一个实施方式中，本专利技术的分离的抗SCUBE2抗体或结合片段囊封于脂质体内。
[0019]在另一个方面中，本专利技术涉及一种医药组合物，其包含：(i)治疗有效量的本专利技术的分离的抗SCUBE2抗体或其结合片段；及(ii)治疗有效量的特异性抗VEGF的VEGF抗体。
[0020]在一个实施方式中，医药组合物中的抗SCUBE2抗体的V
H
及V
L<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的抗SCUBE2单克隆抗体或抗原结合片段，其包含特异性结合于位于序列为SEQ ID NO：66的SCUBE2内的标靶域的抗原结合区且呈现抑制VEGF诱导的血管发生的特性，其中该标靶域位于SEQ ID NO：66的氨基酸残基位置175至323范围内的EGF样基序4至6，或氨基酸残基位置441至659范围内的间隔区域，或氨基酸残基位置668至725范围内的第一富含半胱氨酸基序，所述的分离的抗SCUBE2单克隆抗体或抗原结合片段包含重链可变域(V
H
)及轻链可变域(V
L
)，该V
H
包含互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2以及V
H CDR3，且该V
L
包含互补决定区V
L CDR1、V
L CDR2以及V
L CDR3，其中：(i)该V
H CDR1、V
H CDR2以及V
H CDR3分别为SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：52及SEQ ID NO：53的氨基酸序列；且该V
L CDR1、V
L CDR2以及V
L CDR3分别为SEQ ID NO：54、SEQ ID NO：55及SEQ ID NO：56的氨基酸序列；或(ii)该V
H
包含含有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的CDR3；且该V
L
包含含有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：7的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：8的氨基酸序列的CDR3；或(iii)该V
H
包含含有SEQ ID NO：35的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：36的氨基酸序列的CDR2及含有SEQ ID NO：37的氨基酸序列的CDR3；且该V
L
包含含有SEQ ID NO：38的氨基酸序列的CDR1、含有SEQ ID NO：39的氨基酸序列的CDR2及含有...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨瑞彬，林育婵，
申请(专利权)人：刘扶东，
类型：发明
国别省市：