一种二裂酵母裂解物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种二裂酵母裂解物及其制备方法与应用。所述的二裂酵母裂解物的制备方法，其包含如下步骤：(1)取二裂酵母与水混合，然后经超声破碎后冻干得冻干粉；(2)将冻干粉经有机溶剂脱脂后得脱脂粉；将脱脂粉与水混合，接着先用3～5kD孔径的透析膜进行透析得第一截留液和第一透析液；再将第一透析液用1～2kD孔径的透析膜进行透析得第二截留液和第二透析液；取第二截留液冻干后得二裂酵母裂解物。由该方法制备得到的二裂酵母裂解物，其具有降低酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成作用。因此，将本发明专利技术所述的二裂酵母裂解物作为有效成分用于开发具有降低酪氨酸酶活性和抑制黑色素生成作用的护肤品以及药品具有重要的应用价值。用价值。用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种二裂酵母裂解物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种二裂酵母裂解物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]皮肤作为人体最大的器官，主要由表皮、真皮和皮下脂肪组织这三层组成。虽然起到物理屏障的作用，可以人体内环境与外界环境隔绝开来，但也会遭受多种有害刺激，如：外界环境的物理、化学、细菌感染等。外界刺激达到一定程度会诱发皮肤氧化受损、屏障功能受损、皮肤黑色素生成以及黑色素沉积。
[0003]研究发现，肌肤表层益生菌在保护皮肤方面起着至关重要作用，益生菌在皮肤表面可竞争性排斥病原体。不光是活菌，作为益生菌营养物质的益生元对于治疗皮肤痤疮、愈合伤口也有着极具潜力的效果。对于益生菌和益生元在肠道和肠道免疫方面的研究，研究人员已进行了诸多探讨，但对于益生菌及益生菌中的有效成分是否具有降低酪氨酸酶活性和/或抑制黑色素生成作用，现有技术鲜有报道。

技术实现思路

[0004]为了解决现有技术中存在的至少之一的技术问题，本专利技术首先提供了一种二裂酵母裂解物的制备方法；研究表明，由该方法制备得到的二裂酵母裂解物，其具有降低酪氨酸酶活性作用，同时还具有抑制黑色素生成作用。
[0005]本专利技术的技术方案如下：
[0006]一种二裂酵母裂解物的制备方法，其包含如下步骤：
[0007](1)取二裂酵母与水混合，然后经超声破碎后冻干得冻干粉；
[0008](2)将冻干粉经有机溶剂脱脂后得脱脂粉；将脱脂粉与水混合，接着先用3～5kD孔径的透析膜进行透析得第一截留液和第一透析液；再将第一透析液用1～2kD孔径的透析膜进行透析得第二截留液和第二透析液；取第二截留液冻干后得二裂酵母裂解物初产物；即所述的二裂酵母裂解物。
[0009]优选地，步骤(1)中水的重量用量为二裂酵母重量的8～15倍。
[0010]最优选地，步骤(1)中水的重量用量为二裂酵母重量的10倍。
[0011]优选地，步骤(2)中水的重量用量为脱脂粉重量的8～15倍。
[0012]最优选地，步骤(2)中水的重量用量为脱脂粉重量的10倍。
[0013]优选地，步骤(2)中，接着先用4kD孔径的透析膜进行透析得第一截留液和第一透析液；再将第一透析液用1kD孔径的透析膜进行透析得第二截留液和第二透析液；取第二截留液冻干后得二裂酵母裂解物初产物。
[0014]优选地，所述的二裂酵母裂解物的制备方法，还包含步骤(3)和(4)；步骤(3)和(4)具体为：
[0015](3)将二裂酵母裂解物初产物上葡聚糖凝胶柱，然后依次用浓度为2.0～1.8mM的
(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分1，用1.5～1.4mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分2，用0.9～0.8mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分3，用0.5～0.4mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分4，用0.2～0.1mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分5；
[0016](4)取馏分2和/或馏分5干燥后得所述的二裂酵母裂解物。
[0017]专利技术人在进一步的研究中惊奇的发现，通过上述方法制备得到的馏分2或馏分5干燥后得到的二裂酵母裂解物，其降低酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成作用均要优于步骤(2)制备得到的二裂酵母裂解物初产物。
[0018]专利技术人在此需要强调的是，葡聚糖凝胶柱的洗脱条件对于进一步制备得到的二裂酵母裂解物与二裂酵母裂解物初产物相比，是否具有更好的降低酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成作用起着决定性作用。专利技术人经大量的研究表明，只有经上述洗脱条件用1.5～1.4mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得到的馏分2以及用0.2～0.1mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得到的馏分5，其降低酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成作用要好于二裂酵母裂解物初产物；而采用其它洗脱条件洗脱得到的馏分，其降低酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成作用并未好于二裂酵母裂解物初产物。
[0019]优选地，步骤(3)中，将二裂酵母裂解物初产物上葡聚糖凝胶柱，然后依次用浓度为1.9mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分1，用1.3mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分2，用0.85mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分3，用0.45mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分4，用0.15mM的(NH4)2SO4水溶液进行洗脱得馏分5。
[0020]优选地，取馏分2和馏分5混合，再经干燥后得所述的二裂酵母裂解物。
[0021]专利技术人在大量的实验中惊奇的发现，将通过本专利技术上述葡聚糖凝胶柱的洗脱条件得到的馏分2和馏分5混合得到的二裂酵母裂解物具有协同的降低酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成作用；其降低酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成作用要远远高于单独的馏分2或馏分5，甚至都高于熊果苷。
[0022]本专利技术还提供了一种由上述方法制备得到的二裂酵母裂解物。
[0023]本专利技术还提供了一种上述二裂酵母裂解物在制备具有降低酪氨酸酶活性和/或抑制黑色素生成作用的产品中的应用。
[0024]优选地，所述的产品为护肤品或药品。
[0025]有益效果：本专利技术提供了一种全新方法制备得到的二裂酵母裂解物；研究表明，由该方法制备得到的二裂酵母裂解物，其具有降低酪氨酸酶活性作用，同时还具有抑制黑色素生成作用。因此，将本专利技术所述的二裂酵母裂解物作为有效成分用于开发具有降低酪氨酸酶活性和抑制黑色素生成作用的护肤品以及药品具有重要的应用价值。
附图说明
[0026]图1为本专利技术所述的二裂酵母裂解物对细胞酪氨酸酶生成的影响。
[0027]图2为本专利技术所述的二裂酵母裂解物对细胞黑色素生成的影响。
具体实施方式
[0028]下面将结合实施例对本专利技术技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通
技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]实施例1二裂酵母裂解物的制备
[0030](1)取二裂酵母与10倍重量的水混合，然后经超声破碎后冻干得冻干粉；
[0031](2)将冻干粉放入8倍重量的异丙醇中脱脂2h后得脱脂粉；将脱脂粉与10倍重量的水混合，接着先用4kD孔径的透析膜进行透析得第一截留液和第一透析液；再将第一透析液用1kD孔径的透析膜进行透析得第二截留液和第二透析液；取第二截留液冻干后得二裂酵母裂解物初产物；即所述的二裂酵母裂解物。
[0032]实施例2二裂酵母裂解物的制备
[0033](1)取二裂酵母与10倍重量的水混合，然后经超声破碎后冻干得冻干粉；
[0034](2)将冻干粉放入8倍重量的异丙醇中脱脂2h后得脱脂粉；将脱脂粉与10倍重量的水混合，接着先用4kD孔径的透析膜进行透析得第一截留液和第一透析液；再将第一透析液用1kD孔径的透析膜进行本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种二裂酵母裂解物的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：(1)取二裂酵母与水混合，然后经超声破碎后冻干得冻干粉；(2)将冻干粉经有机溶剂脱脂后得脱脂粉；将脱脂粉与水混合，接着先用3～5kD孔径的透析膜进行透析得第一截留液和第一透析液；再将第一透析液用1～2kD孔径的透析膜进行透析得第二截留液和第二透析液；取第二截留液冻干后得二裂酵母裂解物初产物；即所述的二裂酵母裂解物。2.根据权利要求1所述的二裂酵母裂解物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中水的重量用量为二裂酵母重量的8～15倍；最优选地，步骤(1)中水的重量用量为二裂酵母重量的10倍。3.根据权利要求1所述的二裂酵母裂解物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中水的重量用量为脱脂粉重量的8～15倍；最优选地，步骤(2)中水的重量用量为脱脂粉重量的10倍。4.根据权利要求1所述的二裂酵母裂解物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，接着先用4kD孔径的透析膜进行透析得第一截留液和第一透析液；再将第一透析液用1kD孔径的透析膜进行透析得第二截留液和第二透析液；取第二截留液冻干后得二裂酵母裂解物初产物。5.根据权利要求1所述的二裂酵母裂解物的制备方法，其特征在于，还包含步骤(3)和(4)；步骤(3)和(4)具体为：(3)将二裂酵母裂解物初产物上葡聚糖凝胶柱，然后依次用浓度为2.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓宇，牛文芳，刘杰，王怀玲，林燕玲，林沛纯，关祉成，
申请(专利权)人：深圳海创生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：