【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】40和41,以及氨基酸序列SEQ ID NO:9;(j)多核苷酸序列SEQ ID NO 43和44,以及氨基酸序列SEQ ID NO:11;(k)多核苷酸序列SEQ ID NO 45和46,以及氨基酸序列SEQ ID NO:12;(1)多核苷酸序列SEQ ID NO 48和49,以及氨基酸序列SEQ IDNO:14;(m)多核苷酸序列SEQ ID NO 50和51,以及氨基酸序列SEQ ID NO:15;(n)多核苷酸序列SEQ ID NO 53和54,以及氨基酸序列SEQ ID NO:17;(o)多核苷酸序列SEQ ID NO 56和57,以及氨基酸序列SEQ ID NO:19;(p)多核苷酸序列SEQ ID NO 59和60,以及氨基酸序列SEQ ID NO:21;以及(q)多核苷酸序列SEQ ID NO 26、27、61
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66和79
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119中的任何两个或更多个,以及氨基酸序列SEQ ID NO:2。在一些实例中,表达构建体是表达载体。在另外的实例中,表达构建体是双启动子表达载体,例如包含L
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阿拉伯糖诱导型启动子和丙酸盐诱导型启动子的双启动子表达载体。
[0013]还提供了用于产生靶多肽的方法。在一些实施例中,所述方法包括产生组合物,所述组合物包含本文所提供的内含肽融合多肽,其中内含肽氨基酸序列从所述内含肽融合多肽自切除,由此产生靶多肽;并从所述组合物回收靶多肽。在一些实施例中,产生所述组合物包括在宿主细胞中表达内含肽融合多肽。所述方法还可包括裂解宿主细胞。在一些实例中,裂解宿主细胞产生 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】ID NO:123的氨基酸100
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129以及SEQ ID NO:124的氨基酸100
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129。5.根据权利要求4所述的内含肽多肽,包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:2的氨基酸105
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124、SEQ ID NO:1的氨基酸93
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112、SEQ ID NO:4的氨基酸85
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104、SEQ ID NO:12的氨基酸1
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21、SEQ ID NO:15的氨基酸1
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21、SEQ ID NO:120的氨基酸105
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124、SEQ ID NO:121的氨基酸105
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124、SEQ ID NO:122的氨基酸105
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124、SEQ ID NO:123的氨基酸105
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124以及SEQ ID NO:124的氨基酸105
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124;或包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:1的氨基酸88
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117、SEQ ID NO:2的氨基酸100
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129、SEQ ID NO:4的氨基酸80
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109、SEQ ID NO:12的氨基酸1
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30、SEQ ID NO:15的氨基酸1
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30、SEQ ID NO:120的氨基酸100
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129、SEQ ID NO:121的氨基酸100
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129、SEQ ID NO:122的氨基酸100
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129、SEQ ID NO:123的氨基酸100
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129以及SEQ ID NO:124的氨基酸100
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129。6.根据权利要求1至5中任一项所述的内含肽多肽,其中所述内含肽氨基酸序列不含N末端半胱氨酸残基。7.根据权利要求1至6中任一项所述的内含肽多肽,其中所述内含肽多肽缺乏显著的外显肽连接活性。8.根据权利要求1至5中任一项所述的内含肽多肽,其中所述内含肽多肽包含多组氨酸标签。9.根据权利要求8所述的内含肽多肽,其中所述多组氨酸标签包含6
×
His标签。10.根据权利要求1至5中任一项所述的内含肽多肽,其中所述内含肽多肽包含能被蛋白酶切割的切割序列。11.根据权利要求1至5中任一项所述的内含肽多肽,包含SEQ ID NO:1、2、4、12、15和120
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124中的任一个的氨基酸序列。12.一种内含肽融合多肽,包含根据权利要求1至5中任一项所述的内含肽多肽的氨基酸序列和靶多肽的氨基酸序列。13.根据权利要求12所述的内含肽融合多肽,其中所述靶多肽的氨基酸序列的N末端氨基酸是靶蛋白的成熟形式的氨基酸序列的N末端氨基酸。14.根据权利要求13所述的内含肽融合多肽,其中所述靶多肽可形成一个或多个二硫键。15.根据权利要求12所述的内含肽融合多肽,其中所述靶多肽包含选自由以下组成的组的多肽:抗体重链、抗体轻链及其片段。16.根据权利要求12所述的内含肽融合多肽,其中所述内含肽融合多肽不含信号序列。17.根据权利要求12所述的内含肽融合多肽,其中所述内含肽氨基酸序列不含N末端半胱氨酸残基。18.根据权利要求12所述的内含肽融合多肽,其中所述内含肽融合多肽缺乏显著的外显肽连接活性。19.根据权利要求12所述的内含肽融合多肽,其中所述内含肽融合多肽包含多组氨酸标签。20.根据权利要求19所述的内含肽融合多肽,其中所述多组氨酸标签包含6
×
His标签。21.根据权利要求12所述的内含肽融合多肽,其中所述内含肽融合多肽包含能被蛋白酶切割的切割序列。
22.一种多核苷酸,所述多核苷酸编码根据权利要求1至5中任一项所述的内含肽多肽。23.一种多核苷酸,所述多核苷酸编码内含肽多肽并且包含选自由SEQ ID NO 24
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119组成的组的核苷酸序列。24.一种表达构建体,包含两个或更多个编码内含肽的多核苷酸序列,其中各编码内含肽的多核苷酸序列不同于每一其它的编码内含肽的多核苷酸序列,并且其中由所述编码内含肽的多核苷酸序列所编码的每个内含肽多肽具有相同的氨基酸序列,或其中由所述编码内含肽的多核苷酸序列所编码的内含肽多肽中的至少两个具有不同的氨基酸序列。25.根据权利要求24所述的表达构建体,其中所述两个或更多个编码内含肽的多核苷酸序列选自由SEQ ID NO:24
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119组成的组。26.根据权利要求24所述的表达构建体,其...
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