一种新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒，包括免疫层析试纸，所述免疫层析试纸包括衬板以及设置在衬板上并依次连接的样品垫、结合垫、检测垫和吸水垫；所述检测垫上设置有检测线和质控线；所述样品垫上包被有重组抗原，所述重组抗原是SARS

【技术实现步骤摘要】
一种新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒


[0001]本专利技术属于生物医学检测领域，具体涉及一种新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒(SARS
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2)具有高传染性和高隐蔽性的特点，已致大量人群感染并导致新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID
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19)，新型冠状病毒肺炎以发热、干咳、乏力等为主要表现，少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等上呼吸道和消化道症状。重症病例多在1周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍及多器官功能衰竭等，严重危害人类健康。
[0003]为了控制新型冠状病毒传播，疫苗研发工作目前已取得诸多进展，而随疫苗接种人群的增加，对于接种后是否产生保护性抗体的检测需求也日益增加。
[0004]新型冠状病毒(SARS
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2)的刺突蛋白(S)包含一个受体结合域(Receptor
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binding domain，RBD)，负责识别细胞表面受体血管紧张素转换酶
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2(ACE2)。发现SARS
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2S蛋白的RBD与人ACE2受体强烈相互作用，导致内吞进入肺深部的宿主细胞并进行病毒复制。感染SARS
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2会启动免疫反应，这包括在血液中产生抗体或结合抗体。并非所有结合抗体都能阻断SARS
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2病毒的细胞浸润和复制。可以阻断病毒细胞浸润和复制的结合抗体亚群被称为中和抗体。SARS
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2S1蛋白RBD片段的中和抗体可以与SARS
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2的RBD区域结合，阻断RBD与ACE2受体的结合，从而阻断病毒入侵人体细胞。检测新型冠状病毒中和抗体有助于评估康复患者或无症状感染者的再感染风险，亦可作为疫苗效果的评价指标，具有非常重要的意义。
[0005]目前已有通过酶联免疫、化学发光等检测手段检测新型冠状病毒的中和抗体检测的报道，然而，上述方法操作复杂，耗时较长。而在诸多检测技术中，测流免疫层系技术(LFIA)因其检测简便、快捷的特点，获得了越来越多的关注。LFIA的基本原理是将特异的抗体(抗原)预先包被在硝酸纤维素(NC)膜的某一区带，测定时，样品通过毛细作用沿着NC膜向前移动，当到达包被有抗体(抗原)区带时，样品中相应的抗原(抗体)与NC膜上的抗体(抗原)特异结合，形成免疫复合物，反应完毕，根据不同标记物采用目测或检测仪器判读结果。
[0006]目前，基于LFIA进行新型冠状病毒中和抗体检测的产品与方法的研究也取得了诸多进展。例如，专利申请CN112485436A公开了一种新型冠状病毒中和抗体检测试纸，利用中和抗体与ACE2竞争结合金标记RBD抗原的原理，采用竞争法实现中和抗体的检测，又如专利CN112730851B公开了一种中和抗体检测试剂盒，在采用夹心法检测原理的基础上，通过添加捕获线的方式，将靶向RBD的非中和抗体提前捕获，提升检测灵敏度，同时保证后续通过夹心法检测中和抗体的特异性。然而，上述现有技术均未公开其检测的灵敏度和特异性结果。Li等人采用40nm金纳米粒子(AuNPs)开发了一种即时检验的LFIA，可以在15min内同时检测人血中SARS
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2的IgM和IgG，但其灵敏度和特异性也仅仅只有88.66％和90.63％(Li Z,Yi Y,Luo X,et al.Development and clinical application of a rapid IgM
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IgG combined antibody test for SARS
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2infection diagnosis[J].Journal of Medical Virology,2020,92(9):1518
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1524.)。此外，还有部分中和抗体检测试剂产品中所包被的抗体/抗原浓度较高，用量较大，一定程度上增加了生产成本，不利于产业化推广应用。
[0007]研发兼具高灵敏度和高特异性的抗体检测试剂是研发人员一直追求的目标，同时也是检测试剂研发的难点。不仅如此，目前市场对检测效率、检测试剂的成本等也提出了越来越高的要求。因此，提供一种能够快速简单地实现新型冠状病毒中和抗体检测，并且成本低、灵敏度和特异性优异的检测试剂，具有非常重要的意义。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种成本低且灵敏度和特异性优异的新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒。
[0009]本专利技术提供了一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒，它包括免疫层析试纸，所述免疫层析试纸包括衬板以及设置在衬板上并依次连接的样品垫、结合垫、检测垫和吸水垫；所述检测垫上设置有检测线和质控线；
[0010]所述样品垫上包被有重组抗原，所述重组抗原是SARS
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2S
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RBD与IgG抗体的Fc片段融合形成的融合蛋白SARS
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RBD
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Fc；
[0011]所述结合垫上包被有纳米颗粒标记的SARS
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2ACE2；
[0012]所述检测线上包被有抗IgG抗体的多抗。
[0013]进一步地，上述SARS
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2S
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RBD
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Fc的包被浓度为0.1～100μg/mL，例如，可以是0.1μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、3μg/mL、4μg/mL、5μg/mL、8μg/mL、10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL、60μg/mL、70μg/mL、80μg/mL、90μg/mL、或者100μg/mL等。
[0014]进一步地，上述纳米颗粒标记的SARS
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2ACE2是胶体金标记的SARS
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2ACE2，包被浓度为O.D.值＝1～30；即所述SARS
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2ACE2的包被浓度为9.75～12.75μg/mL，优选为11.25μg/mL。
[0015]进一步地，上述抗IgG抗体的多抗的包被浓度为0.1～2mg/mL，例如，可以是0.1mg/mL、0.3mg/mL、0.5mg/mL、0.8mg/mL、1mg/mL、1.2mg/mL、1.5mg/m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，它包括免疫层析试纸，所述免疫层析试纸包括衬板以及设置在衬板上并依次连接的样品垫、结合垫、检测垫和吸水垫；所述检测垫上设置有检测线和质控线；所述样品垫上包被有重组抗原，所述重组抗原是SARS
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RBD与IgG抗体的Fc片段融合形成的融合蛋白SARS
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RBD
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Fc；所述结合垫上包被有纳米颗粒标记的SARS
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2ACE2；所述检测线上包被有抗IgG抗体的多抗。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述SARS
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RBD
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Fc的包被浓度为0.1～100μg/mL。3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述纳米颗粒标记的SARS
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2ACE2是胶体金标记的SARS
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2ACE2，包被浓度为O.D.值＝1～30。4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述抗IgG抗体的多抗的包被浓度为0.1～2mg/mL。5.如权利要求1或4所述的试剂盒，其特征在于，所述IgG抗体为人IgG抗体，所述抗IgG抗体的多抗为鼠抗人IgG多抗；或，所述IgG抗体为鼠IgG抗体，所述抗IgG抗体的多抗为羊抗鼠IgG多抗。6.如权利要求1～4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述结合垫上还包被有纳米颗粒标记的IgG抗体，所述质控线上包被有与所述纳米颗粒标记的IgG抗体特异...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁向红，吴瀚，李丹，
申请(专利权)人：迈克生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：