具有改进的药代动力学特性的抗体变体制造技术

本公开文本提供了抗体的变体，其中变体抗体相对于相应的未修饰抗体具有修饰的净电荷特性。相对于所述相应的未修饰抗体，某些变体具有改进的药代动力学特性。某些抗体变体结合CD40。还提供了所述抗体变体的组合物及使用方法。法。法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有改进的药代动力学特性的抗体变体
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求于2020年5月18日提交的美国临时申请号63/026,499的权益，出于所有目的将所述申请以其整体特此并入。序列表
[0002]本申请含有以ASCII格式电子提交并且通过引用以其整体特此并入的序列表。在2021年5月16日创建的所述ASCII副本命名为200896_0016_WO
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_SL.txt并且大小为281,538字节。


[0003]本公开文本提供了抗体的变体，其中变体抗体相对于相应的未修饰抗体具有改进的药代动力学特性。在一些情况下，抗体多肽结合CD40并且不表现出CD40激动剂活性。提供了包含抗体的组合物，用于治疗涉及CD40活性的疾病的使用方法，以及在制备用于治疗涉及CD40活性的疾病的药物中的用途。

技术介绍

[0004]生物治疗分子通常是修饰实验的主题，其目的是试图增加治疗效果、疾病暴露和/或安全性概况。对于抗体治疗性分子，修饰可包括人源化、聚乙二醇化、糖基化和与诸如白蛋白的分子缀合。
[0005]药代动力学(PK)是指药物进入、经过和离开身体的运动。药物药代动力学评估药物作用的开始、持续时间和强度。
[0006]抗体治疗剂的药代动力学可受到多种特性的影响，包括分子大小、折叠稳定性、溶解度、靶相互作用、新生儿Fc结合能力和电荷(参见例如，Warnders等人,2018,Med.Res.Rev.38:1837
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1873；Leipold和Prabhu,2019,Clin.Transl.Sci.12:130
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139)。抗体的电荷修饰可影响电荷依赖性相互作用。例如，增加蛋白质上的碱性/正电荷(阳离子化)可增加与膜和细胞外基质的脱靶相互作用并倾向于降低药代动力学，而具有碱性电荷斑块的蛋白质的阴离子化通常改进PK。然而，由于蛋白质的许多特性的相互依赖性，有意调节体内行为的蛋白质修饰也可导致无意的和不希望的作用。因此，追求对抗体进行电荷修饰以调节PK并不简单，需要智能的蛋白质设计/工程化和实验来发现起作用的那些突变。
[0007]CD40是属于存在于抗原呈递细胞(APC)上的肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的共刺激分子，所述抗原呈递细胞包括树突细胞、B细胞和巨噬细胞。当CD40与T
H
细胞上的其配体CD154(CD40L)结合时，APC被激活。CD40介导的APC激活涉及多种免疫应答，包括细胞因子产生、共刺激分子(如CD86)的上调、以及增强抗原呈递和B细胞增殖。CD40也可由内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞和上皮细胞表达。
[0008]CD40激活还涉及与例如自身免疫、移植排斥或过敏反应相关的多种不期望的T细胞应答。控制不需要的T细胞应答的一种策略是用拮抗性抗体靶向CD40，导致开发出几种单克隆抗CD40抗体，例如单克隆抗体HCD122(卢卡木单抗)(以前称为Chiron 1212)、完全人结
构域抗体BMS
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986090(美国专利号9,475 879)。还参见例如WO 2018/217976和WO 2018/217988。

技术实现思路

[0009]本公开文本提供了抗体的变体，其中变体抗体相对于相应的未修饰抗体具有改进的药代动力学特性。还提供了一种增加至少一种药代动力学特性的方法。本公开文本还提供了抗CD40单克隆抗体变体，其相对于相应的未修饰亲本抗体具有相似或改进的药代动力学特性。本公开文本还提供了一种智能设计相对于相应的未修饰抗体具有相似或改进的药代动力学的抗体变体的方法。
[0010]提供了特异性结合人CD40的分离抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体包含含有重链可变区(V
H
)的第一多肽部分和含有轻链可变区(V
L
)的第二多肽部分，其中所述重链可变区和所述轻链可变区选自：(i)所述重链可变区包含HC1(QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYAFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGQINPTTGRSQYNEKFKTRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARWGLQPFAYWGQGTLVTVSS；SEQ ID NO.40)；以及所述轻链可变区包含LC4(DIQMTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQDVSTAVAWYQQKPGKAPQLLIYSASYQYTGVPSQFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYSTPWTFGGGTKVEIK；SEQ ID NO.41)；(ii)所述重链可变区包含HC1(QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYAFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGQINPTTGRSQYNEKFKTRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARWGLQPFAYWGQGTLVTVSS；SEQ ID NO.40)；以及所述轻链可变区包含LC3(DIQMTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQDVSTAVAWYQQKPGKAPELLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYSTPWTFGGGTKVEIK；SEQ ID NO.42)；(iii)所述重链可变区包含HC15(QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYAFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGQINPTTGRSQYNEKFKTQVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARWGLQPFAYWGQGTLVTVSS；SEQ ID NO.43)；以及所述轻链可变区包含LC3(DIQMTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQDVSTAVAWYQQKPGKAPELLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYSTPWTFGGGTKVEIK；SEQ ID NO.42)；(iv)所述重链可变区包含HC4(QVQLVQSGAEVEKPGSSVKVSCKASGYAFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGQINPTTGRSQYNEKFKTRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARWGLQPFAYWGQGTLVTVSS；SEQ ID NO.44)；以及所述轻链可变区包含LC1(DIQMTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYSTPWTFGGGTKVEIK；SEQ ID NO.45)；(v)所述重链可变区包含HC4(QVQLVQSGAEVEKPGSSVKVSCKASGYAFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGQINPTTGRSQYNEKFKTRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARWGLQPFAYWGQGTLVTVSS；SEQ ID NO.44)；以及所述轻链
可变区包含LC3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种特异性结合人CD40的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体包含含有重链可变区的第一多肽部分和含有轻链可变区的第二多肽部分，其中：(i)所述重链可变区包含选自以下的氨基酸序列：HC2(SEQ ID NO:59)、HC3(SEQ ID NO:60)、HC4(SEQ ID NO:44)、HC5(SEQ ID NO:46)、HC6(SEQ ID NO:61)、HC7(SEQ ID NO:62)、HC8(SEQ ID NO:63)、HC9(SEQ ID NO:64)、HC16(SEQ ID NO:65)、HC10(SEQ ID NO:66)、HC15(SEQ ID NO:43)、HC11(SEQ ID NO:67)、HC12(SEQ ID NO:68)和HC14(SEQ ID NO:69)；以及所述轻链可变区包含LC1(SEQ ID NO:45)；(ii)所述重链可变区包含选自以下的氨基酸序列：HC1(SEQ ID NO:40)、HC2(SEQ ID NO:59)、HC3(SEQ ID NO:60)、HC4(SEQ ID NO:44)、HC5(SEQ ID NO:46)、HC6(SEQ ID NO:61)、HC7(SEQ ID NO:62)、HC8(SEQ ID NO:63)、HC9(SEQ ID NO:64)、HC16(SEQ ID NO:65)、HC10(SEQ ID NO:66)、HC15(SEQ ID NO:43)、HC11(SEQ ID NO:67)、HC12(SEQ ID NO:68)和HC14(SEQ ID NO:69)、和H13(SEQ ID NO:71)；以及所述轻链可变区包含LC2(SEQ ID NO:70)；(iii)所述重链可变区包含选自以下的氨基酸序列：HC1(SEQ ID NO:40)、HC2(SEQ ID NO:59)、HC3(SEQ ID NO:60)、HC4(SEQ ID NO:44)、HC5(SEQ ID NO:46)、HC6(SEQ ID NO:61)、HC7(SEQ ID NO:62)、HC8(SEQ ID NO:63)、HC9(SEQ ID NO:64)、HC16(SEQ ID NO:65)、HC10(SEQ ID NO:66)、HC15(SEQ ID NO:43)、HC11(SEQ ID NO:67)、HC12(SEQ ID NO:68)和HC14(SEQ ID NO:69)、和H13(SEQ ID NO:71)；以及所述轻链可变区包含LC3(SEQ ID NO:42)；(iv)所述重链可变区包含选自以下的氨基酸序列：HC1(SEQ ID NO:40)、HC2(SEQ ID NO:59)、HC3(SEQ ID NO:60)、HC4(SEQ ID NO:44)、HC5(SEQ ID NO:46)、HC6(SEQ ID NO:61)、HC7(SEQ ID NO:62)、HC8(SEQ ID NO:63)、HC9(SEQ ID NO:64)、HC16(SEQ ID NO:65)、HC10(SEQ ID NO:66)、HC15(SEQ ID NO:43)、HC11(SEQ ID NO:67)、HC12(SEQ ID NO:68)和HC14(SEQ ID NO:69)、和H13(SEQ ID NO:71)；以及所述轻链可变区包含LC4(SEQ ID NO:41)；(v)所述重链可变区包含选自以下的氨基酸序列：HC1(SEQ ID NO:40)、HC2(SEQ ID NO:59)、HC3(SEQ ID NO:60)、HC4(SEQ ID NO:44)、HC5(SEQ ID NO:46)、HC6(SEQ ID NO:61)、HC7(SEQ ID NO:62)、HC8(SEQ ID NO:63)、HC9(SEQ ID NO:64)、HC16(SEQ ID NO:65)、HC10(SEQ ID NO:66)、HC15(SEQ ID NO:43)、HC11(SEQ ID NO:67)、HC12(SEQ ID NO:68)和HC14(SEQ ID NO:69)、和H13(SEQ ID NO:71)；以及所述轻链可变区包含LC5(SEQ ID NO:90)；或(vi)所述重链可变区包含选自以下的氨基酸序列：HC1(SEQ ID NO:40)、HC2(SEQ ID NO:59)、HC3(SEQ ID NO:60)、HC4(SEQ ID NO:44)、HC5(SEQ ID NO:46)、HC6(SEQ ID NO:61)、HC7(SEQ ID NO:62)、HC8(SEQ ID NO:63)、HC9(SEQ ID NO:64)、HC16(SEQ ID NO:65)、HC10(SEQ ID NO:66)、HC15(SEQ ID NO:43)、HC11(SEQ ID NO:67)、HC12(SEQ ID NO:68)和HC14(SEQ ID NO:69)、和H13(SEQ ID NO:71)；以及所述轻链可变区包含LC6(SEQ ID NO:72)。2.一种特异性结合人CD40的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体包含含有重
NO.19)；(iii)所述重链可变区包含HC15(SEQ ID NO.84)；以及所述轻链可变区包含LC3(SEQ ID NO.19)；(iv)所述重链可变区包含HC4(SEQ ID NO.84)；以及所述轻链可变区包含LC1(SEQ ID NO.17)；(v)所述重链可变区包含HC4(SEQ ID NO.84)；以及所述轻链可变区包含LC3(SEQ ID NO.19)；或(vi)所述重链可变区包含HC5(SEQ ID NO.85)；以及所述轻链可变区包含LC4(SEQ ID NO.20)。6.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含HC1(SEQ ID NO.40)；以及所述轻链可变区包含LC4(SEQ ID NO.41)。7.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含HC1(SEQ ID NO.40)；以及所述轻链可变区包含LC3(SEQ ID NO.42)。8.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含HC15(SEQ ID NO.43)；以及所述轻链可变区包含LC3(SEQ ID NO.42)。9.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含HC4(SEQ ID NO.44)；以及所述轻链可变区包含LC1(SEQ ID NO.45)。10.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含HC4(SEQ ID NO.44)；以及所述轻链可变区包含LC3(SEQ ID NO.42)。11.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：