一株甜菜夜蛾细胞系制造技术

本发明专利技术提供一株甜菜夜蛾细胞系，为甜菜夜蛾细胞系QAU

【技术实现步骤摘要】
一株甜菜夜蛾细胞系


[0001]本专利技术属于农业和生物
，具体涉及一株甜菜夜蛾细胞系，适合于杆状病毒与昆虫宿主互作以及昆虫抗病毒机制的研究。

技术介绍

[0002]昆虫杆状病毒作为生物杀虫剂，因其具有环境友好性、宿主特异性和防治后效作用明显等优点，在害虫生物防治中发挥着重要作用，具有广阔的应用前景。在宿主昆虫与病毒的共同进化过程中，一方面宿主昆虫可通过免疫反应抵御病毒的入侵，另一方面病毒针对宿主免疫也会进化出抑制或逃避的响应。因此，宿主昆虫与病毒的相互关系以及昆虫抗病毒机制的研究对于提高害虫生物防治效果显得尤为重要。
[0003]昆虫属于无脊椎动物，与高等脊椎动物相比缺少获得性免疫系统，不会对入侵的病毒产生特异的抗体，而是在与病毒的长期互作中形成了一套独特的先天免疫系统。宿主昆虫可通过细胞凋亡、激活免疫信号转导通路以及效应机制等多种过程完成对病毒的杀灭和清除。
[0004]昆虫细胞系在生物学、农业以及医学领域的研究和应用方面发挥着重要的作用，尤其是昆虫病毒学研究的重要工具，为研究提供了简单、快速和准确的手段以及理想的体外模型。自1959年高尚荫首次建立了家蚕卵巢细胞系和1962年Grace成功建立传代的桉蚕Antheraea eucalypti细胞系以来，世界各地已从170多种昆虫中建立了800多个细胞系。目前，细胞系在细胞凋亡、免疫信号转导通路等抗病毒免疫途径研究中的应用日益受到人们的关注，建立和筛选具有不同生物学特性的新昆虫细胞系，并从中发掘具有抗病毒功能的细胞系，将为杆状病毒与昆虫宿主互作以及昆虫抗病毒机制的研究提供有价值的实验材料，具有重要的意义和广阔的应用前景。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供一株甜菜夜蛾细胞系，该细胞系对杆状病毒代表种苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)的感染表现为细胞发生凋亡现象，病毒产量显著降低，细胞凋亡核心基因被激活。但该细胞系对甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)的感染不敏感，相关抗菌肽基因被激活。该细胞系是适合于杆状病毒与昆虫宿主互作以及昆虫抗病毒机制研究的优良实验细胞系。
[0006]本专利技术所提供的昆虫细胞系，为甜菜夜蛾细胞系QAU
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Se
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RV(Spodoptera exigua cell line QAU
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Se
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RV，简称Se
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RV)，于2022年12月2日保藏在位于武汉、武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2022345。
[0007]本专利技术所提供的细胞系经线粒体细胞色素氧化酶I亚基(CoI)基因片段序列鉴定为甜菜夜蛾细胞系，其中CoI基因片段核苷酸序列为SEQ ID NO:1，其蛋白序列为SEQ ID NO:2。
[0008]本专利技术所提供的细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)侵染后表现为细胞凋亡，病毒产量显著降低。
[0009]本专利技术所提供的细胞系对甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeMNPV)不敏感，接种SeMNPV后未发现细胞出现典型的病毒感染症状。
[0010]本专利技术所提供的细胞系Se
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RV可用于病毒与宿主细胞间的互作和宿主昆虫抗病毒机制的研究。
附图说明
[0011]图1为细胞系Se
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RV的形态图；
[0012]图2为AcMNPV感染细胞系Se
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RV的形态图；
[0013]图3为AcMNPV感染Se
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RV细胞和Se
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3细胞(对照)的病毒产量图，其中A为出芽型病毒粒子(BV)的产量，B为病毒多角体(OB)的产量；
[0014]图4为AcMNPV感染Se
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RV细胞不同时间后细胞凋亡核心基因Casepase的表达变化图，其中A、B、C、D、E、F分别为Caspase1、Caspase2、Caspase3、Caspase4、Caspase5、Caspase6基因的表达变化；
[0015]图5为SeMNPV感染Se
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RV细胞和Se
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3细胞(对照)的病毒产量图；
[0016]图6为SeMNPV感染Se
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RV细胞后抗菌肽基因的表达变化图，其中A、B、C、D、E、F、G、H分别为Gloverin、Attacin1
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1、Attacin1
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2、Attacin2、Attacin3、Lebocin1、Lebocin2、Cecropin A基因的表达变化。
具体实施方式
[0017]本专利技术成功克隆筛选了一株甜菜夜蛾细胞系QAU
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Se
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RV(Spodoptera exigua cell line QAU
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Se
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RV)，保藏号为：CCTCC NO:C2022345；保存时间为：2022年12月2日；保存单位是：中国典型培养物保藏中心。
[0018]细胞系Se
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RV的细胞形态均为圆形，细胞直径为15.46
±
1.37μm；Se
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RV细胞COⅠ基因片段序列分析与甜菜夜蛾CoⅠ基因片段序列的一致性为100％，该细胞系为甜菜夜蛾细胞系；该细胞系被苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)侵染后细胞发生凋亡现象，病毒产量显著降低；该细胞系对甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeMNPV)高度不敏感，接种SeMNPV后未发现细胞出现典型的病毒感染症状，细胞系Se
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RV在细胞凋亡机制研究和宿主昆虫抗病毒机制研究等方面具有良好的应用前景。
[0019]下面结合具体实施例对本专利技术进行详细的描述。
[0020]实施例1细胞系Se
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RV的克隆及其鉴定
[0021]1.1细胞系Se
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RV的克隆
[0022]在建立的甜菜夜蛾细胞系Se
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1(Su R,Zheng G,Wan F,Li C.Establishment and characterization of three embryonic cell lines of beet armyworm,Spodoptera exigua(Lepidoptera:Noctuidae).Cytotechnology.2016,68(4):1223
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1232)的基础上，选取传代21次的状态良好的对数生长期细胞，稀释至一定的浓度接种于6孔培养板中，待细胞贴壁后在显微镜下观察，用记本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种昆虫细胞系，其特征在于，所述的昆虫细胞系的保藏编号为CCTCCNO:C2022345。2.如权利要求1所述的昆虫细胞系，其特征在于，所述的昆虫细胞系的线粒体细胞色素氧化酶I亚基基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1。3.如权利要求1所述的昆虫细胞系，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李长友，王明慧，丁雪萌，荆兆昊，李洁，于乾龙，张彬，郑桂玲，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
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