一种具有黏附增强作用的阴离子肽制造技术

本发明专利技术公开了一种具有黏附增强作用的阴离子肽。所述的阴离子肽中连续的天冬氨酸和谷氨酸交替出现的串联重复序列可通过共价键和静电相互作用与阳离子黏附肽发生共聚作用以增强内聚力，缩短固化时间。本发明专利技术具有黏附增强作用的阴离子肽可以增强阳离子黏附肽的微观及宏观黏附力以及吸附量，可应用于生物制造和生物医药等领域。和生物医药等领域。和生物医药等领域。

【技术实现步骤摘要】
一种具有黏附增强作用的阴离子肽


[0001]本专利技术属于仿生黏附
，具体涉及一种具有黏附增强作用的阴离子肽。

技术介绍

[0002]沙堡蠕虫分泌的一种防水蛋白(PC)是带相反电荷的聚电解质，其中聚阴离子肽与聚阳离子肽之间可以通过静电相互作用以及共价键等相互作用增加PC的内聚力，缩短固化时间，同时PC中的L
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3,4
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二羟基苯丙氨酸(Dopa)可以起到增强黏附力的效果。
[0003]结合文献调研发现无论是表达还是合成的黏附材料其微观黏附力不是特别强，在原子力显微镜(AFM)实验中发现针尖为半径为5μm的玻璃珠的胶体探针对贻贝黏附蛋白5(Mfp5)寡聚体的串联多肽最大黏附力为201
±
36nN/μm。受贻贝黏附蛋白3(Mfp3)启发的短模型肽以及Mfp3变体蛋白的微观黏附力分别为5.17～12.85mN/m以及37.68～95.53mN/m。通过氨丙基三乙氧基硅烷和戊二醛将待测物质与胶体探针结合发现大肠杆菌表达的白脊藤壶cp19k对云母基底的黏附力可以达到0.88
±
0.24mJ/m2，Cell
‑
Tak对其表面黏附力可达到1.54
±
0.59mJ/m2。因此，通过分析Mfp的序列特点，重新设计黏附力更强的多肽复合物，是本领域技术人员需要解决的一个难题。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种具有黏附增强作用的阴离子肽。
[0005]一种具有黏附增强作用的阴离子肽，其氨基酸序列为Dopa
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Dopa
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Dopa，所述Dopa为L
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3,4
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二羟基苯丙氨酸。所述阴离子肽为南京肽谷生物科技有限公司制备，CAS:TG
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LG
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11912。
[0006]所述的阴离子肽中连续的天冬氨酸和谷氨酸交替出现的串联重复序列可通过共价键和静电相互作用与阳离子黏附肽发生共聚作用以增强内聚力，缩短固化时间。
[0007]所述阳离子黏附肽，由南京肽谷生物科技有限公司制备，CAS:TG
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11810；其氨基酸序列为：K
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Y
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Y；所述具有黏附增强作用的阴离子肽与具有黏附特性的阳离子肽组合使用可提高黏附强度和吸附量。
[0008]优选的，具有黏附增强作用的阴离子肽与阳离子黏附肽的比例为1:1时黏附力最大。
[0009]所述具有黏附增强作用的阴离子肽在制备医用粘胶方面的应用。
[0010]所述具有黏附增强作用的阴离子肽在制备生物芯片方面的应用。
[0011]本专利技术的有益效果：本专利技术具有黏附增强作用的阴离子肽可以增强阳离子黏附肽的微观及宏观黏附力以及吸附量。本专利技术具有上述特性的仿生黏附剂可应用于生物制造和生物医药等领域。
附图说明
[0012]图1为不同固化时间的阳离子黏附肽、具有黏附增强作用的阴离子肽以及二者按不同比例混合的黏附压强分析。
[0013]图2为阳离子黏附肽、具有黏附增强作用的阴离子肽以及二者按1:1比例混合的原子力谱。
[0014]图3为阳离子黏附肽以及具有黏附增强作用的阴离子肽的吸附量分析。
具体实施方式
[0015]为了便于理解本专利技术，下面将对本专利技术进行更全面的描述。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。
[0016]实施例1：具有黏附增强作用的阴离子肽对阳离子黏附肽剪切压强的增强效果分析
[0017]1、分别将具有黏附增强作用的阴离子肽(南京肽谷生物科技有限公司，CAS:TG
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LG
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11912)和阳离子黏附肽(南京肽谷生物科技有限公司，CAS:TG
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LG
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11810)的样品用超纯水配制成质量浓度5％的多肽溶液。
[0018]2、对于单一样品黏附压强的分析，在1cm
×
1.5cm的玻璃片表面滴加1.4μl多肽溶液，取另一片同样大小的玻璃片迅速覆盖并用夹子固定，分别固化0.5h、6h以及24h。对于具有黏附增强作用的阴离子肽与阳离子黏附肽的相互作用分析，在1cm
×
1.5cm的玻璃片表面分别滴加总体积为1.4μl的多肽溶液，并确保阴离子与阳离子黏附肽的比例分别为1:2、1:1以及2:1，迅速将两片玻璃覆盖到一起，分别固化0.5h、6h以及24h。
[0019]3、通过拉力强度试验机对固化后多肽的剪切压强进行测定，结果表明阴离子肽对阳离子黏附肽的黏附力具有明显的增强效果，且二者比例为1:1时黏附增强效果最明显(图1)。
[0020]实施例2：阴阳离子肽吸附量的分析
[0021]样品准备：
[0022]1、配制pH6.0的PBS缓冲液，高压灭菌。
[0023]2、将两种样品用PBS配制成1mg/ml浓度的多肽溶液，4℃保存。
[0024]测量步骤：
[0025]1、将进样管放入超纯水中，打开蠕动本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有黏附增强作用的阴离子肽，其特征在于，其氨基酸序列为Dopa
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Dopa
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【专利技术属性】
技术研发人员：徐东刚，张超，安文政，付文亮，刘青，邢微微，蔡贵玲，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：