具有缓解溃疡性结肠炎功效的长双歧杆菌050101及其应用制造技术

本发明专利技术公开了具有缓解溃疡性结肠炎功效的长双歧杆菌050101及其应用。长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)050101，保藏编号为GDMCCNo：62550。采用本发明专利技术所提供的长双歧杆菌050101，能够显著降低DSS诱导结肠炎期间小鼠的疾病活动指数，减轻体重的减少和结肠的缩短。(2)结肠组织病理组织切片观察结果表明，造模组小鼠肌层及绒毛结构发生破坏，而长双歧杆菌050101干预组小鼠的肌层结构完整，绒毛整齐。(3)长双歧杆菌050101干预显著降低了结肠组织中促炎细胞因子IL

【技术实现步骤摘要】
具有缓解溃疡性结肠炎功效的长双歧杆菌050101及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及具有缓解溃疡性结肠炎功效的长双歧杆菌050101及其应用。

技术介绍

[0002]溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)是一类典型的肠道屏障功能异常的疾病，UC患者的临床症状表现为结肠、直肠甚至是回肠受损，具有非特异性、非感染性的特点。
[0003]临床上对UC的治疗方法主要取决于疾病的严重程度及其随时间的演变。对于非重度UC患者，一般使用5
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氨基水杨酸缓解病情，根据治疗效果再选择皮质类固醇类药物、硫嘌呤或者使用肿瘤坏死因子疗法、维多珠单抗、优特克单抗、托法替尼、他克莫司和环孢素等高级疗法。对于急性重症UC患者，目前尚无根治性、特异性的治疗手段。急性重症UC患者的治疗一般需要先经过医院专家会诊断，根据疾病严重程度选择保守治疗或者手术。当使用药物保守治疗效果不佳时，患者需要进行结肠切除术，但手术可能会带来一系列的不良反应，例如肠道功能性障碍、肿瘤、代谢异常等并发症。目前，临床上采用的治疗策略主要坚持保守治疗原则，遵从医嘱服药，尽最大可能减少治疗引起的负面作用。
[0004]根据目前UC治疗存在的治疗效果不佳、术后并发症风险及治疗针对性差的问题，寻找应用更广泛、潜力更巨大，同时又具有缓解结肠炎作用的膳食补充剂至关重要。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一株长双歧杆菌050101及其在制备预防和/或治疗结肠炎的产品中的应用，所述长双歧杆菌050101能够有效改善肠道屏障，缓解结肠炎。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：
[0007]本专利技术的第一个目的是提供一株长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)050101，其于2022年6月17日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为GDMCC No：62550。
[0008]本专利技术的第二个目的是提供上述长双歧杆菌050101在制备预防和/或治疗结肠炎的产品中的应用。
[0009]本专利技术的第三个目的是提供一种预防和/或治疗结肠炎的产品，其含有上述长双歧杆菌050101作为活性成分。
[0010]所述的预防和/或治疗结肠炎的产品可以是预防和/或治疗结肠炎的药物、食品或保健品。
[0011]在本专利技术的一种实施方式中，所述结肠炎是溃疡性结肠炎。
[0012]在本专利技术的一种实施方式中，所述的产品中长双歧杆菌050101的活菌数为不低于1
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CFU/mL。
[0013]在本专利技术的一种实施方式中，所述的长双歧杆菌050101是将长双歧杆菌050101种子液按2～4％(v/v)的接种量接种到TPY液体培养基中进行培养，培养条件为：37℃厌氧培
养36h，4000rpm离心30min，收集菌泥，用生理盐水清洗2次后重悬。
[0014]在本专利技术的一种实施方式中，所述TPY液体培养基是加了维生素K和氯化血红素的TPY液体培养基。
[0015]在本专利技术的一种实施方式中，所述维生素K、氯化血红素是以质量分数0.1％的维生素K1溶液和5mg/mL氯化血红素，其添加量均为0.1％(按体积比)。
[0016]本专利技术的第四个目的是提供特异识别长双歧杆菌050101的靶标核苷酸序列，其如SEQ ID No.1所示。该靶标的特征在于其按实施方案操作，能特异区分该菌株与其它双歧杆菌分离株。
[0017]本专利技术的第五个目的是提供鉴别长双歧杆菌050101的引物组，具体为：5'
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AGCTCAAAGATGAGTCCGACA
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3'和5'
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GTCCCGGAGAATAAAGCAATC
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3'。
[0018]本专利技术的第六个目的是提供一种鉴别长双歧杆菌050101的方法，是以上述引物组作为扩增引物对待测菌进行PCR反应扩增，如果扩增出1253bp的产物，则为长双歧杆菌050101，如果没有扩增出1253bp的产物，则不是长双歧杆菌050101。
[0019]本专利技术的第七个目的是提供上述长双歧杆菌050101在产硫氧还蛋白还原酶中的应用，所述的硫氧还蛋白还原酶的氨基酸序列为：
[0020]MFHVKHNVIIIGSGPAGYTAAIYLGRAGLNPVMVTGALSPGGQLVNTTEVENFPGFPEGILGPDLMDRMKEQAKRFGTTYITDDVSSIEACESDSVKPTYRVTLSDDSQLEASSLIIATGSSFRKLGVPGEQELSGHGVSYCATCDGFFFRNKPIVVVGGGDSAFEEALFLTRFGSSVTLIHRRDSFRASQIMVDRAKANPTITLLTNTVVTSITGTSSPTQNTGAPIAIPGLTIKRPAVAPASVSSIAVRNVVTGEESTLDTNAVFVAIGHTPATDFAAGVVDRDDDGYVVVQGASTVTSAPGIFAAGDCVDRTYRQAISAAGMGCRAALDTQAYLTD。
[0021]本专利技术与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0022]1、本专利技术所提供的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)050101分离自粪菌移植健康供体粪便样本，为人体来源的优良菌株。
[0023]2、本专利技术所提供的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)050101具有良好的缓解结肠炎的作用，具体表现为：
[0024](1)采用本专利技术所提供的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)050101，能够显著降低DSS诱导结肠炎期间小鼠的疾病活动指数，减轻体重的减少和结肠的缩短。
[0025](2)结肠组织病理组织切片观察结果表明，造模组小鼠肌层及绒毛结构发生破坏，而长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)050101干预组小鼠的肌层结构完整，绒毛整齐。
[0026](3)长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)050101干预显著降低了结肠组织中促炎细胞因子IL
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1β和IL
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6的含量。
[0027]3、本专利技术所提供的检测方法所需时间短，只需将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳即可准确知道样品中是否有长双歧杆菌050101菌株，降低了检测成本；本专利技术是基于全基因组测序数据，通过泛基因分析得到的长双歧杆菌050101的菌株特异性靶标，检测结果更为可靠；同时本专利技术是针对长双歧杆菌050101的特异性检测靶标，能将菌株长双歧杆菌050101从双歧杆菌属中区分出来，是一种新的检测方法。
[0028]Bifidobacterium longum 050101于2022年6月17日保本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)050101，保藏编号为GDMCC No：62550。2.权利要求1所述的长双歧杆菌050101在制备预防和/或治疗结肠炎的产品中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述结肠炎是溃疡性结肠炎。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的预防和/或治疗结肠炎的产品是预防和/或治疗结肠炎的药物、食品或保健品。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，优选的，所述的产品中长双歧杆菌050101的活菌数为不低于1
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CFU/mL；优选的，所述的长双歧杆菌050101是将长双歧杆菌050101种子液按2～4％(v/v)的接种量接种到TPY液体培养基中进行培养，培养条件为：37℃厌氧培养36h，4000rpm离心30min，收集菌泥，用生理盐水清洗2次后重悬；优选的，所述TPY液体培养基是加了维生素K和氯化血红素的TPY液体培养基；优选的，所述维生素K、氯化血红素是以质量分数0.1％的维生素K1溶液和5mg/mL氯化血红素，其添加量均按体积比为0.1％。6.一种预防和/或治疗结肠炎的产品，其特征在于，含有权利要求1所述的长双歧杆菌050101作为活性成分。7.特异识别权利要求1所述的长双歧杆菌050101的靶标核苷酸序列，其特征在于，如SEQ ID No.1所示。8.一种鉴别权利要求1所述的长双歧杆菌050101的引物组，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢新强，杜明珠，蔡淑珍，柏建玲，张菊梅，吴清平，杨双红，李滢，赵辉，李芬发，梁婷婷，蒋同，杨娟，李龙岩，吴磊，
申请(专利权)人：广东环凯生物科技有限公司广东科环生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：