本发明专利技术涉及烟草病害防治方法领域,具体公开了一种兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法,包括在烟草成苗期喷施一次生防菌剂,大田移栽后15
【技术实现步骤摘要】
一种兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法
[0001]本专利技术涉及烟草病害防治方法领域,具体涉及一种兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法。
技术介绍
[0002]烟草是一年生或有限多年生草本,是茄科烟草属植物,全体被腺毛,根粗壮,茎高0.7
‑
2米,基部稍木质化。
[0003]烟草角斑病是由丁香假单胞菌烟草致病变种侵染所引起的、发生在烟草上的病害。烟草角斑病在烟草各生育期均可发生,以大田生育中后期发生较多。烟株的叶、茎、花、蒴果等部位均可感病,以叶部为主。
[0004]烟草角斑病常和烟草野火病同时发生,有时难以区别是哪一种病为害造成的损失。烟草野火病和角斑病均为细菌病害,且为同一个致病种,均能造成严重的区域性经济损失。化学药剂虽然有一定效果,但病原菌容易产生抗药性且易残留,因此,开发新的能够兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法十分必要。
技术实现思路
[0005]为解决上述技术问题,本专利技术提供了一种兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法,本专利技术中的方法能兼防烟草角斑病和烟草野火病。
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法,烟草成苗期喷施一次生防菌剂,大田移栽后15
‑
20天第二次喷施生防菌剂;
[0007]所述生防菌剂由硅藻土、壳聚糖,蔗糖和生防菌培养液;
[0008]所述生防菌培养液由多粘类芽孢杆菌发酵液、短小芽孢杆菌发酵液、侧孢短芽孢杆菌发酵液和荧光假单胞菌发酵液混合而得。
[0009]进一步地,所述硅藻土、壳聚糖和蔗糖占生防菌剂的2
‑
8wt%,所述硅藻土、壳聚糖和蔗糖质量比为1
‑
2:1
‑
2:1;
[0010]所述生防菌剂多粘类芽孢杆菌发酵液、短小芽孢杆菌发酵液、侧孢短芽孢杆菌发酵液、荧光假单胞菌发酵液按照体积比3:1
‑
2:1:2
‑
3。
[0011]进一步地,所述多粘类芽孢杆菌发酵液中的活菌数大于1
ⅹ
108cfu/mL。
[0012]进一步地,所述短小芽孢杆菌发酵液中的活菌数大于1
ⅹ
107cfu/mL。
[0013]进一步地,所述侧孢短芽孢杆菌发酵液中的活菌数大于1
ⅹ
108cfu/mL。
[0014]进一步地,所述荧光假单胞菌发酵液中的活菌数大于1
ⅹ
107cfu/mL。
[0015]进一步地,所述成苗期喷施一次生防菌剂指长出第7片真叶后喷施一次生防菌剂。团棵期后再喷施一次生防菌剂。
[0016]进一步地,烟草成苗期喷施和大田移栽后15
‑
20天喷施生防菌剂的量均为2mL/m2。
[0017]与现有技术相比,本专利技术的有益效果在于:
[0018]1、本专利技术制备的生防菌剂对烟草角斑病和烟草野火病原菌有显著的抑制作用,生
防菌剂原液、10倍稀释液和30倍稀释液对烟草角斑病和烟草野火病病原菌的抑制作用都较高,生防菌剂100稀释液划线后的抑菌带宽度小于1cm,其余均大于1cm,说明本专利技术制备的生防菌剂能够有效抑制烟草角斑病和烟草野火病原菌,生防菌剂原液抑菌效果最好。
[0019]2、本专利技术实施例1制备的生防菌剂对烟草角斑病和烟草野火病的防治效果均在60%以上,说明本专利技术制备的生防菌剂能够兼防烟草角斑病和烟草野火病,且防治效果非常好。
[0020]3、本专利技术实施例1制备的生防菌剂比硫酸链霉素(200mg/kg)对角斑病和野火病的防治效果均高出50%以上,比12%绿乳铜乳油600倍液对角斑病和野火病的防治效果均高出64%以上,本专利技术制备得到的生防菌剂兼防角斑病和野火病的效果均十分显著,有作为烟草种植中防治角斑病和野火病的新型生物农药的潜力,有进一步研究的价值。
具体实施方式
[0021]下面对本专利技术的具体实施方式进行详细描述,但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本专利技术中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本专利技术保护的范围。本专利技术各实施例中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
[0022]实施例1
[0023]本实施例提供一种兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法。
[0024]一、实验材料
[0025]1、菌株
[0026]多粘类芽孢杆菌,购买自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.22073;
[0027]短小芽孢杆菌BY
‑
1购买自中国典型微生物保藏中心,保藏编号为CCTCCM2011329;
[0028]侧孢短芽孢杆菌MES818购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCCNO.16859;
[0029]荧光假单胞菌购买自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.11777;
[0030]病原菌为引起烟草角斑病和烟草野火病的菌株。
[0031](3)培养基:
[0032]LB液体培养基:胰蛋白胨(Tryptone)10g,酵母提取物(Yeast extract)5g,氯化钠(NaCl)10g,去离子水1000mL;
[0033]LB固体培养基:液体培养基加琼脂(Agar)1.5%~2%。
[0034]KB固体培养基:蛋白胨20g,甘油25mL,K2HPO41.5g,MgSO41.5g,琼脂15g,去离子水1000mL;相应的KB液体培养基中去掉琼脂即可。
[0035]二、实验方法1、生防菌剂的制备
[0036](1)多粘类芽孢杆菌发酵液制备将多粘类芽孢杆菌接种于LB固体平板上,然后转接3
‑
4次至出现纯化的单菌落,然后用接种针将单菌落转接到250mL的LB液体培养基中,150rpm 37℃培养36h,然后用移液枪吸取10mL离心获得菌体,然后用无菌生理盐水配制成
OD
600
等于7的菌悬液,然后按照接种量1.5%吸取菌悬液加入LB液体培养基中于150rpm 37℃培养24h获得多粘类芽孢杆菌发酵液。
[0037](2)短小芽孢杆菌发酵液制备
[0038]将短小芽孢杆菌接种于LB固体平板上,然后转接3
‑
4次至出现纯化的单菌落,然后用接种针将单菌落转接到250mL的LB液体培养基中,150rpm 37℃培养36h,然后用移液枪吸取10mL离心获得菌体,然后用无菌生理盐水配制成OD
600
等于7的菌悬液,然后按照接种量1.5%吸取菌悬液加入LB液体培养基中于150rpm 37℃培养24h获得短小芽孢杆菌发酵液。
[0039](3)侧孢短芽孢杆菌发酵液本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种兼防烟草角斑病和烟草野火病的生物防治方法,其特征在于,烟草成苗期喷施一次生防菌剂,大田移栽后15
‑
20天第二次喷施生防菌剂;所述生防菌剂由硅藻土、壳聚糖,蔗糖和生防菌培养液;所述生防菌培养液由多粘类芽孢杆菌发酵液、短小芽孢杆菌发酵液、侧孢短芽孢杆菌发酵液和荧光假单胞菌发酵液混合而得。2.根据权利要求1所述的生物防治方法,其特征在于,所述硅藻土、壳聚糖和蔗糖占生防菌剂的2
‑
8wt%,所述硅藻土、壳聚糖和蔗糖质量比为1
‑
2:1
‑
2:1;所述生防菌剂多粘类芽孢杆菌发酵液、短小芽孢杆菌发酵液、侧孢短芽孢杆菌发酵液、荧光假单胞菌发酵液按照体积比3:1
‑
2:1:2
‑
3。3.根据权利要求2所述的生物防治方法,其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员:马欣,刘刚,寇宝实,李继博,彭超,
申请(专利权)人:中国烟草总公司辽宁省公司,
类型:发明
国别省市:
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