S-亚硝基化谷胱甘肽还原酶抑制剂在改善肺纤维化血管新生中的应用制造技术

本申请公开了S

【技术实现步骤摘要】
S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶抑制剂在改善肺纤维化血管新生中的应用


[0001]本申请涉及肺纤维化
，尤其是涉及S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶抑制剂在改善肺纤维化血管新生中的应用。

技术介绍

[0002]特发性肺纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis，IPF)是一种慢性致死性疾病，其特征是进行性的成纤维细胞增殖、肺组织中广泛沉积的细胞外基质(Extracelluar Matrix，ECM)、肺泡结构破坏以及肺功能持续下降，最终导致呼吸衰竭和死亡。IPF的发病机制是多方面的，包括炎症反应、血管新生与重塑、氧化应激、纤维蛋白溶解障碍、基质金属蛋白酶等，目前尚不完全清楚。
[0003]其中，血管新生是指新的微血管网络的形成，在人体内主要通过血管生成来实现，实际上是沿着血管排列的血管内皮细胞增殖，从现有血管系统中生长出新的毛细血管的过程，也是生长、组织损伤、修复和愈合过程中的重要生理过程。血管新生在癌症、糖尿病视网膜病变、类风湿性关节炎和动脉粥样硬化等疾病的发病机制中都具有重要作用。而随着对肺纤维化研究的不断深入，血管新生与重塑在肺纤维化发生中的作用也日益得到重视，被认为是其中的一个关键环节。为了了解血管完整性和修复的过程，有必要确定IPF中与血管生成相关的因素。
[0004]正常生理条件下的肺中，血管生成和血管抑制因子通过两者的平衡调节血管内稳态。尽管早期的研究表明IPF与血管生成增加有关，但最近研究显示IPF成纤维细胞灶中血管新生减少(Renzoni EA,et al.,Am J Respir Crit Care Med.2003；167(3):438
‑
43.；Cosgrove GP,et al.,Am J Respir Crit Care Med.2004；170(3):242
‑
51.)，同时血管生成抑制因子(血管内皮素)的表达水平上调(Sumi M,et al.,J Clin Lab Anal.2005；19(4):146
‑
9.)；另外，在对LTBP4的研究中发现，其可能通过减少血管生成导致肺泡间隔缺损，从而影响肺纤维化(Bultmann
‑
Mellin I,et al.,Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol.2017；313,L687
‑
L698.)；而VEGF还可以通过保护内皮细胞、促进血管生成等途径，修复肺组织的损伤和减少肺纤维化的形成(Derseh,et al.,Sci Rep.2009；9(1):19893)；以上证据支持肺纤维化血管新生过少的观点。所以，血管新生可能是肺纤维化的重要靶点，有必要开发能够改善血管新生的产品，以探讨肺纤维化的治疗策略。
[0005]S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶(S
‑
nitrosoglutathione reductase，GSNOR)是细胞内S
‑
亚硝基化谷胱甘肽(GSNO)的还原酶，是最主要的去S
‑
亚硝基化酶。蛋白质S
‑
亚硝基化，即一氧化氮(NO)对半胱氨酸的氧化修饰，形成蛋白质S
‑
亚硝基硫醇(SNO)，介导NO对细胞功能的调控。GSNOR在调节平滑肌松弛、免疫功能、炎症、神经元发育以及癌症发生中都起到重要的作用，但并无GSNOR与肺纤维化的血管新生关系的报导。

技术实现思路

[0006]本申请旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本申请提出一种S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶抑制剂在改善肺纤维化血管新生中的应用，利用GSNOR抑制剂可以有效改善肺纤维化的血管新生。
[0007]本申请的第一方面，提供以下a1～a3中至少一种物质在制备改善肺纤维化的血管新生的产品中的应用：
[0008]a1.S
‑
亚硝基化谷胱甘肽；
[0009]a2.S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的抑制剂；
[0010]a3.a1～a2中任一种在药学上可接受的盐。
[0011]根据本申请实施例的应用，至少具有如下有益效果：
[0012]实验过程中发现，抑制去S
‑
亚硝基化可作为改善特发性肺纤维化的血管新生的靶点，通过提供GSNOR抑制剂和/或外源性的GSNO可以有效增加肺纤维化小鼠模型的肺组织中的血管密度，促进血管新生；同时在体外对于细胞也表现出良好的成血管能力。
[0013]其中，S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的抑制剂是指能够抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的表达和/或降低S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的酶活的物质。
[0014]在本申请的一些实施方式中，抑制剂选自以下b1～b5中任一种：
[0015]b1.特异性编辑S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶基因的物质；
[0016]b2.特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的mRNA水平的物质；
[0017]b3.特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的表达水平的物质；
[0018]b4.特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶活性的物质；
[0019]b5.包含b1～b4中任一种的载体。
[0020]特异性编辑S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶基因的物质可以通过对基因的敲除、置换、同源重组等方式实现编辑，从而控制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的表达。在本申请的一些实施方式中，特异性编辑S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶基因的物质为CRISPR/Cas、锌指核糖核酸酶ZFN、转录激活因子样效应物核酸酶TALEN、Cre
‑
LoxP重组酶中的至少一种。
[0021]以CRISPR/Cas为例，该系统通常包含CRISPR序列和CRISPR相关核酸酶，其中CRISPR序列一般包括间隔序列和重复序列，而CRISPR相关核酸酶选自Cas(如Cas1、Cas2、Cas3、Cas4、Cas5、Cas6、Cas7、Cas8、Cas9、Cas10、Cas12a～i、Cas13a～d、Cas14a～c)、Csa(Csa1～5)、Csb(Csb1～3)、Csc(Csc1～2)、Cse(Cse1～2)、Csf(Csf1～4)、Csm(Csm1～6)、Csn、Csx(Csx1～20)、Csy(Csy1～3)、Cmr(Cmr1～6)中的至少一种。
[0022]特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的mRNA水平的物质可以通过控制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的基因的沉默，从而抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的表达。在本申请的一些实施方式中，特异性抑制S...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.以下a1～a3中至少一种物质在制备改善肺纤维化的血管新生的产品中的应用：a1.S
‑
亚硝基化谷胱甘肽；a2.S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的抑制剂；a3.a1～a2中任一种在药学上可接受的盐。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑制剂选自以下b1～b5中任一种：b1.特异性编辑S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶基因的物质；b2.特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的mRNA水平的物质；b3.特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的表达水平的物质；b4.特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的活性的物质；b5.包含b1～b4中任一种的载体。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述特异性编辑S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶基因的物质为CRISPR/Cas、ZFN、TALEN、Cre
‑
LoxP中的至少一种。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的mRNA水平的物质选自反义核酸序列、siRNA、shRNA、dsRNA、miRNA中的至少一种。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述特异性抑制S
‑
亚硝基化谷胱甘肽还原酶的mRNA水平的物质为siRNA，所述siRNA选自siRNA GSNOR1、siRNA GS...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟舒，宋志敏，张芸，王耀锋，陈静静，张廷虹，许梦珠，
申请(专利权)人：广州国家实验室，
类型：发明
国别省市：