肠道菌群改善用组合物制造技术

本发明专利技术解决了提供含有具有改善肠道菌群的功能的黏膜乳杆菌作为活性成分的食品组合物的问题。本发明专利技术的另一方面解决了提供含有黏膜乳杆菌作为活性成分的人肠道内双歧杆菌的比例的增加剂和双歧杆菌增殖促进剂的课题。本发明专利技术提供了肠道菌群改善用组合物，所述组合物含有黏膜乳杆菌的细菌细胞或培养物作为其活性成分。本发明专利技术的另一方面提供了含有黏膜乳杆菌作为活性成分的人肠道内双歧杆菌的比例的增加剂和双歧杆菌增殖促进剂。增加剂和双歧杆菌增殖促进剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肠道菌群改善用组合物


[0001]本专利技术涉及含有黏膜乳杆菌(Lactobacillus mucosae)作为其活性成分的肠道细菌改善用食品组合物、以及适用于改善肠道菌群的食品组合物的评价方法。
[0002]本专利技术进一步涉及分别含有黏膜乳杆菌作为其活性成分的人肠道内双歧杆菌的比例的增加剂以及增加促进用饮食品。本专利技术进一步涉及分别含有黏膜乳杆菌作为其活性成分的双歧杆菌增殖促进剂以及双歧杆菌增殖促进用饮食品。

技术介绍

[0003]多达1,000种的40万亿细菌定殖在人肠道内并与彼此形成复杂的共生关系(肠道菌群)。由于组学分析的进步，发现健康状况、衰老、饮食、以及生活习惯影响肠道菌群，此外，肠道菌群内的平衡(肠道细菌的多样性)的紊乱导致疾病的发作或恶化。已证实肠道细菌的多样性在肥胖患者和糖尿病患者中降低，并且膳食纤维的摄取导致肠道细菌的多样性的增加，从而改善相关临床症状。
[0004]关于作为肠道细菌的主要代谢产物的短链脂肪酸，已报道了各种健康功能效果，并且也已提出它们与肠道细菌的多样性的关系。短链脂肪酸是指以乙酸、丙酸、和丁酸为代表的各自的碳数为6以下的脂肪酸。这些酸不仅通过使肠道内的pH为酸性而抑制病原微生物的生长，还激活肠上皮细胞，从而复杂地参与宿主的生物防御和免疫系统的控制。也已报道由产生促进肠蠕动的代谢产物的肠道细菌、和涉及维持肠粘膜的内稳态的肠道细菌等利用的这些短链脂肪酸。增加构成肠道菌群的肠道细菌的多样性和增加肠道菌群中短链脂肪酸的方法的实例主要包括摄取促进肠道细菌的生长及其代谢产物的生产的食品用组合物(益生元(prebiotic))、和直接摄取含有乳酸菌或双歧杆菌的食品用组合物(益生菌(probiotic))。
[0005]含有各种肠道细菌的人肠道菌群显著不同于例如具有乳杆菌属(Lactobacillus)作为其肠道内主要细菌的小鼠等模型动物的肠道菌群。已知，关于人类，个体之间的肠道菌群不同，此外，与其它国家的人的肠道菌群相比，日本人的肠道菌群是独特的(非专利文献1)。在目前不存在用于标准化个体和种族间肠道菌群的多样性的模型评价系统的情况下，极其难以选择增加构成肠道菌群的肠道细菌的多样性和增加肠道菌群中短链脂肪酸的食品组合物。
[0006]已报道通过从肠道菌群提取多种肠道细菌并人工重构肠道菌群以各自促进标准化的多种体外评价系统(非专利文献2和非专利文献3)，同时未报道人工重构的日本人的肠道菌群。不存在出于选择增加构成肠道菌群的肠道细菌的多样性和增加肠道菌群中短链脂肪酸的食品组合物的目的而构建的评价系统。
[0007]非专利文献1报道了作为通过日本人的肠道菌群的宏基因组分析来说明日本人的肠道菌群的特征的结果的日本人的肠道菌群中为主要的50种肠道细菌，还报道了与11个其它国家的外国人受试者的肠道菌群相比，日本人的肠道菌群最丰富地包含布劳特氏菌属(Blautia)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、柯林斯菌属(Collinsella)、和链球菌属
(Streptococcu)。上述50种不包括变形菌门(Proteobacteria)和乳杆菌属，发现这些肠道细菌不是在日本人的肠道内为主要的肠道细菌。从非专利文献1中收集的106人的宏基因组数据进一步发现，关于日本人的肠道菌群中的分类学比例，分别含有以菌种计为约57％、约24％、和约19％的属于厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、和拟杆菌门(Bacteriodetes)的肠道细菌。然而，尚未培养在日本人的肠道菌群中为主要的肠道细菌，并且未研究过能够培养的其组合及其培养方法。
[0008]关于要选择的菌种数，非专利文献2报道了作为肠道菌群的最小单元模型的称为AlteredSchaedler Flora(ASF)的8种肠道细菌的组合。非专利文献3报道了作为具有欧洲人的肠道菌群的特征的模型的15种肠道细菌的群体。然而，该群体包含在日本人的肠道菌群中不为主要的肠道细菌，并且不包含也是日本人的肠道菌群的特征的双歧杆菌属。
[0009]与乳酸菌和双歧杆菌相比，肠道细菌具有高厌氧要求性，极其难以培养。因此，通常使用与各肠道细菌的特征匹配的培养基培养各肠道细菌。非专利文献4报道了已报道在欧洲人的肠道菌群中占优势的多种肠道细菌能够使用培养基(来自Nissui Pharmaceutical Co.,Ltd.的GAM肉汤培养基)来培养。然而，如上所述，肠道内的主要细菌在欧洲人和日本人之间显著不同，因此，不可预期使用如上所述的上述培养基使日本人的优势肠道细菌稳定生长。此外，尽管将通过各个菌种产生的短链脂肪酸的量相比较，短链脂肪酸的所述量仅由单一肠道细菌产生，并且作为整个菌群的短链脂肪酸的生产量不明。
[0010]专利文献1报道了肠道菌群模拟培养方法和培养装置，能够在几乎维持肠道菌群的组成平衡的情况下进行培养。非专利文献5使用与上述类似的方法和装置体外评价膳食纤维增加肠道菌群中的短链脂肪酸。使用粪便作为评价的培养物被描述为专利文献1和非专利文献5二者中的特征，而人的肠道菌群在个体之间不同，并且当使用人来源的粪便时，评价受到提供粪便的个体之间的肠道菌群的差异的影响。因此，基于使用粪便来选择增加构成肠道菌群的肠道细菌的多样性和增加肠道菌群中的短链脂肪酸的食品组合物受到限制，从而需要构建不使用粪便的评价系统。还需要促进肠道菌群的多样性的增加和短链脂肪酸的生产的增加的肠道菌群改善用组合物。
[0011]已报道肠道菌群中菌种的平衡取决于健康状况和年龄而变化，并且肠道细菌的双歧杆菌和乳酸菌的比例也降低。作为减少的双歧杆菌和乳酸菌的补充方法，摄取含有这些细菌的发酵乳制品是一种解决方法。
[0012]发酵乳制品中使用的乳酸菌的典型种的实例包括属于乳杆菌属的乳酸菌。通常使用的菌种的实例包括德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactbacillus delbrueckii,subsp.bulgaricus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、和瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)。另一方面，不经常使用或利用的菌种的实例包括黏膜乳杆菌。
[0013]专利文献2列出了作为用于改善乳糖不耐症的乳酸菌之一的黏膜乳杆菌。专利文献2中的黏膜乳杆菌的特征在于其高黏蛋白粘附能力及其高乳糖分解能力，而未描述其对于人肠道内双歧杆菌的比例的作用以及其对于双歧杆菌的体外增殖的作用。
[0014]由于乳糖促进双歧杆菌的增殖，也可以认为摄取具有高乳糖分解能力的黏膜乳杆菌，可以降低人肠道内双歧杆菌的比例并且可以阻碍双歧杆菌的增殖。
[0015]非专利文献6和7表明由猪来源分离的黏膜乳杆菌LM1，该细菌具有高黏蛋白粘附
能力并抑制任何病原菌粘附至肠粘膜。然而，非专利文献6和7二者均未表明黏膜乳杆菌LM1对双歧杆菌的作用。
[0016]非专利文献本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种肠道菌群改善用组合物，所述组合物包含黏膜乳杆菌的细菌细胞或培养物作为其活性成分。2.一种肠道菌群改善用饮食品，所述饮食品包含黏膜乳杆菌的细菌细胞或培养物作为其活性成分。3.一种短链脂肪酸增加促进用组合物，所述组合物包含黏膜乳杆菌的细菌细胞或培养物作为其活性成分。4.一种短链脂肪酸增加促进用饮食品，所述饮食品包含黏膜乳杆菌的细菌细胞或培养物作为其活性成分。5.一种肠道细菌的多样性增加促进用组合物，所述组合物包含黏膜乳杆菌的细菌细胞或培养物作为其活性成分。6.一种肠道细菌的多样性增加促进用饮食品，所述饮食品包含黏膜乳杆菌的细菌细胞或培养物作为其活性成分。7.一种人肠道菌群模型，其用于评价目标食品组合物的人肠道内短链脂肪酸增加促进作用和/或多样性增加促进作用，所述人肠道菌群模型包含评价用培养物，所述评价用培养物包括不包含属于变形菌门和乳杆菌属的细菌，并包含属于双歧杆菌属的细菌的至少九菌种以上的细菌。8.根据权利要求7所述的人肠道菌群模型，其中所述九菌种以上的细菌是属于厚壁菌门、放线菌门、或拟杆菌门的细菌，并包含属于布劳特氏菌属、柯林斯菌属、或链球菌属的细菌。9.根据权利要求8所述的人肠道菌群模型，其包含：以菌种数计为56至59％的属于厚壁菌门的细菌；以菌种数计为21至24％的属于放线菌门的细菌；和以菌种数计为17至22％的属于拟杆菌门的细菌。10.根据权利要求7至9中任一项所述的人肠道菌群模型，其中所述至少九菌种以上的细菌选自由以下组成的组：韦氏布劳特氏菌、长双歧杆菌、假小链双歧杆菌、直肠真杆菌、青春双歧杆菌、产气柯林斯菌、单形拟杆菌、长链多尔氏菌、普通拟杆菌、活泼瘤胃球菌、普氏栖粪杆菌、狄氏副拟杆菌、产甲酸多瑞亚菌、卵形瘤胃球菌、扭链瘤胃球菌、多氏拟杆菌、普氏梭杆菌、粪副拟杆菌、食葡糖罗斯拜瑞氏菌、系结梭菌、唾液链球菌、迟缓埃格特菌、鲍氏梭菌、肠道罗斯拜瑞氏菌、陪伴粪球菌、卵形拟杆菌、霍氏真杆菌、人罗斯拜瑞氏菌、和多形拟杆菌。11.根据权利要求7至10中任一项所述的人肠道菌群模型，其中所述至少九菌种以上的细菌是韦氏布劳特氏菌、长双歧杆菌、假小链双歧杆菌、直肠真杆菌、青春双歧杆菌、产气柯林斯菌、单形拟杆菌、长链多尔氏菌、普通拟杆菌、活泼瘤胃球菌、普氏栖粪杆菌、卵形布劳特氏菌、多氏拟杆菌、普氏梭杆菌、唾液链球菌、鲍氏梭菌、和陪伴粪球菌。12.一种人肠道菌群模型的培养方法，所述模型用于评价目标食品组合物的人肠道内短链脂肪酸增加促进作用和/或多样性增加促进作用，所述培养方法包括以下的步骤：(1)将至少九菌种以上的细菌添加至改良GAM肉汤培养基，所述至少九菌种以上的细菌不包含属于变形菌门和乳杆菌属的细菌，并包含属于双歧杆菌属的细菌；和
(2)在厌氧条件下培养所述细菌。13.一种用于评价目标食品组合物的人肠道内短链脂肪酸增加促进作用和/或多样性增加促进作用的方法，所述方法包括以下的步骤：(1)将作为评价目标的食品组合物添加至根据权利要求7至11中任一项所述的人肠道菌群模型进行培养；(2)测定(1)中获得的培养物的短链脂肪酸生产量和/或计算其多样性指数；和(3)在(2)中的测定值和/或计算值与未添加所述食品组合物的情况相比的相对值分别为1.0倍以上的情况下，评价短链脂肪酸增加促进作用和/或多样性增加促进作用存在。14.一种生产肠道菌群改善用饮食品的方法，其中使用在根据权利要求13所述的评价方法中评价为具有短链脂肪酸增加促进作用和/或多样性增加促进作用的食品组合物来生产食品。15.一种属于黏膜乳杆菌的菌株，其中所述菌株选自由以下组成的组：SBT10028株(NITE BP
‑
03275)、SBT10217株(NITE P
‑
03276)、SBT10027株(NITE P
‑
03274)、SBT10038株(NITE P
...

【专利技术属性】
技术研发人员：加田茂树，塚原拓也，木村彰，小川七菜，
申请(专利权)人：雪印惠乳业株式会社，
类型：发明
国别省市：