一种膜联蛋白ANX1和TNF-α纳米抗体联用在制备溃疡性结肠炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种膜联蛋白ANX1和TNF

【技术实现步骤摘要】
一种膜联蛋白ANX1和TNF
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α
纳米抗体联用在制备溃疡性结肠炎药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种膜联蛋白ANX1和TNF
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α纳米抗体联用在制备溃疡性结肠炎药物中的应用。

技术介绍

[0002]溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种易复发的自身免疫性疾病，属于炎症性肠病(Inflammatory bowel disease，IBD)的一种。溃疡性结肠炎在临床上的典型症状表现为血性腹泻、夜间排便、急症和里急后重，在最初的隐匿期后，它表现出粘膜炎症反复发作和缓解的特征。IBD的致病机制尚不明确，遗传、免疫和环境因素，如饮食、压力、吸烟和自由基等，都参与了其发展。
[0003]在世界范围内，UC的发病率呈现出逐年上升的趋势。UC在发达国家中的发病率较高，而在进入21世纪以来，UC发病率在发达国家中已经趋于稳定，而在南美、亚洲、非洲和中东地区的许多新工业化国家中有所上升。在我国溃疡性结肠炎以往非常少见，总体发病率在1.2/10万人/年，但是随着我国经济的发展，溃疡性结肠炎呈现快速上升的趋势。随着UC患病率的上升，整体医疗成本也会上升。因此，开发新型的高效低毒的治疗药物成为需求。
[0004]anti
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TNF
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α纳米抗体药物在20世纪90年代后期开发，在治疗自身免疫性疾病如炎症性肠病，强直性脊柱炎，牛皮癣和类风湿性关节炎方面取得了巨大成功。目前常见的TNF
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α纳米抗体药物包括英夫利昔单抗、阿达木单抗、戈利木单抗、赛妥珠单抗和依那西普。
[0005]虽然TNF
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α纳米抗体药物在自身免疫性疾病中取得了显著的作用，然而，随着上述疾病的高效治疗，关于不良反应的报道正在增加。接受anti
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TNF
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α纳米抗体药物治疗后，IBD，强直性脊柱炎和类风湿性关节炎患者(20％～22％)发生新发的牛皮癣(Puig L等,Dermatology 2012,225(1):14
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17；Gannes G等,Arch.Dermatol.2007,143(2):223
–
231；Ko JM等,J.Dermatol.Treat 2009,,20(2):100
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108)。这种不良反应在应答者而不是无反应者中发展明显，并导致5％至35％的患者停止anti
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TNF
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α治疗(Rahier J等,Clin.Gastroenterol.Hepatol.2010,8(12):1048
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1055；Scaldaferri F等,Gut 2014,63(4):699
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701)。然而，与类风湿性关节炎和IBD患者相比，累积剂量对牛皮癣的发展时间没有影响(Scaldaferri F等,Gut 2014,63(4):699
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701)。此外，一项研究表明，接受anti
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TNF
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α治疗的IBD患者的皮肤病变被Th17细胞浸润(Tillack C等,Gut 2014,63(4):567
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577)。
[0006]Th17细胞是一个T细胞亚群，其特征是产生大量的IL
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17A、IL
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17F、IL
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21和IL
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22。Th17细胞是由IL
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6和TGF
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β共同诱导下分化的，它的扩张是由IL
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23促进的(Caprioli F等,J.Crohn
’
s Colitis 2008,2(4):291
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295)。由Th17细胞产生的IL
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21反过来增加了其IL
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23受体的表达，从而形成了一个正向的自动调节反馈回路增强了Th17细胞的扩张。Th17细胞，特别是其分泌的特征性细胞因子IL
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17A在肠道炎症中的作用已被广泛研究。与正常黏膜相比，IBD患者血清和病变肠黏膜组织中IL
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17A的分泌和mRNA水平显著高于正常人。UC疾病的
严重程度与IL
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17A的表达量呈正相关，这表明肠道中的IL
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17A在促进了IBD患者疾病的发展(Gannes G等,Arch.Dermatol.2007,143(2):223
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231；Cullen G等,Aliment.Pharmacol.Ther.2011,34(11
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12):1318
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1327；.Milanez FM等,Arthritis Res.Therapy 2016,18(1):52)。目前，已经在各种条件和因素下研究了肠道Th17细胞的诱导。有文献表明，抗原特异性Th17分化发生在肠道固有层(LP)中，CD11c+DC细胞可以通过吞噬或胞饮作用处理微生物等抗原，通过MHCII途径刺激TH17的生成，并且这个过程与肠系膜淋巴结和肠相关淋巴组织无关。
[0007]膜联蛋白A1(Annexin A1，ANX1)来源于研究糖皮质激素抑制前列腺素合成的机制的过程，又被称为大皮质激素、肾皮质激素、脂肪调节蛋白和脂皮质素1，其特征是通过影响磷脂酶A2(PLA2)的活性来抑制类二十烷的生成。ANX1是一个由346个氨基酸组成的单体两亲性蛋白，是膜联蛋白超家族中的一种，大小为37kDa。ANX1主要在中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞的亚细胞颗粒中表达，在特定的淋巴细胞亚群中有少量表达。
[0008]现在的证据表明，ANX1通过与甲酰肽受体(Formyl peptide receptor，FPR)的相互作用介导其大部分细胞效应。甲酰肽受体是一个包含七个跨膜结构域的G蛋白偶联受体家族的成员，主要在哺乳动物吞噬性白细胞中表达，它们可以诱导对各种配体的反应，在宿主的防御和炎症方面发挥重要的作用。人体内存在三种FPR受体，即FPR1、FPR2和FPR3，三种FPR具有显著的序列同源性。
[0009]在严重UC患者炎症结肠活检中检测到ANX1的分泌，而在健康人结肠，非UC患者或轻微或中度UC患者结肠的活检中没有检测到。英夫利昔单抗可预防DSS诱导的WT结肠炎的临床症状，但在ANX1
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/
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小鼠中不能(Gaffen SL等,Nat.Rev.Immunol.2009,9(8):556)，这表明TNF
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α纳米抗体药物英夫利昔单抗需要通过内源性ANX1才能发挥急性结肠炎治疗作用。但是，如果ANX1作为外源性的药物使用，其作用于细胞外、而无法进入细胞内部时，ANX1的作用如何，其与TNF
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α纳米抗体药物的作用是怎样的关系。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种膜联蛋白ANX1和TNF
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α纳米抗体联用在制备炎症药物中的应用。2.一种膜联蛋白ANX1和TNF
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α纳米抗体联用在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。3.一种组合药物，其特征在于：所述的组合药物由权利要求1所述的TNF
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α纳米抗体和膜联蛋白ANX1组成。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的膜联蛋白ANX1的氨基酸序列为SEQ ID No.1所示，具有抑制Th17细胞分化和治疗溃疡性结肠炎的能力。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的膜联蛋白ANX1具有抑制Th17细胞分化的能力。6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的膜联蛋白ANX1通过FPR2
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STAT3通路抑制TNF
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α纳米抗体处理引起Th17细胞分化。7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的TNF
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α纳米抗体具有如下氨基酸序列：(1)由SEQ ID No.2或3或4所示的氨基酸序列组成的蛋白质；或(2)与序列SEQ ID No.2或3或4限定的氨基酸序列同源性在80％至100％编码相同功能蛋白质的氨基酸序列；或(3)SEQ ID No.2或3或4所示的氨基酸序列经增加、缺失或替换一个或多个氨基酸具有同等活性的由(1)衍生的蛋白。所述的TNF
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α纳米抗体与TNF
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α抗原/抗体复合物促进巨噬细胞的吞噬能力和抗原递呈特征、并与Th17细胞分化相关。8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的TNF
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α纳米抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：华子春，刘兴，周露露，
申请(专利权)人：南京吉芮康生物科技研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：