一株副干酪乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613及其应用。该菌株是从贵州省黎平县果利寨采集的酸菜中分离筛选获得，在MRS琼脂培养基上生长良好，没有溶血现象，对多种抗生素敏感，对酸、胆盐、人工胃液、人工肠液有较好的耐受能力，对人结肠癌细胞HT

【技术实现步骤摘要】
一株副干酪乳杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株具有较强抑菌和抗炎作用的副干酪乳杆菌，特别涉及功能性乳酸菌及其制品生产开发领域。

技术介绍

[0002]酸菜是贵州风味特产，历久不衰。酸菜具有制作简便、风味美好、食用方便、不限时令等优点，酸菜中富含膳食纤维，能增进肠胃消化，它保存有大量维生素C、易被人体吸收利用，不仅是佐餐佳品，而且有保健作用。经检测发现，贵州酸菜中含有丰富的乳酸菌，乳酸菌在发酵过程中产生的醇、醛、酸、酯和硫化物等物质与果蔬形成独特风味。乳酸菌代谢产生的酸性物质形成的酸性环境能够抑制有害细菌的生长，从而达到抑菌效果。在发酵食品中，乳酸菌能够降低发酵制品中致癌物质亚硝酸盐的含量，提高制品中的营养成分含量，增强抗氧化性、调节肠道菌群。在我国，发酵食品有着悠久的食用传统，人类日常食物中的蔬菜、肉和奶制品等都可以利用乳酸菌进行发酵生产出具有特殊风味和益生特性的食品。
[0003]近年来，益生菌研究和利用如火如荼，肠道益生菌通过调节宿主肠道内菌群平衡、增强免疫屏障和促进营养吸收等途径保持肠道健康的作用，从而维持机体健康。酸菜食品中富含各种乳酸菌，从中分离筛选对人和动物有益的益生菌，开发对人体健康有利的功能性食品具有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题为：如何提供一株抑菌和抗炎作用较强的副干酪乳杆菌及其应用。
[0005]本专利技术的技术方案为：一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613，于2022年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.25905。
[0006]副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613在非疾病治疗目的的抑制大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲杆菌或大肠弯曲杆菌上的应用。
[0007]副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613在制备治疗大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲杆菌或大肠弯曲杆菌导致疾病的药品中的应用。
[0008]副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613在制备抗肠炎药物中的应用。
[0009]副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613在调节人或动物肠道菌群的功能性食品中的应用。
[0010]副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613在制备降低血糖或胆固醇的药物中的应用。
[0011]本专利技术的副干酪乳杆菌GZ0613是从贵州省黎平县果利寨采集的酸菜中分离筛选
获得。副干酪乳杆菌GZ0613在MRS琼脂培养基上生长良好，菌落为乳白色，表面光滑，边缘整齐，不透明，对菌体形态进行镜检，革兰氏染色呈紫色，杆状。通过采用细菌通用引物16SrRNA的27F/1492R对其基因组总DNA为模板进行PCR扩增，得到由1010个碱基对(bp)组成的目的基因序列，序列如附表SEQ ID No.1所示。将测序得到的基因序列输入NCBI数据库进行比对，其与GenBank中的标准菌株Lactobacillus paracasei strain A015相似率达99.88％，可初步鉴定该菌株为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。
[0012]本专利技术的副干酪乳杆菌GZ0613通过耐酸、耐胆盐和黏附试验表明，其对酸和胆盐有一定的耐受能力，对人结肠癌细胞HT
‑
29黏附能力较强，没有溶血现象，对多种抗生素敏感。
[0013]本专利技术的副干酪乳杆菌GZ0613具有一定降血糖和降胆固醇潜力，能产乳酸、乙酸等多种短链脂肪酸，对多种致病菌具有较强的抑制活性，可抑制大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲杆菌、大肠弯曲杆菌生长。
[0014]本专利技术的副干酪乳杆菌GZ0613通过动物实验表明，对DSS小鼠结肠炎模型有较好的预防和治疗效果，可缓解脾肿大和结直肠萎缩现象，且降低多种炎症因子水平。
[0015]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0016]1、本专利技术提供的副干酪乳杆菌GZ0613分离筛选自贵州酸菜，在MRS琼脂培养基上生长良好，对酸和胆盐有一定的耐受能力，对人结肠癌细胞HT
‑
29黏附能力强，没有溶血现象，对多种抗生素敏感。
[0017]2、副干酪乳杆菌GZ0613能产乳酸、乙酸等多种短链脂肪酸，对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲杆菌、大肠弯曲杆菌等常见病原细菌抑菌能力较强。
[0018]3、本专利技术提供的副干酪乳杆菌GZ0613通过动物实验表明，对DSS小鼠结肠炎模型有较好的预防和治疗效果，炎症指标明显降低。因此，应用于功能性食品领域，不仅具有实际生产价值，而且对人和动物健康也具有非常重要的意义。
[0019]保藏信息：
[0020]副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613，于2022年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.25905。
附图说明
[0021]图1副干酪乳杆菌GZ0613菌株与其它菌株的亲缘关系
[0022]图2为本专利技术副干酪乳杆菌GZ0613菌株在MRS琼脂培养基上的菌落形态图(A)
[0023]和革兰氏染色图(B)；
[0024]图3副干酪乳杆菌GZ0613菌株的溶血活性实验；
[0025]图4副干酪乳杆菌GZ0613发酵液短链脂肪酸测定总离子流色谱图
[0026]图5.小鼠脾脏指数(A)和结直肠长度(B)
[0027]图6正常小鼠(A)和DSS诱导结肠炎小鼠(B)结肠组织切片HE染色。
[0028]图7副干酪乳杆菌GZ0613对实验小鼠肠道菌群的影响
具体实施方式
[0029]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到的。
[0030]本专利技术中所述的标准菌株LGG是指鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103。
[0031]实施例1副干酪乳杆菌GZ0613的分离、鉴定和安全性评估：
[0032]1.1、分离鉴定
[0033]取少许从贵州省黎平县果利寨采集的酸菜样品于50mL MRS肉汤中，充分振荡混匀，置于37℃恒温摇床培养24h。采用10倍梯度稀释，涂布接种于MRS琼脂培养基，37℃培养24h后挑取单菌落，并连续纯化3次。将纯化后的菌株接种于600μL本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613，于2022年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.25905。2.权利要求1所述的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GZ0613在非疾病治疗目的的抑制大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲杆菌或大肠弯曲杆菌上的应用。3.权利要求1所述的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paraca...

【专利技术属性】
技术研发人员：岳碧松，尚可，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：