一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用，属于生物技术诊断领域。本发明专利技术使用MX2、DDX58、IRF7、IFIT5、ISG15、RSAD2、PLA2G1B之一或任意组合作为绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物，并将其应用到绵羊妊娠期免疫力诊断产品、靶标的制备或构建中，通过采集配种母羊的血液或卵巢，检测血液或卵巢中所述mRNA生物标志物的表达情况，根据其表达情况即可准确预判母羊妊娠期免疫力水平，进而可对绵羊妊娠期疾病进行早期筛查、诊断以及提前干预，对降低母羊死淘率，提高经济效益具有非常重要的意义和作用。经济效益具有非常重要的意义和作用。经济效益具有非常重要的意义和作用。

【技术实现步骤摘要】
一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用


[0001]本专利技术属于生物技术诊断领域，尤其涉及一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用。

技术介绍

[0002]母羊妊娠时健康与否直接关系到养羊生产的效益，应用生物技术对羊实行早期妊娠免疫因子的筛选，可以在母羊怀孕早期阶段快速地检测出母羊是否健康，从而对母羊进行精心管理和对发病前期的提前干预，防止资源浪费，提高养殖效益。
[0003]对于母体的免疫系统来说，在经历妊娠过程时，对其免疫系统是一个极大的挑战：一方面，需要将部分免疫功能进行抑制，从而保护胚胎不会在母体中被过度排斥而发生流产或生长发育受限；另一方面，母体也需要维持部分免疫功能，以保护自身抵御外来病原体的入侵及胚胎植入的过度侵蚀。哺乳动物的胎盘由母胎双方共同形成，是免疫过渡地带。当胎盘的胚胎滋养层细胞对母体子宫内膜进行侵蚀作用时，母体的免疫功能需要得到抑制，才能保证受精卵着床能够顺利完成。囊胚进入子宫，并启动子宫内膜间质细胞一种分化进程，称为蜕膜化。蜕膜化过程在胎床中促使形成广泛血管网，对妊娠的维持和确立都是至关重要的。在妊娠早期，蜕膜中淋巴细胞的调节作用，对妊娠母体的免疫耐受、调节蜕膜细胞分化及与胚胎移植相关的血管生成都很重要，特别是树突细胞(dendritic cells,DC)和NK细胞(naturalkiller cells)。但子宫内膜的NK细胞不具有杀伤作用。DC细胞核NK细胞经常被发现于临近蜕膜血管的区域，这可能与它们妊娠早期相互之间对创造子宫蜕膜微环境有关。DC细胞在促进子宫NK细胞分化方面扮演着至关重要的角色，实验发现，受损的NK细胞功能与受损移植点DC细胞分泌IL
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15和IL
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12水平下降有显著相关性。蜕膜化过程中，DC细胞直接调控子宫基质细胞的增值与分化及子宫内膜血管的新生，维持组织生长。同时，DC分泌IL
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15促进NK细胞的募集与成熟，进而与成熟的子宫NK细胞协同调控血管的新生与活性。IL
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6在血管新生和诱导分娩方面起到至关重要的作用，而GM
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CSF对于胚胎的植入起着促进的作用。由子宫NK细胞分泌的IFN
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γ和TNF
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α被认为对妊娠过程具有普遍调节作用。吴晓妍等人的研究发现，在胚胎着床期和妊娠的末期，胎盘中有IFN
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γ的表达。在非妊娠的母体中，子宫NK细胞仅有低水平的IFN
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γ表达，而随着妊娠的进行，IFN
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γ的表达水平逐渐上升。但为外周血液循环和脾脏中，未观察到IFN
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γ水平的显著变化。这说明，母体的免疫系统为了维护自身的各项功能正常运转，需要维持某种动态的平衡。
[0004]生物标志物(Biomarker)是指可以标记系统、器官、组织、细胞及亚细胞结构或功能的改变或可能发生的改变的生化指标，具有非常广泛的用途。生物标志物可用于疾病诊断、判断疾病分期或者用来评价新药或新疗法在目标人群中的安全性及有效性。对于疾病研究，生物标志物一般是指可供客观测定和评价的一个普通生理或病理或治疗过程中的某种特征性的生化指标，通过对它的测定可以获知机体当前所处的生物学过程中的进程。检查一种疾病特异性的生物标志物，对于疾病的鉴定、早期诊断及预防、治疗过程中的监控可能起到帮助作用。寻找和发现有价值的生物标志物已经成为目前研究的一个重要热点。高
通量测序技术是发现生物标志物的一种方法，它的诞生可以说是基因组学研究领域一个具有里程碑意义的事件，该技术使得核酸测序的单碱基成本与第一代测序技术相比急剧下降，以人类基因组测序为例，上世纪末进行的人类基因组计划花费30亿美元解码了人类生命密码,而第二代测序使得人类基因组测序已进入万(美)元基因组时代。随高通量测序技术而出现的数字基因表达谱(DGE)测序、小RNAs测序、降解组测序、DNA甲基化测序、染色质免疫共沉淀DNA测序等新方法为科学家们进行分子生物学相关研究提供了更多的选择，高通量测序技术给基因组学研究带来了一个高效的新平台和巨大的发展机遇，是发现生物标志物的重要的手段。
[0005]妊娠时期是生命过程中最重要的时期，孕期母体的免疫系统承载着重大的责任，不仅要保护母体和胎儿免受外界病原菌的侵扰，还要平衡胎儿与母体的免疫水平，避免母体因自身免疫反应过强而造成流产等问题。而正是因为要保护胎儿不受母体免疫系统的攻击，母体免疫系统的变化常会导致孕畜的多种疾病。哺乳动物的妊娠期间，母体的免疫系统进行了相应的调整，母体和胚胎依靠小分子量的细胞因子、激素类信号分子进行交流，以使二者的免疫系统达到一种平衡状态，而这种平衡状态是随着胚胎的逐渐发育成熟做着相应改变的动态平衡。一旦体内这些小分子信号分泌异常，便可能引起母畜和胎儿的疾病反应，对母、胎的健康造成损伤。母体血液中各种细胞因子、激素的分泌水平不仅可以表征出自身的免疫水平的反应，同时也可以表征出体内胚胎生长发育过程中的发育和免疫的状态。而在胚胎发育分化过程中，化学分化优先于形态分化。也就是说，胚胎分化在我们能观察到的形态之前，会在母体内先释放化学信号。故我们可以以母体血液中的细胞因子和激素水平来推断出母体和胚胎的免疫状况，以此为妊娠期的机体免疫提供指导，甚至可能能够做出提前的指导。
[0006]妊娠期mRNA免疫生物标志物的鉴定对绵羊妊娠期疾病诊断、降低死淘率，提高经济效益具有非常重要的意义和作用。

技术实现思路

[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用。本专利技术使用MX2、DDX58、IRF7、IFIT5、ISG15、RSAD2、PLA2G1B之一或任意组合作为绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物，并将其应用到绵羊妊娠期免疫力诊断产品、靶标的制备或构建中，通过采集配种母羊的血液或卵巢，检测血液或卵巢中所述mRNA生物标志物的表达情况，根据其表达情况即可准确预判母羊妊娠期免疫力水平，进而可对绵羊妊娠期疾病进行早期筛查、诊断以及提前干预，对降低母羊死淘率，提高经济效益具有非常重要的意义和作用。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：
[0009]本专利技术提供了一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物，所述mRNA生物标志物为下列mRNA生物标志物之一或任意组合：MX2，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；DDX58，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；IRF7，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；IFIT5，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；ISG15，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；RSAD2，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；PLA2G1B，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.7所示。
[0010]所述7个mRNA生物标志物的具体核苷酸序列如下：
[0011]SEQ ID No本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物，其特征在于，所述mRNA生物标志物为下列mRNA生物标志物之一或任意组合：MX2，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；DDX58，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；IRF7，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；IFIT5，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；ISG15，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；RSAD2，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；PLA2G1B，其具体核苷酸序列如SEQ ID No.7所示。2.权利要求1所述的mRNA生物标志物在制备绵羊妊娠期免疫力诊断产品中的应用。3.权利要求1所述的mRNA生物标志物在构建绵羊妊娠期免疫力诊断靶标中的应用。4.根据权利要求2～3任一所述的应用，其特征在于，所述应用的具体操作步骤为：(1)检测配种母羊血液或卵巢中所述mRNA生物标志物的表达情...

【专利技术属性】
技术研发人员：常卫华，王娟红，倪国超，赵影，李昊，刘锡辉，杨富贵，滕悦扬，
申请(专利权)人：西昌学院，
类型：发明
国别省市：