一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，属于生物学技术领域，包括抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条及样本预处理管，样本预处理管内装有测定液体S1，抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条包括底板，底板上设有硝酸纤维素膜；硝酸纤维素膜的一端搭接有金标抗体反应垫，硝酸纤维素膜的另一端搭接有吸水纸，金标抗体反应垫的一端搭接有样品垫；该抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂通过将各份材料按照不同的比例进行搅拌，形成抗环瓜氨酸肽抗体测定液体，并通过测定前事先将样本与测定液体S1混合，对样本进行预处理，便于消除样本中干扰组分，提高该抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂特异性，从而提高抗环瓜氨酸肽抗体测定的准确性。肽抗体测定的准确性。肽抗体测定的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物学
，具体涉及一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒。

技术介绍

[0002]类风湿性关节炎(RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病，以滑膜关节慢性炎症反应和关节损伤为主要临床表现。类风湿关节炎在临床上较为常见，是一种多发自身免疫性疾病。该病主要病理特征为滑膜慢性炎性增生、关节软骨及骨质不可逆性进行性破坏，可致使出现关节强直、畸形、功能丧失等症状，而且，类风湿关节炎若不及时治疗，可导致出现不可逆性关节畸形或破坏，影响患者的生活质量。故需寻找有效方法，提升早期诊断准确性，尽早干预，控制病情进展，减少关节侵蚀破坏。
[0003]当前，临床上诊断类风湿关节炎的方法较多，包括临床表现、X线、类风湿因子等，且不同方法效果不一，各有利弊。
[0004]近年来，人们开始越来越多地关注类风湿关节炎诊断中血清免疫学指标的应用效果，常见的有抗环瓜氨酸肽抗体等。
[0005]抗环瓜氨酸肽抗体是以合成的环化瓜氨酸多肽(CCP)为抗原的自身抗体，对类风湿关节炎(RA)具有较高的敏感性和特异性，是RA早期诊断的一个高度特异指标。而目前的抗环瓜氨酸肽抗体的测定多是用酶联免疫吸附测定法、化学发光法等进行测定，而这些方法在测定的过程中，时间较长、过程复杂，使用效率低。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是为了解决现有技术中抗环瓜氨酸肽抗体的多种测定方法中存在的时间长和测定过程复杂的缺点，而提出的一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，该试剂盒操作简单，可实现家庭自检，且通过提前处理待检样本，减少了反应过程中存在的干扰竞争，提高了试剂特异性。
[0007]为了解决以上技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，包括抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条及样本预处理管，样本预处理管内装有测定液体S1，抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条包括底板，底板上设有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上设有包被6种不同环瓜氨酸肽抗原的检测T线及包被山羊抗小鼠IgG抗体的质控C线；硝酸纤维素膜的一端搭接有金标抗体反应垫，硝酸纤维素膜的另一端搭接有吸水纸，金标抗体反应垫的一端搭接有样品垫；所述测定液体S1按照PB缓冲液90mmol/L、氯化钠15g/L、PEG聚稳定剂18g/L、PC
‑
300防腐剂0.6g/L、IgG单克隆抗体阻断剂0.6g/L组成，其溶剂为纯化水，pH为7.2
‑
7.6。
[0008]作为上述技术方案的进一步改进：所述金标抗体反应垫上涂有鼠抗人IgG单克隆抗体
‑
胶体金复合物。
[0009]所述金标抗体反应垫上涂布的鼠抗人IgG单克隆抗体
‑
胶体金复合物涂层中采用的胶体金粒径为30nm。
[0010]所述鼠抗人IgG单克隆抗体
‑
胶体金复合物涂层的制备方法为：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，在100mL、30nm粒径的胶体金溶液中加入1mg鼠抗人IgG单克隆抗体，经过反应后离心弃上清，再加入5mL金复溶液静置反应，制得鼠抗人IgG单克隆抗体
‑
胶体金复合物，按照体积比1:10的比例用金复溶液进行稀释，以34mL/0.075m2涂布于玻璃纤维上，经过干燥即可。
[0011]所述检测T线和质控C线的制备方法为：用稀释液分别将6种环瓜氨酸肽抗原混合液稀释至0.8mg/mL、山羊抗小鼠IgG抗体稀释至1.8mg/mL，依次喷涂于硝酸纤维素膜上，经过干燥即可。
[0012]6种不同环瓜氨酸肽抗原为CCP
‑Ⅰ
—CCP
‑Ⅵ
共6种抗原按比例1:1:1:1:1:1混合而成。
[0013]所述稀释液按照每1L、20mmol的PBS缓冲液中含有3wt％的蔗糖和2wt％的海藻糖配制而成，PBS缓冲液的pH为7.2。
[0014]所述金复溶液按照0.05M pH7.4 Tris、0.05wt％葡萄糖、0.02wt％海藻糖、0.03wt％Tween
‑
20、0.02wt％BSA、0.01wt％NaN3混合组成，pH为7.0
‑
7.5。
[0015]所述样品垫经过样品处理液处理玻璃纤维，经过干燥所得。
[0016]所述样品处理液按照每1000mL、pH8.0
‑
8.5的PB缓冲液中含0.5wt％PVA、0.1wt％S9、0.02wt％曲拉通X
‑
100、抗红细胞抗体0.7mg/mL、0.4wt％海藻糖和0.2wt％酪蛋白配制而成。
[0017]本专利技术采取以上技术方案，具有以下优点：(1)该抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂通过将各份材料按照不同的比例进行搅拌，形成抗环瓜氨酸肽抗体测定液体，并通过测定前事先将样本与测定液体S1混合，对样本进行预处理，便于消除样本中干扰组分，提高该抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂特异性，从而提高抗环瓜氨酸肽抗体测定的准确性。
[0018](2)样品垫7经过样品处理液处理，可以过滤待检测样本中的杂质及红细胞，可适合血清/血浆/全血及指尖血样本检测，从而实现家庭自测；样品垫7渗透性好，可提升吸水速度，加快在NC膜上的层析速度，另外可提高产品的特异性。
[0019](3)硝酸纤维素膜2上的质控C线4，检测T线3涂布时，采用含有海藻糖和蔗糖的稀释液来稀释环瓜氨酸肽抗原混合液、山羊抗小鼠IgG抗体，可以增加待测试剂的稳定性。
[0020]综上所述，本专利技术适用于多种样本，且将样本与测定液体S1混合预处理后，可高效、准确的完成对抗环瓜氨酸肽抗体的检测，操作便捷，且可实现家庭自检。
[0021]下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步说明。
附图说明
[0022]图1是本专利技术实施例中抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条的结构示意图。
[0023]其中，1
‑
底板，2
‑
硝酸纤维素膜，3
‑
检测T线，4
‑
质控C线，5
‑
金标抗体反应垫，6
‑
吸水纸，7
‑
样品垫。
具体实施方式
[0024]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，实施例中未注明具体条
件，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市场购买获得的常规产品。
[0025]所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0026]实施例1：如图1所示，一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，包括抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条及样本预处理管，样本预处理管内装有测定液体S1，抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条包括底板1，底板1上设有硝酸纤维素膜2，硝酸纤维素膜2上设有包被6种不同环瓜氨酸肽抗原的检测T线3及包被本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，其特征在于：包括抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条及样本预处理管，样本预处理管内装有测定液体S1，抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸条包括底板，底板上设有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上设有包被6种不同环瓜氨酸肽抗原的检测T线及包被山羊抗小鼠IgG抗体的质控C线；硝酸纤维素膜的一端搭接有金标抗体反应垫，硝酸纤维素膜的另一端搭接有吸水纸，金标抗体反应垫的一端搭接有样品垫；所述测定液体S1按照PB缓冲液90mmol/L、氯化钠15g/L、PEG聚稳定剂18g/L、PC
‑
300防腐剂0.6g/L、IgG单克隆抗体阻断剂0.6g/L组成，其溶剂为纯化水，pH为7.2
‑
7.6。2.根据权利要求1所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，其特征在于：所述金标抗体反应垫上涂有鼠抗人IgG单克隆抗体
‑
胶体金复合物。3.根据权利要求2所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，其特征在于：所述金标抗体反应垫上涂布的鼠抗人IgG单克隆抗体
‑
胶体金复合物涂层中采用的胶体金粒径为30nm。4.根据权利要求3所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，其特征在于：所述鼠抗人IgG单克隆抗体
‑
胶体金复合物涂层的制备方法为：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，在100mL、30nm粒径的胶体金溶液中加入1mg鼠抗人IgG单克隆抗体，经过反应后离心弃上清，再加入5mL金复溶液静置反应，制得鼠抗人IgG单克隆抗体
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胶体金复合物，按照体积比1:10的比例用金复溶液进行稀释，以34mL/0.075m2涂布于玻璃纤维上，经过干...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨帆，王斌，毕德坤，杨明霞，朱衍杰，王菲，张平，
申请(专利权)人：山东康华生物医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：