降低胶质母细胞瘤免疫抑制微环境的小分子抑制剂及其用途制造技术

本发明专利技术提供了通过抑制肿瘤细胞发生坏死性凋亡来抑制巨噬细胞向肿瘤内迁移和向促瘤的M2表型极化进而降低免疫抑制微环境的小分子抑制剂及其用途。所述小分子抑制剂为GSK

【技术实现步骤摘要】
降低胶质母细胞瘤免疫抑制微环境的小分子抑制剂及其用途


[0001]本专利技术属于生物医药
，尤其涉及降低胶质母细胞瘤免疫抑制微环境的小分子抑制剂及其用途。

技术介绍

[0002]胶质母细胞瘤(glioblastoma，GBM)是最常见的中枢神经系统肿瘤。因为胶质母细胞瘤具有恶性程度高，侵袭性强和易复发等特点，所以患者即使通过手术切除并配合放疗和替莫唑胺化疗进行治疗，但是预后仍然很差。70％～80％患者病程在3～6个月，病程超过1年者仅10％。因为胶质母细胞瘤的恶性程度高，在病理学水平上呈现出更多的坏死以及特有的假栅栏状坏死。
[0003]胶质瘤相关巨噬细胞(glioma
‑
associated microglia and macrophages，GAM)在肿瘤组织中具有高达30％的占比。在肿瘤组织中的GAM具有两种来源，一种是在大脑中常驻的小胶质细胞，另一种是由于肿瘤导致的血脑屏障的破坏从而进入到大脑中的外周血来源的巨噬细胞。GAM具有两种极化表型分别是促炎(促炎抑制肿瘤)的M1表型和抗炎(抗炎促进肿瘤)的M2表型。M1表型具有抑制肿瘤生长的作用，而M2表型则可以通过形成免疫抑制的微环境从而进一步的促进肿瘤的生长。在胶质母细胞瘤中由于其复杂的肿瘤微环境，大部分的巨噬细胞都表现出促瘤的M2表型。根据目前的研究，GAM的极化并不是绝对的，而是一个动态转化过程，可以通过改变肿瘤微环境来实现转化。因此通过靶向肿瘤微环境促进GAM的M1极化，抑制GAM的M2极化可以为胶质母细胞瘤的治疗提供新的方向。
[0004]坏死性凋亡(necroptosis)主要是以关键蛋白RIPK3/MLKL介导的调节性细胞死亡，其中RIPK3为关键性的调控激酶。发生坏死性凋亡时，细胞质膜完整性会在早期丢失，细胞内容物泄漏，细胞器肿胀，DNA随机降解，以及产生能引起炎症反应的损伤相关分子模式(DAMPs)，从而对微环境产生影响。GSK'872是一种有效的、特异性的RIPK3激酶抑制剂，与RIPK3激酶区域以高亲和力结合，进而抑制细胞发生坏死性凋亡。目前主要在结直肠癌，胰腺癌和神经退行性疾病中有报道通过GSK
’
872抑制坏死性凋亡从而来抑制疾病的恶性进展，尚无在胶质母细胞瘤中通过GSK
’
872抑制肿瘤恶性进展的报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供GSK
’
872在降低胶质母细胞瘤免疫抑制微环境的新用途。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下方案：
[0007]一方面，本专利技术提供靶向坏死性凋亡通路关键激酶RIPK3的抑制剂在制备治疗脑肿瘤的药物组合物中的用途。
[0008]在一些实施方案中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
[0009]在一些实施方案中，所述靶向坏死性凋亡通路关键激酶RIPK3的抑制剂为GSK
’
872和/或HS
‑
1371。
[0010]另一方面，本专利技术提供小分子抑制剂GSK
’
872在制备降低胶质母细胞瘤微环境中
inhibitor of RIP3
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mediated necroptosis.Exp Mol Med.2018Sep 20；50(9):125。
[0027]坏死性凋亡和凋亡：是细胞的两种不同死亡方式。其中的区别是1.发生坏死性凋亡和凋亡时细胞的形态不同，凋亡时细胞皱缩，细胞膜在最后破裂，坏死性凋亡时细胞膨大，细胞膜在最初破裂。2.发生两种死亡时介导的信号通路不同，凋亡时主要发生Cleaved Caspase
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3的上调，发生坏死性凋亡时主要是p
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RIPK3和p
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MLKL的上调。3.最重要的是对微环境的影响不同，凋亡被认为是对微环境的影响极小，发生坏死性凋亡是细胞会释放损伤相关分子模式，对微环境影响较大。
[0028]有益效果
[0029]本专利技术证明了小分子抑制剂GSK
’
872在降低胶质母细胞瘤免疫抑制微环境的新用途。这种药物的发现可以为理解胶质母细胞瘤中的免疫抑制微环境提供新思路，为解决胶质母细胞瘤的免疫治疗抵抗提供新的治疗方法。
[0030]现有技术虽然公开了紫草素在胶质瘤治疗中的作用是可以诱导肿瘤细胞发生坏死性凋亡进而来杀伤肿瘤细胞达到治疗目的，但是GSK
’
872在其中只是作为坏死性凋亡通路中RIPK3的抑制剂来作为对照使用，并不是作为治疗胶质瘤的药物。本专利技术证明的是胶质瘤微环境中本身存在发生坏死性凋亡的细胞且可以通过形成免疫抑制微环境来促进肿瘤进展。所以如果使用坏死性凋亡关键通路蛋白RIPK3的抑制剂GSK
’
872作为治疗药物就可以降低微环境中的免疫抑制水平，从而抑制肿瘤进展。总结就是目前关于坏死性凋亡在肿瘤中的研究有两个相反的方向：1.通过某种药物人为诱导肿瘤细胞发生坏死性凋亡，进而来治疗肿瘤；2.现肿瘤微环境中本身存在肿瘤细胞的坏死性凋亡且是促进肿瘤发展的，所以就可以使用GSK
’
872来进行治疗。两个方向都有研究。本专利技术是第二种方向。
[0031]现有技术仅通过某种药物诱导肿瘤细胞发生坏死性凋亡来治疗胶质瘤，这种情况RIPK3的抑制剂只是作为实验对照，并不是作为治疗肿瘤的药物。本专利技术是表明了胶质瘤中本身就存在坏死性凋亡并且是促进肿瘤进展的，所以可以使用坏死性凋亡通路关键蛋白RIPK3的抑制剂来抑制肿瘤进展，从而作为一个治疗药物。此外，本专利技术发现肿瘤细胞的坏死性凋亡是通过增强免疫抑制微环境来促进肿瘤进展，所以后续可以考虑GSK
’
872和免疫疗法联合使用来治疗胶质瘤。免疫疗法被认为是未来治疗胶质瘤的有效疗法。目前免疫疗法在胶质瘤中的效果不显著，这是由于免疫抑制微环境的原因，而本专利技术提供的药物GSK
’
872可以降低免疫抑制微环境，这就是本专利技术优势所在。
附图说明
[0032]图1为证明胶质母细胞瘤中存在肿瘤细胞发生坏死性凋亡的微环境，且集中在坏死周围。图1A为连续石蜡切片的H&E和IHC染色观察坏死性凋亡存在的区域。图1B为在Ivy数据库中分析坏死性凋亡基因集存在的区域特征。
[0033]图2为数据库分析坏死性凋亡与胶质瘤的恶性程度呈正相关，与患者的生存期呈负相关。图2A为检测坏死性凋亡分数在胶质母细胞瘤和非肿瘤组织中的表达情况。图2B为检测坏死性凋亡分数在胶质瘤不同级别中的表达情况。图2C为检测坏死性凋亡分数在胶质母细胞瘤不同分子分型中的表达情况。图2D为在TCGA数据库中分析坏死性凋亡分数与患者生存期的关系。图2E为在CGGA数据库中分析坏死性凋亡分数与患者生存期的关系。图2F为在Rembrandt数据库中分析坏死性凋亡分数与患者生存期的关系。
[0034]图3为构建缺糖诱导肿瘤细胞发生坏死性凋亡体外模型。图3A为U251细胞在GD、Ctrl本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.靶向坏死性凋亡通路关键激酶RIPK3的抑制剂在制备治疗脑肿瘤的药物组合物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述靶向坏死性凋亡通路关键激酶RIPK3的抑制剂为GSK
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872和/或HS
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1371。4.小分子抑制剂GSK
’
872在制备降低胶质母...

【专利技术属性】
技术研发人员：王根，卞修武，平轶芳，陈聪，周文超，陈梦杰，汪杰，
申请(专利权)人：中国科学技术大学，
类型：发明
国别省市：