一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法技术

本发明专利技术公开一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，所述方法包括玉米蛋白粉预处理、酶解。本发明专利技术的方法产物中寡肽含量高，到的玉米寡肽粉，使用凯氏定氮法检测寡肽含量，寡肽含量为91.0

【技术实现步骤摘要】
一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法


[0001]本专利技术涉及一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，属于酶解制备寡肽领域。

技术介绍

[0002]玉米蛋白粉是玉米淀粉生产中的副产物，大约含有60%的蛋白质，由于其组成复杂，口感粗糙，功能性尤其是水溶性非常差，从而严重限制了其在食品工业中的应用，只能作为饲料在畜牧业使用，为了进一步提高玉米蛋白粉的水溶性及其功能特性，玉米蛋白生产寡肽的研究已经得到人们的重视，研究表明酶解制备寡肽是可行的，并且酶解得到的寡肽具有很多生物功能，例如抑制血压升高、抗疲劳、促进酒精代谢等，进一步提高玉米蛋白粉的附加值。
[0003]玉米蛋白粉中的蛋白质以醇溶性蛋白为主，在溶液中显示出高度的旋光性，说明它的分子中存在着大区域的α
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螺旋结构，使其具有很强的疏水性，如果不经过变性处理，液体中的酶解反应将变成两相界面间的反应，另外玉米蛋白粉中存在约14%的淀粉，这些淀粉与玉米蛋白牢牢地结合在一起，形成层层包裹的复合体，导致酶解的水解度低。
[0004]为了提高玉米蛋白粉的水溶性，可以采用适当的处理方法使蛋白变性，破坏蛋白的二、三级结构，使玉米蛋白分子内部的基团暴露于蛋白质分子表面，增加酶与蛋白的接触点，使其更容易被酶解，提高水解度。
[0005]常用的方法包括碱处理、蒸煮处理、膨化处理，其中蒸煮处理可以除去玉米蛋白粉中的淀粉，蛋白质结构被高温破坏，再经酶解可以获得较高的水解度，水解度可以达到20%以上，但是最终制备的产物中，分子量小于1000Da的寡肽仅占总产物的80%，得率较低，是由于变性处理仍然不够理想造成的。
[0006]CN101531700A公开了一种玉米低聚肽及其制备方法，在酶解前，将玉米蛋白粉在碱性环境下进行蒸煮处理，可以提高酶解的水解度，但是其酶解产物中，分子量小于1000Da的寡肽仅占总产物的80%左右，得率较低。
[0007]综上所述，现有技术中，通过蒸煮处理来使玉米蛋白变性，可以在酶解中获得较高的水解度，但是酶解产物中，分子量小于1000Da的寡肽含量较低。

技术实现思路

[0008]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术存在的缺陷，通过玉米蛋白粉预处理，进一步进行酶解，提高酶解产物中分子量小于1000Da的寡肽含量。
[0009]为解决上述技术问题，本专利技术采取以下技术方案：一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，所述方法包括玉米蛋白粉预处理、酶解。
[0010]以下是对上述技术方案的进一步改进：所述玉米蛋白粉预处理的步骤包括柠檬酸处理、蒸汽爆破处理、蒸煮处理；所述柠檬酸处理的方法为，将玉米蛋白粉粉碎至50
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100目，与去离子水混合，加入柠檬酸，搅拌均匀后，用氢氧化钠溶液调节pH为6.3
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6.5，控制温度为11
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13℃，进行搅拌，搅
拌时间为23
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25h，搅拌后进行过滤，将滤渣清洗、干燥，得到柠檬酸处理玉米蛋白粉。
[0011]所述玉米蛋白粉、去离子水、柠檬酸的质量比为45
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55:450
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550:14
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16；所述玉米蛋白粉的粗蛋白质含量（以干基计）为62.87wt%，粗纤维含量（以干基计）为4.52wt%，粗脂肪含量（以干基计）为5.28wt%，水分含量为4.67wt%；所述氢氧化钠溶液的浓度为1.4
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1.6wt%。
[0012]所述蒸汽爆破处理的方法为，将柠檬酸处理玉米蛋白粉、去离子水、氧化钙混合均匀后，送入爆破罐，维持压力为2.2
‑
2.5MPa，进行保压，保压时间为275
‑
310s，保压结束后，释放压力进行爆破，然后经干燥得到爆破后玉米蛋白粉。
[0013]所述柠檬酸处理玉米蛋白粉、去离子水、氧化钙的质量比为180
‑
220:25
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35:4.5
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5.5。
[0014]所述蒸煮处理的方法为，将爆破后玉米蛋白粉、氢氧化钠、去离子水混合，搅拌均匀后，控制压力为0.20
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0.25MPa，控制温度为107
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122℃，对爆破后玉米蛋白粉进行蒸煮，蒸煮时间为41
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52min，蒸煮同时进行通氧，每分钟通氧量为玉米蛋白粉质量的1.4
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1.6%，蒸煮后控制温度为85
‑
92℃，对水分进行蒸干，得到预处理玉米蛋白粉。
[0015]所述爆破后玉米蛋白粉、氢氧化钠、去离子水的质量比为180
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220:11
‑
13:650
‑
750。
[0016]所述酶解的方法为，将预处理玉米蛋白粉与去离子水混合，制备成底物浓度为6.45
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6.55mg/mL的待酶解液，然后加入混合酶，控制温度为48
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52℃，进行酶解，酶解时间为5.8
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6.5h，酶解完成后，得到酶解液，控制离心速度为4500
‑
5500r/min，将酶解液进行离心，离心后取上清液进行喷雾干燥，得到玉米寡肽粉。
[0017]所述混合酶由碱性蛋白酶和中性蛋白酶组成，其质量比为3:1.8
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2.2，其中碱性蛋白酶的酶活为7000U/g，中性蛋白酶的酶活为8000U/g。
[0018]所述混合酶的加入量为玉米蛋白粉质量的2.4
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2.6%。
[0019]与现有技术相比，本专利技术取得以下有益效果：本专利技术的方法水解度高，使用Ph
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stat法测定酶解步骤中酶解液的水解度，水解度为31.6
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32.2%；本专利技术的方法产物中寡肽含量高，到的玉米寡肽粉，使用凯氏定氮法检测寡肽含量，寡肽含量为91.0
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91.5%；本专利技术的方法得到的寡肽中，通过1000Da纳滤膜的肽段的含量高，将得到的酶解液进行离心，离心后取上清液，将上清液通过1000Da纳滤膜进行过滤，通过1000Da纳滤膜的肽段的含量为93.62
‑
94.21%，被1000Da纳滤膜截留的肽段的含量为5.79
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6.38%。
具体实施方式
[0020]实施例1（1）玉米蛋白粉预处理a、柠檬酸处理将玉米蛋白粉粉碎至80目，与去离子水混合，加入柠檬酸，搅拌均匀后，用氢氧化钠溶液调节pH为6.4，控制温度为12℃，进行搅拌，搅拌时间为24h，搅拌后进行过滤，将滤渣清洗、干燥，得到柠檬酸处理玉米蛋白粉；
所述玉米蛋白粉、去离子水、柠檬酸的质量比为50:500:15；所述玉米蛋白粉的粗蛋白质含量（以干基计）为62.87wt%，粗纤维含量（以干基计）为4.52wt%，粗脂肪含量（以干基计）为5.28wt%，水分含量为4.67wt%；所述氢氧化钠溶液的浓度为1.5wt%；b、蒸汽爆破处本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，其特征在于，所述方法包括玉米蛋白粉预处理、酶解。2.根据权利要求1所述的一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，其特征在于：所述玉米蛋白粉预处理的步骤包括柠檬酸处理、蒸汽爆破处理、蒸煮处理；所述柠檬酸处理的方法为，将玉米蛋白粉粉碎至50
‑
100目，与去离子水混合，加入柠檬酸，搅拌均匀后，用氢氧化钠溶液调节pH为6.3
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6.5，控制温度为11
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13℃，进行搅拌，搅拌时间为23
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25h，搅拌后进行过滤，将滤渣清洗、干燥，得到柠檬酸处理玉米蛋白粉。3.根据权利要求2所述的一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，其特征在于：所述玉米蛋白粉、去离子水、柠檬酸的质量比为45
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55:450
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550:14
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16；所述玉米蛋白粉的粗蛋白质含量（以干基计）为62.87wt%，粗纤维含量（以干基计）为4.52wt%，粗脂肪含量（以干基计）为5.28wt%，水分含量为4.67wt%；所述氢氧化钠溶液的浓度为1.4
‑
1.6wt%。4.根据权利要求2所述的一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，其特征在于：所述蒸汽爆破处理的方法为，将柠檬酸处理玉米蛋白粉、去离子水、氧化钙混合均匀后，送入爆破罐，维持压力为2.2
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2.5MPa，进行保压，保压时间为275
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310s，保压结束后，释放压力进行爆破，然后经干燥得到爆破后玉米蛋白粉。5.根据权利要求4所述的一种玉米蛋白粉酶解制备寡肽的方法，其特征在于：所述柠檬酸处理玉米蛋白粉、去离子水、氧化钙的质量比为180
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220:25
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35:4.5
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5.5。6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：李永强，房鹏伟，吴双，魏雪艳，
申请(专利权)人：寿光市沃野化工有限责任公司，
类型：发明
国别省市：