一种抑二肽素B的生物合成方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体公开了一种抑二肽素B的生物合成方法，该方法包括以下步骤：将牛类芽孢杆菌(Paenibacillusbovis)CGMCCNo.8333接种于脱脂乳淀粉培养基中进行发酵。该方法首次采用牛类芽孢杆菌CGMCCNo.8333发酵脱脂乳淀粉培养基的方法完成抑二肽素B的生物合成，披露了牛类芽孢杆菌CGMCCNo.8333具有发酵脱脂乳淀粉培养基合成抑二肽素B的新用途，拓宽了抑二肽素B的来源，而组成简单、来源天然的培养基，令合成的抑二肽素B具有更高的使用安全性。肽素B具有更高的使用安全性。肽素B具有更高的使用安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种抑二肽素B的生物合成方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种抑二肽素B的生物合成方法

技术介绍

[0002]Ⅱ型糖尿病是一种多发于中老年人群体、常见的内分泌代谢紊乱性疾病。随着我国社会结构不断趋向老龄化，Ⅱ型糖尿病发病率也随之增高，给家庭和社会带来了极大的经济负担。有研究表明，传统降糖药物的长期或不当使用会对胰岛素β细胞的功能造成不可逆损害，进而导致患者血糖水平难以控制。英国糖尿病前瞻试验研究表明，胰岛β细胞功能一旦发生衰竭传统药物难以控制，因此，降糖药物能否在有效降低血糖的同时，对胰岛β细胞降低损伤或者予以保护至关重要。
[0003]近年来，二肽基肽酶
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4(dipeptidyl peptidase
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4，DPP
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4)成为降糖药物开发的新靶点。DPP
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4抑制剂通过抑制体内DPP
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4的活性，提高体内胰高血糖素样肽
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1(GLP
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1)和葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)的浓度，进而促进胰岛素分泌、抑制胰高血糖素的分泌而发挥降血糖作用，并且能改善胰岛α及β细胞功能，因此，DPP
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4抑制剂的使用不会导致胰岛素或部分降糖药引起的低血糖反应等副作用的发生。
[0004]目前，天然来源的DPP
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4抑制剂有很多，然而，其中只有少数是世界范围所公认DPP
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4抑制剂。抑二肽素DiprotinA和B便是两种公认的DPP
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4抑制剂，然而纵览抑二肽素Diprotin相关的报道，发现大多与DiprotinA有关，而涉及抑二肽素Diprotin B的研究几乎没有，甚至报道其天然合成方法的文章也少有发表。因此，找到一种抑二肽素Diprotin B的生物合成方法，彻底解决Diprotin B的来源问题是本领域技术人员亟待解决的首要问题。

技术实现思路

[0005]基于上述技术问题，本专利技术提供了一种抑二肽素B的生物合成方法。所述抑二肽素B(Diprotin B)为已知化合物，其分子式为C
16
H
29
N3O4。
[0006]具体的，该抑二肽素B的生物合成方法包括以下步骤：使牛类芽孢杆菌(Paenibacillus bovis)CGMCC No.8333于培养基中发酵，得到含有抑二肽素B的发酵液。
[0007]优选的，所述方法还包括将牛类芽孢杆菌(Paenibacillus bovis)CGMCCNo.8333接种于所述培养基中。
[0008]优选的，所述培养基为脱脂乳淀粉培养基。
[0009]优选的，牛类芽孢杆菌CGMCC No.8333的接种量为1.6x106～8x106cfu/mL。
[0010]优选的，所述脱脂乳淀粉培养基包括脱脂乳粉、淀粉和水，脱脂乳粉占脱脂乳淀粉培养基的质量百分比为0.5～4.5％，淀粉占脱脂乳淀粉培养基的质量百分比为0.5～4.5％，其余为水。
[0011]优选的，发酵为振荡培养，振荡速度为100～300rpm。
[0012]优选的，发酵的温度为25℃～35℃。
[0013]优选的，发酵的时间为3～14天。
[0014]进一步的，发酵终止时发酵液中抑二肽素B的含量＞1mg/mL。
[0015]本专利技术还提供了一种用以上生物合成方法得到的抑二肽素B。
[0016]上述技术方案首次采用牛类芽孢杆菌(Paenibacillus bovis)CGMCCNo.8333发酵脱脂乳淀粉培养基方法完成抑二肽素B的生物合成，披露了牛类芽孢杆菌CGMCC No.8333具有发酵脱脂乳淀粉培养基合成抑二肽素B的新用途，拓宽了抑二肽素B的来源。同时，组成简单、来源天然的培养基，令合成的抑二肽素B具有更高的使用安全性。
附图说明
[0017]图1为抑二肽素B的UHPLC
‑
Q
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TOF MS二级镜像匹配图。
具体实施方式
[0018]为更清楚的对本专利技术技术方案予以阐述，下面将结合具体实施方式对本专利技术的技术方案进行进一步阐述：
[0019]在一个具体的实施方式中，提供了一种抑二肽素B的生物合成方法，包括以下步骤：将牛类芽孢杆菌(Paenibacillus bovis)CGMCC No.8333接种于脱脂乳淀粉培养基中进行发酵，得到含有抑二肽素B的发酵液。
[0020]上述技术方案中的制备方法，首次采用牛类芽孢杆菌(Paenibacillus bovis)CGMCC No.8333发酵脱脂乳淀粉培养基的方法完成抑二肽素B的生物合成，披露了牛类芽孢杆菌CGMCC No.8333具有发酵脱脂乳淀粉培养基合成抑二肽素B的新用途，拓宽了抑二肽素B的来源。同时，组成简单、来源天然的培养基，令合成的抑二肽素B具有更高的使用安全性。
[0021]此外，生物合成所采用的发酵培养基来源广泛、成本低廉、天然安全，避免使用化学合成培养基；加上发酵菌种采用牛类芽孢杆菌这一种单一菌种，上述的原料、菌种的组合，有利于合成工艺的标准化与工业大规模生产的成本控制。
[0022]优选的，牛类芽孢杆菌CGMCC No.8333的接种量为1.6x106～8x106cfu/mL；较佳地为3.2x106～6.4x106cfu/mL，更佳地为4.8x106cfu/mL。
[0023]优选的，所述脱脂乳淀粉培养基包括脱脂乳粉、淀粉和水，脱脂乳粉占脱脂乳淀粉培养基的质量百分比为0.5～4.5％，淀粉占脱脂乳淀粉培养基的质量百分比为0.5～4.5％，其余为水。制备方法可以包括以下步骤：在蒸馏水中加入脱脂乳粉和淀粉，混匀充分后，95～125℃灭菌5～20分钟，冷却即得。
[0024]优选的，优选的发酵方式为振荡培养，振荡速度为100～300rpm；较佳地为150～250rpm；更佳地为200rpm。
[0025]优选的，优选的发酵温度为25℃～35℃；较佳地为28℃～32℃；更佳地为30℃。
[0026]优选的，优选的发酵时间为3～14天；较佳地为5～10天；更佳地为7天。
[0027]结合对比例1亦可知，在优选发酵参数的范围之外时，牛类芽孢杆菌CGMCC No.8333发酵脱脂乳淀粉培养基合成抑二肽素B的效率明显下降了。而在优选范围之内，接种量、振荡速度、发酵温度和时间相互影响，使得牛类芽孢杆菌CGMCC No.8333发酵合成抑二肽素B的能力更强。
[0028]进一步的，发酵终止时发酵液中抑二肽素B的含量＞1mg/mL。
[0029]下面通过实施例进一步说明上述具体实施方式，但并不因此将本专利技术限制在所述
的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。实施例中所使用的试剂若未加说明，均为分析纯试剂，购买自国药集团。其他试验仪器、试剂、菌种，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抑二肽素B的生物合成方法，其特征在于，包括以下步骤：使牛类芽孢杆菌(Paenibacillusbovis)CGMCCNo.8333于培养基中进行发酵，得到含有抑二肽素B的发酵液。2.根据权利要求1所述的抑二肽素B的生物合成方法，其特征在于，所述培养基为脱脂乳淀粉培养基。3.根据权利要求1所述的抑二肽素B的生物合成方法，其特征在于，所述方法还包括将所述牛类芽孢杆菌CGMCCNo.8333接种于所述培养基中，接种量为1.6x106～8x106cfu/mL。4.根据权利要求1所述的抑二肽素B的生物合成方法，其特征在于，所述脱脂乳淀粉培养基包括脱脂乳粉、淀粉和水，脱脂乳粉占脱脂乳淀粉培养基的质量百分比为...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓花，刘振民，吴正钧，韩瑨，唐月方，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：