一种拉罗替尼对映异构体、非对映异构体检测方法技术

本发明专利技术涉及一种拉罗替尼对映异构体、非对映异构体检测方法，以多糖衍生物涂敷型为填充剂的色谱柱为手性色谱柱，低级烷烃与低级醇混合液为流动相，通过高效液相色谱法，紫外检测器对拉罗替尼对映异构体、非对映异构体进行分离测定；本发明专利技术通过综合考虑分析柱、流动相、梯度洗脱程序以及流速、柱温对分离检测的综合影响，使得检测结果达到了最优化，可以将拉罗替尼中的对映异构体、非对映异构体在同一色谱条件进行快速高效的分离，并且该检测方法灵敏度高、专属性强、快速简便、操作方便，可有效控制药品的质量，适用于分离检测拉罗替尼的对映异构体、非对映异构体。非对映异构体。非对映异构体。

【技术实现步骤摘要】
一种拉罗替尼对映异构体、非对映异构体检测方法


[0001]本专利技术涉及分析化学
，具体涉及一种用HPLC分离测定拉罗替尼对映异构体、非对映异构体的方法。

技术介绍

[0002]拉罗替尼(Larotrectinib，商品名Vitrakvi)，是由LoxoOncology公司和德国拜耳公司共同研发的靶向原肌球蛋白激酶(tropomyosinrelatedkinase，TRK)抗肿瘤药物，拉罗替尼于2018年11月26日获美国FDA批准上市，，用于治疗患有NTRK基因融合的局部晚期或转移性实体瘤的成人和儿童患者，是一种广谱抗癌靶向药，在多种肿瘤中有效性一致，包括肺癌，黑色素瘤，结直肠癌，胃肠道间质瘤，乳腺癌，骨肉瘤，胆管癌，软组织肉瘤，唾液腺瘤，婴儿纤维肉瘤，甲状腺癌，原发性未知癌，先天性中胚层肾癌，阑尾癌和胰腺癌。
[0003]拉罗替尼为NTRK基因抑制剂，NTRK基因家族包括NTRK1、NTRK2和NTRK3，这些基因如果与其它基因发生融合，可导致异常激活，从而引起肿瘤的发生。NTRK基因融合在多种肿瘤中都有发现，拉罗替尼则是治疗该类肿瘤的第一选择。
[0004]拉罗替尼分子式：C
21
H
22
F2N6O2·
H2SO4，分子量：526.51，化学结构式如下式(1)：
[0005][0006]拉罗替尼存在两个手性中心，在化学合成中，分别由起始物料1：(S)
‑2‑
(2,5
‑
二氟苯基)吡咯烷D(+)
‑
苹果酸，分子式：C
10
H
11
F2N
·
C4H6O5分子量：317.29，化学结构式如下式(2)；起始物料2：(S)
‑3‑
羟基吡咯烷，分子式：C4H9NO分子量：87.12，化学结构式如下式(3)各引入一个手性中心。
[0007][0008]拉罗替尼因存在两个手性中心，在合成在制备过程中，易产生一个对映异构体及一对非对映异构体杂质。杂质结构如下：
[0009][0010]上述三个异构体杂质在样品中普遍存在，被列为拉罗替尼的工艺杂质，影响拉罗替尼原料药和其制剂产品的品质；同时在检测过程中拉罗替尼与其异构体杂质难以分离检测。拉罗替尼异构体的检测目前尚无文献报道。
[0011]本专利技术提供了一种以多糖衍生物涂敷型为填充剂手性色谱柱，高效液相分离检测拉罗替尼对映异构体、非对映异构体的方法。

技术实现思路

[0012]为了准确反映拉罗替尼原料药或制剂中对映异构体的含量，可以为质量标准的制定提供合理的依据，以便能够更好的控制和掌握产品质量，从而提高临床用药的安全性，本专利技术提供一种拉罗替尼对映异构体、非对映异构体的检测方法。该检测方法具有分离度良好，灵敏度高，方法简单，适合医药工业上拉罗替尼异构体的检查及质量控制。
[0013]本专利技术采用的技术方案是：
[0014]本专利技术所提供的一种拉罗替尼对映异构体、非对映异构体检测方法，以多糖衍生物涂敷型为填充剂的色谱柱为手性色谱柱，低级烷烃与低级醇混合液为流动相，通过高效液相色谱法，紫外检测器对拉罗替尼对映异构体、非对映异构体进行分离测定。
[0015]以硅胶表面涂敷有直链淀粉
‑
三(3,5
‑
二甲基苯基氨基甲酸酯)为填充剂；以低级烷烃与低级醇混合比为流动相，等度洗脱；流速为0.6～1.0ml/min，柱温为30～40℃，采用紫外检测器进行检测，所述紫外检测器的检测波长为255～264nm。
[0016]所述的填充剂为硅胶表面涂敷有直链淀粉
‑
三(3,5
‑
二甲基苯基氨基甲酸酯)
[0017]所述的手性色谱柱选自大赛璐AD
‑
H柱(CHIRALPAKAD
‑
H(250
×
4.6mm，5μm))。
[0018]所述的低级烷烃为正己烷。
[0019]所述的低级醇为甲醇、无水乙醇或其组合；优选于甲醇、无水乙醇组合，体积比为无水乙醇
‑
甲醇(20:1～100:0)，优选无水乙醇
‑
甲醇(24：1)
[0020]所述的流动相为低级烷烃与低级醇混合比，正己烷
‑
【(无水乙醇
‑
甲醇)(24：1)】(85：15～89：11)，优选正己烷
‑
【(无水乙醇
‑
甲醇)(24：1)】(87.5：12.5)
[0021]所述的流速为0.6～0.8ml/min，优选0.7ml/min。
[0022]所述的柱温为30～40℃，优选35℃。
[0023]所述的紫外检测器的检测波长为254～264nm，本品经紫外扫描，最大吸收在259nm，故优选259℃。
[0024]本专利技术的有益效果如下：
[0025]本专利技术所提供的一种拉罗替尼对映异构体、非对映异构体检测方法，通过综合考虑分析柱、流动相、梯度洗脱程序以及流速、柱温对分离检测的综合影响，使得检测结果达到了最优化，可以将拉罗替尼中的对映异构体、非对映异构体在同一色谱条件进行快速高效的分离，并且该检测方法灵敏度高、专属性强、快速简便、操作方便，可有效控制药品的质量，适用于分离检测拉罗替尼的对映异构体、非对映异构体。
[0026]在现有的分离技术中，一般对映异构体检测多采用正相色谱，非对映异构体检测多采用反相色谱，一般多采用两个方法对上述三个杂质进行分析检测。本专利技术和已有技术相比，其技术进步是显著的，可以将拉罗替尼中的对映异构体、非对映异构体在同一色谱条件进行快速高效的分离检测。
附图说明
[0027]图1为本专利技术中按实施例1条件检测的空白溶液的色谱图；
[0028]图2为本专利技术中按实施例1条件检测的系统适用性溶液的色谱图；
[0029]图3为本专利技术中按实施例1条件检测的供试品溶液的色谱图；
[0030]图4为本专利技术中按实施例1条件检测的定量限溶液的色谱图；
[0031]图5为本专利技术中按实施例1条件检测的检测限溶液的色谱图；
[0032]图6为本专利技术中按实施例2条件检测的系统适用性溶液的色谱图(柱温
‑
30℃)；
[0033]图7为本专利技术中按实施例2条件检测的系统适用性溶液的色谱图(柱温
‑
40℃)；
[0034]图8为本专利技术中按实施例3条件检测的供试品溶液的色谱图(流动相比例
‑
正己烷
‑
【(乙醇
‑
甲醇)(24：1)】(85：15))；
[0035]图9为本专利技术中按实施例3条件检测的供试品溶液的色谱图(流动相比例
‑
正己烷
‑
【(乙醇
‑
甲醇)(24：1)】(89：11))；
[0036]图10为本专利技术中按本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种拉罗替尼对映异构体、非对映异构体检测方法，以多糖衍生物涂敷型为填充剂的色谱柱为手性色谱柱，低级烷烃与低级醇混合液为流动相，通过高效液相色谱法，紫外检测器对拉罗替尼对映异构体、非对映异构体进行分离测定。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的填充剂选自以硅胶表面涂敷有直链淀粉
‑
三(3,5
‑
二甲基苯基氨基甲酸酯)。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的手性色谱柱选自大赛璐AD
‑
H柱(AD
‑
H(250
×
4.6mm，5μm))。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的低级烷烃为正己烷。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的低级醇为甲醇、无水乙醇或其组合；优选于甲醇、无水乙醇组合，体积比为无水乙醇
‑
甲醇(20:1～100:0)，优选...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴其华，葛德培，李强，陈海兵，
申请(专利权)人：安徽联创生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：