一种葛根总黄酮的含量测定方法技术

本发明专利技术提供了一种葛根总黄酮的含量测定方法。通过检测葛根中总黄酮的含量，达到有效地控制产地葛根药材质量的目的。本发明专利技术总黄酮(以葛根素计)在1.60～22.40μg/mL浓度范围内与吸光度线性关系良好，线性方程为y＝0.0709255x+0.00378142，R2＝0.99974；精密度RSD为0.02％，稳定性RSD为1.10％，重复性RSD为1.79％，方法专属性强，精密度高，稳定性好，重复性好。本发明专利技术的方法具体操作简便，试剂和设备成本低廉，适用于实验室以及工业大生产中葛根的质量控制。根的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种葛根总黄酮的含量测定方法

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[0001]本专利技术属于中药材检测
，具体涉及一种葛根总黄酮的含量测定方法。

技术介绍
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[0002]葛根(PuerariaeLobataeRadix)是豆科植物野葛(PuerariaLobata(Willd)Ohwi)的干燥根。葛根中含有丰富的营养成分，《神农本草经》中记载葛根可“主消渴、身大热、呕吐、诸痹、起阴气、解诸毒”。现代医学研究表明其在心血管疾病的治疗中具有显著作用，也被应用于解酒、免疫调节、肝脏保护、抗糖尿病、抗肿瘤、抗病毒、抗炎等方面，是我国应用最为广泛的中药材之一。
[0003]现代科学研究证明，根中存在诸多化学成分，除淀粉外，还有异黄酮类、三萜类、香豆素类、皂苷类、生物碱类、多糖类及人体所必需的氨基酸和矿物质等。目前我国葛根种植地域众多，而各地种植的葛根药材的化学成分及含量均有差异，若化学成分和含量不能达到质量要求，势必会影响临床应用的安全性以及有效性。为确保中药使用的安全有效，对中药材进行准确可靠的质量检测是十分必要。
[0004]目前，《中国药典》仅制定了采用液相色谱对葛根中葛根素进行含量测定的方法，为了更好地控制药材质量，有必要对葛根中的主要药效成分总黄酮进行含量测定，以进一步有效地控制葛根质量，从而保证临床用药疗效。

技术实现思路
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[0005]本专利技术要解决的技术问题是提供一种葛根总黄酮的含量测定方法。该方法操作简便，试剂和设备成本低廉，测定葛根总黄酮稳定性好，便于推广。
[0006]本专利技术提供的技术方案是：
[0007]一种葛根总黄酮的含量测定方法，包括如下步骤：
[0008](1)绘制标准曲线：精密称定葛根素对照品10mg，加溶剂制成80μg/mL的葛根素对照品母液，取适量对照品母液用溶剂稀释为浓度为1.60～22.40μg/mL的系列标准溶液，以溶剂为空白对照，在190～400nm用紫外
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可见分光光度计测定吸光度，绘制标准曲线，得到线性回归方程；
[0009](2)供试品溶液的制备：精密称取过三号筛的葛根药材粉末适量，置于具塞锥形瓶中，精密加入溶剂50ml，称定重量，提取15～45min，放冷，再称定重量，用溶剂补足减失重量，摇匀，滤过，精密吸取滤液0.5ml，置于50ml量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀，即得；
[0010](3)供试品的测定：在190～400nm用紫外
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可见分光光度计测定步骤(2)所述供试品溶液的吸光度，根据线性回归方程计算样品中总黄酮的含量。
[0011]优选为，所述紫外
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可见分光光度计的检测波长为250～350nm。
[0012]进一步优选为，所述紫外
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可见分光光度计的检测波长为250nm。
[0013]本专利技术所用溶剂为水或30％～95％乙醇。
[0014]优选为，溶剂为30％～75％乙醇。
[0015]进一步优选为，溶剂为30％乙醇。
[0016]上述步骤(2)中，所述提取方法为加热回流或超声提取。
[0017]优选为，步骤(2)中，提取方法为加热回流，提取时间为30min。
[0018]优选为，步骤(1)中，所述系列标准溶液浓度分别为1.6μg/mL,3.2μg/mL,4.8μg/mL,6.4μg/mL,8.0μg/mL,9.6μg/mL,12.8μg/mL,16.0μg/mL,19.2μg/mL,22.4μg/mL。
[0019]本专利技术的线性回归方程为y＝0.0709255x+0.00378142，R2＝0.99974。
[0020]本专利技术有益效果如下：
[0021]1、本专利技术提供了一种葛根总黄酮的含量测定方法，在《中国药典》制定的葛根中葛根素含量测定的基础上，增加了对葛根中总黄酮的含量测定，进一步完善了葛根药材的质量检测内容，对葛根药材及相关中成药质量检测标准具有重要意义；
[0022]2、本专利技术葛根总黄酮的检测方法经方法学验证结果表明：总黄酮(以葛根素计)在1.60～22.40μg/mL浓度范围内与吸光度线性关系良好，线性方程为y＝0.0709255x+0.00378142，R2＝0.99974；精密度RSD为0.02％，仪器精密度良好；稳定性RSD为1.10％，供试品溶液在180分钟内稳定；重复性RSD为1.79％，方法重复性良好；本专利技术供试品溶液与对照品溶液在250nm处均有最大吸收，但空白溶剂在此处无干扰，说明本专利技术的检测方法专属性强。
[0023]3、通过本专利技术的方法对不同地区的葛根中总黄酮(以葛根素计)进行测定，实验结果显示葛根素回收率范围为92％～105％，表明回收率良好。
[0024]4、本专利技术采用紫外
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可见分光光度计对葛根中的总黄酮含量进行测定，该方法操作简便，试剂和设备成本低廉，测定葛根总黄酮稳定性好，便于推广。
附图说明
[0025]图1为葛根总黄酮专属性考察结果；
[0026]图2为葛根素标准曲线图。
具体实施方式：
[0027]下面通过具体实施例对本专利技术做进一步的说明，但不用于限制本专利技术的保护范围。
[0028]实施例1：
[0029](1)绘制标准曲线：精密称定葛根素对照品10mg，加30％乙醇制成80μg/mL的葛根素对照品母液，取适量对照品母液用30％乙醇稀释为浓度为1.6μg/mL,3.2μg/mL,4.8μg/mL,6.4μg/mL,8.0μg/mL,9.6μg/mL,12.8μg/mL,16.0μg/mL,19.2μg/m L,22.4μg/mL的系列标准溶液，以30％乙醇为空白对照，在250nm用紫外
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可见分光光度计测定吸光度，绘制标准曲线，得到线性回归方程；
[0030](2)供试品溶液的制备：精密称取过三号筛的葛根药材粉末适量，置于具塞锥形瓶中，精密加入30％乙醇50ml，称定重量，加热回流提取30min，放冷，再称定重量，用30％乙醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密吸取滤液0.5ml，置于50ml量瓶中，加30％乙醇至刻度，摇匀，即得；
[0031](3)供试品的测定：在250nm用紫外
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可见分光光度计测定步骤(2)所述供试品溶液
的吸光度，根据线性回归方程计算样品中总黄酮的含量。
[0032]实施例2：
[0033](1)绘制标准曲线：精密称定葛根素对照品10mg，加水制成80μg/mL的葛根素对照品母液，取适量对照品母液用水稀释为浓度为1.6μg/mL,
[0034]3.2μg/mL,4.8μg/mL,6.4μg/mL,8.0μg/mL,9.6μg/mL,12.8μg/mL,16.0μg/mL,19.2μg/m L,22.4μg/mL的系列标准溶液，以水为空白对照，在190nm用紫外
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可见分光光度计测定吸光度，绘制标准曲线，得到线性回归方程；
[0035](2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种葛根总黄酮的含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)绘制标准曲线：精密称定葛根素对照品10mg，加溶剂制成80μg/mL的葛根素对照品母液，取适量对照品母液用溶剂稀释为浓度为1.60～22.40μg/mL的系列标准溶液，以溶剂为空白对照，在190～400nm用紫外
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可见分光光度计测定吸光度，绘制标准曲线，得到线性回归方程；(2)供试品溶液的制备：精密称取过三号筛的葛根药材粉末适量，置于具塞锥形瓶中，精密加入溶剂50ml，称定重量，提取15～45min，放冷，再称定重量，用溶剂补足减失重量，摇匀，滤过，精密吸取滤液0.5ml，置于50ml量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀，即得；(3)供试品的测定：在190～400nm用紫外
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可见分光光度计测定步骤(2)所述供试品溶液的吸光度，根据线性回归方程计算样品中总黄酮的含量。2.根据权利要求1所述的一种葛根总黄酮的含量测定方法，其特征在于，所述紫外
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可见分光光度计的检测波长为250～350nm。3.根据权利要求2所述的一种葛根总黄酮的含量测定方法，其特征在于，所述紫外
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【专利技术属性】
技术研发人员：谢隼，张飞飞，苟维，王新，王仁兵，符凡朗，
申请(专利权)人：贵州健安德科技有限公司，
类型：发明
国别省市：