通过结构靶向的配体靶向降解致癌microRNA17-92簇制造技术

公开了方法的实施方案，所述方法用于抑制、调节和/或另外影响或调控pri

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】miRNA
‑
x。不靶向或不结合成熟的miRNA。因此，靶向作用能够抑制簇的miRNA
‑
X的生物生成(biogenesis)，以及抑制个体pre
‑
miRNA。这些结构特异性配体也含有取代基，所述取代基具有切割pri
‑
miR
‑
17
‑
92和/或pre
‑
miR
‑
17、pre
‑
miR
‑
18a和pre
‑
miR
‑
20a及其组合的能力，不管是直接地还是通过核酸酶的募集。
[0010]因此，本专利技术的实施方案涉及靶向上述鉴定的pri
‑
miRNA簇和pre
‑
miRNA
‑
X的方法，所述pri
‑
miRNA包括pri
‑
miR
‑
17
‑
92簇中的一种或多种，及所述pre
‑
miRNA
‑
X包括pre
‑
miR
‑
17、pre
‑
miR
‑
18a和/或pre
‑
miR
‑
20a和/或其组合的一种或多种。根据本专利技术，靶向方法的实施方案使化合物实施方案(包括化合物1D、化合物2、化合物5、化合物4FL和化合物7(其结构在下面的段落中列出)，及其任何组合)能与相应的pre
‑
miRNA
‑
X及其组合和pri
‑
miR
‑
17
‑
92结合。此外，化合物实施方案化合物1D构成能确定适当配体结合的试剂或工具，其中最有效的是化合物2。优选地，所述结合是选择性的使得化合物1D、2、5、4FL和7不能与pre
‑
miRNA或pri
‑
miRNA结合，所述pre
‑
miRNA或pri
‑
miRNA不是pre
‑
miRNA
‑
X或pri
‑
miR17
‑
92中的一种或多种。
[0011]本专利技术的实施方案还涉及在细胞水平靶向pri
‑
miR
‑
17
‑
92和pre
‑
miRNA
‑
X的方法，包括细胞系例如TNBC乳腺癌细胞系、MDA
‑
MD
‑
231乳腺癌细胞系、DU
‑
145前列腺癌细胞系和WT9
‑
12多囊肾细胞系。用下述段落中公开的化合物实现靶向。靶向作用使化合物1D、化合物2、化合物5、化合物4FL和化合物7与pri
‑
miR17
‑
92、一种或多种pre
‑
miRNA
‑
X或其组合物结合。结合作用证明非常低的解离常数K
d
和选择性。基于这些
[0012]化合物的选择性和结合能力，认为他们对普通、非致癌细胞(例如正常人细胞和细胞系)的抑制作用是足够微小的，因此这些非致癌细胞不会由于毒性和/或细胞凋亡而死亡。
[0013]本专利技术的实施方案还涉及治疗MDA
‑
MD
‑
231乳腺癌细胞、TNBC乳腺癌细胞、DU
‑
145前列腺癌细胞或WT9
‑
12多囊肾细胞的方法，这些细胞存在于宿主例如实验动物或作为相应疾病存在于人中。所述治疗使化合物2、化合物5和/或化合物7及其任何组合与细胞的pre
‑
miRNA
‑
X和/或pri
‑
miR
‑
17
‑
92结合。根据本专利技术，所述结合抑制pri
‑
miR
‑
17
‑
92和/或pre
‑
miRNA
‑
X的致癌和囊性形成能力。因此，所述抑制可相应地延缓和/或抑制侵袭、细胞凋亡或囊肿形成。
[0014]本专利技术的实施方案涉及用化合物2、化合物5和/或化合物7和/或其任何组合靶向致癌细胞系，还能减少或减弱TNBC细胞系的侵袭性特征、前列腺癌细胞系的抗细胞凋亡特征和囊性肾细胞的囊肿形成特征。前两个方面减弱和/或抑制致癌种子细胞(seed cell)从致癌细胞位点转移至有致癌细胞的宿主的新位点。
[0015]本专利技术的实施方案还用化合物2、化合物5和/或化合物7靶向pri
‑
miR
‑
17
‑
92簇。靶向作用使化合物2、5和/或7和/或其任何组合与pri
‑
miR
‑
17
‑
92簇结合并抑制、延缓和/或减弱该簇的致癌和囊肿形成活性。
[0016]本专利技术的另一实施方案涉及通过将有效剂量的化合物2、化合物5和/或化合物7和/或其任何组合单独或作为药用组合物(其中将选择的化合物与药物上可接受的载体组
合)给药，治疗人乳腺癌、前列腺癌和/或多囊肾病的方法。
[0017]本专利技术的组合物实施方案涉及二聚体类肽化合物(peptidylmimetic compounds)，其能靶向和结合一种或多种pri
‑
miR
‑
17
‑
92或pre
‑
miRNA
‑
X，其包括上述三个pre
‑
miRNA和/或其嵌入簇中的混合中的一种或多种。已知作为先导物识别策略(Inforna)的基于序列的设计使得这些组合物实施方案的形成成为可能。所述Inforna策略公开于Velagapudi，S.P.；Gallo，S.M.；Disney，M.D.，Sequence
‑
based design of bioactive small molecules that target precursor microRNAs.Nat.Chem.Biol.2014，10(4)，291
‑
7and Disney，M.D.；Winkelsas，A.M.；Velagapudi，S.P.；Southern，M.；Fallahi，M.；Childs
‑
Disney，J.L.，Inforna 2.0：a platform for the sequence
‑
based design of small molecules targeting structured RNAs.ACS Chem.Biol.2016，11(6)，1720
‑
8。
[0018]具体地讲，Inforn本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.用于靶向RNA实体的方法，其包含使所述RNA实体与结合组合物接触，其中所述RNA实体是pre
‑
miRNA
‑
X、pri
‑
miR
‑
17
‑
92簇、含有所述pre
‑
miRNA
‑
X和/或pri
‑
R
‑
17
‑
92簇的一种或多种的致癌细胞系、具有所述致癌细胞系的动物宿主或患有致癌性恶性肿瘤的人、或者患有多囊肾病的动物宿主或患多囊肾病的人、或者所述pri
‑
miR
‑
17
‑
92簇和/或pre
‑
RNA
‑
X的成员是起因或诱因的任何疾病，所述pre
‑
miRNA
‑
X选自pre
‑
miR
‑
17、pre
‑
miR
‑
18a、pre
‑
miR
‑
19a、pre
‑
miR
‑
19b
‑
1、pre
‑
miR
‑
20a和pre
‑
miR
‑
92a
‑
1或其任何组合中的一种或多种，所述细胞系是TNBC乳腺癌细胞系、MDA
‑
MD
‑
231乳腺癌细胞系或DU
‑
145前列腺癌细胞系、WT9
‑
12多囊肾细胞系；以及所述结合组合物选自化合物1D、化合物2、化合物5或化合物7或其任何组合中的一种或多种，其中具有n＝0
‑
7的化合物1D是化合物2是化合物5是
化合物7是2.根据权利要求1所述的用于靶向至少一种或多种pre
‑
miRNA
‑
X或者靶向一种或多种包埋于所述pri
‑
miR
‑
17
‑
92簇中的pre
‑
miRNA
‑
X或者靶向所述簇本身的方法，其包含将其中n为0
‑
7的化合物1D与一种或多种选自pre
‑
miR
‑
17、pre
‑
miR
‑
18a、pre
‑
miR
‑
20a或其组合的pre
‑
miRNA
‑
X接触。3.根据权利要求2所述的方法，其中靶向使所述化合物1D与一种或多种所述pre
‑
miRNA
‑
X结合以及所述pre
‑
miRNA
‑
X是分离的、pre
‑
miRNA库的部分或所述pre
‑
miR
‑
17
‑
92簇的部分。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述化合物1D以100
‑
1000nM的K
d
与一种或多种所述pre
‑
miRNA
‑
X结合。5.根据权利要求2、3或4所述的方法，其中具有n为3的化合物1D是化合物2。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述化合物2与所述pre
‑
miRNA
‑
X或其组合的一种或多种结合。7.根据权利要求2
‑
6中任何一项所述的方法，其中所述结合是选择性的，并且所述pre
‑
miRNA
‑
X是pri
‑
miR
‑
17
‑
92簇的部分或者是一种或多种所述pre
‑
miRNA
‑
X。8.根据权利要求2
‑
7中任何一项所述的方法，其中pre
‑
miR
‑
17是被靶向的和被结合的。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述pre
‑
miR
‑
17存在于HEK293胚肾细胞中，并且所述结合抑制所述miR
‑
17生物生成。10.根据权利要求1所述的用于靶向pre
‑
miRNA的方法，其包含使pre
‑
miRNA与化合物2接触，其中所述pre
‑
miRNA包含pre
‑
miR
‑
17、pre
‑
miR
‑
18a、pre
‑
miR
‑
20a、其组合的一种或多种或者作为pri
‑
miR17
‑
92的部分。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述靶向使化合物2结合至所述pre
‑
miRNA。12.根据权利要求10所述的方法，其中所述靶向使化合物2以100
‑
140nM的K
d
与所述pre
‑
miRNA
‑
X结合。13.根据权利要求2
‑
12中任何一项所述的方法，其中所述靶向结合是选择性的，以便不是一种或多种pre
‑
miRNA
‑
X或具有包埋的pre
‑
miRNA
‑
X的pri
‑
miRNA的pre
‑
miRNA或pri
‑
miRNA不被结合。14.根据权利要求1
‑
13中任何一项所述的方法，其中通过将所述细胞系与化合物2接触来处理TNBC乳腺癌细胞系，以及成熟miR
‑
17、miR
‑
18a、miR
‑
20a或其组合中一种或多种的细胞水平被降低。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述成熟miR
‑
17、miR
‑
18a和miR
‑
20a或其组合中一种或多种的细胞水平被降低不影响所述TNBC细胞miR
‑
17
‑
92簇的其他miRNA的细胞水平。16.根据权利要求1
‑
13中任何一项所述的方法，其中通过使所述细胞系与化合物2接触来处理MDA
‑
MB
‑
231乳腺癌细胞系。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述接触步骤靶向pre
‑
miR
‑
17和pre
‑
miR
‑
20a或其组合的一种或多种。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述靶向使化合物2抑制miR
‑
17和miR
‑
20a或其组合的一种或多种。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述抑制miR
‑
17和miR
‑
20a或其组合的一种或多种致使MDA
‑
MB
‑
231癌细胞的ZBTB4蛋白抑制物水平的增加。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述ZBT4 mRNA和相应蛋白质被去抑制。21.根据权利要求19或20所述的方法，其中所述ZBTB4蛋白水平的增加抑制或延缓MDA
‑
MB
‑
231乳腺癌细胞的侵袭特性。22.根据权利要求1
‑
13中任何一项所述的方法，其中通过使所述细胞系与化合物2接触来处理前列腺癌细胞系，并且成熟miR
‑
17、miR
‑
18a、miR
‑
20a或其组合中一种或多种的细胞水平被降低。23.根据权利要求22所述的方法，其中所述成熟miR
‑
17、miR
‑
18a和miR
‑
20a或其组合中一种或多种的细胞水平被降低不影响所述前列腺癌细胞miR
‑
17
‑
92簇的其他成熟miRNA的细胞水平。24.根据权利要求1
‑
13中任何一项所述的方法，其中通过使所述细胞系与化合物2接触来处理DU
‑
145前列腺癌细胞系。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述接触步骤靶向pre
‑
miR
‑
17、pre
‑
miR
‑
18a和pr
‑
iR
‑
20a或其组合的一种或多种。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述靶向使化合物2抑制pre
‑
miR
‑
18a和pre
‑
miR
‑
20a的一种或多种。27.根据权利要求26所述的方法，其中所述pre
‑
miR
‑
18a的抑制致使DU
‑
145前列腺癌细胞的Stk4蛋白的增加。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述Stk4 mRNA和相应蛋白被去抑制。29.根据权利要求27或28所述的方法，其中所述Stk4蛋白水平的增加抑制或延缓DU
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：佛罗里达大学研究基金公司，
类型：发明
国别省市：