确定新冠疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法技术

技术编号:36817161 阅读:17 留言:0更新日期:2023-03-12 00:31
本发明专利技术提供了一种确定新冠疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法,具体地,本发明专利技术提供了一种检测疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法,包括:(a)提供一待测样品,所述待测样品为血液样品,所述待测样品为疫苗接种后的样品;(b)测定所述的待测样品中的免疫细胞亚群的百分比或免疫细胞表面功能标志物的表达强度;和(c)加入抗原刺激物,从而获得经抗原刺激的待测样品;(d)检测所述经抗原刺激的待测样品中的细胞因子的含量和特异性抗体的含量;(e)根据免疫细胞亚群的百分比或免疫细胞表面功能标志物的表达强度、细胞因子的含量和特异性抗体的含量,从而获得疫苗介导的保护免疫力应答状态。本发明专利技术的方法可高准确性、全面性的评估疫苗介导的保护免疫力应答状态。评估疫苗介导的保护免疫力应答状态。

【技术实现步骤摘要】
确定新冠疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法


[0001]本专利技术属于生物检测领域,具体地,本专利技术涉及确定新冠疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法。

技术介绍

[0002]严重急性呼吸综合征冠状病毒2导致的新型冠状病毒肺炎已经成为全世界共同面对的新发突发性传染病。该疾病具有传播速度快、致死率高、潜伏期长且潜伏期即具有传染性等特征。
[0003][0004]疫苗包含特定生物体的弱化或灭活部分(抗原),可在体内引发免疫应答。这种弱化的版本不会在接受疫苗的人身上引起疾病,但却会促使其免疫系统做出应答,且程度与针对实际病原体的第一次应答相当。对于一些COVID

19疫苗,需要接种两剂。第一剂是首次为免疫系统提供抗原(刺激产生抗体的蛋白质),启动免疫应答。第二剂起到了增强的作用,确保免疫系统产生长效抗体和发展记忆细胞。通过这种方式,身体可受到训练以对抗特定的致病生物,建立对病原体的记忆,以便在未来暴露时能快速对抗病原体。
[0005]疫苗本身的效价需要进行评估,另因疫苗本身的限制,并不能百分之百保护接种者,对于疫苗接种后形成的保护免疫力的应答状态,有必要进行评估确定。
[0006]当疫苗被注射到肌肉中,树突状细胞被通过模式识别受体(PRR)识别蛋白质抗原而被激活,然后被运送到引流淋巴结。在这里,树突状细胞上的MHC分子呈递疫苗蛋白抗原的多肽,通过T细胞受体(TCR)激活T细胞,可溶性疫苗蛋白抗原还可以与B细胞受体(BCR)结合传递免疫应答信号。T细胞协助激活B细胞,促进生发中心的形成和免疫球蛋白的类别转换,主动分泌针对疫苗蛋白的高亲和力特异性抗体。CD8+记忆T细胞在遇到病原体时可以迅速增殖,而CD8+效应T细胞对于清除受感染的细胞很重要。
[0007]目前,针对SARS

CoV

2的免疫保护相关因子尚未完全确定。
[0008]免疫细胞是免疫系统的基本组成成分,随着遗传和环境因素的影响,机体内各类免疫细胞会因个体差异引起不同数量的分化,形成不同比例的免疫细胞亚群,不同的免疫细胞细胞亚群分工明确,功能强大。当机体受到疫苗刺激的过程中,免疫细胞亚群的数目比例也会在疾病发展过程中产生变化。细胞免疫在控制 SARS

CoV

2感染方面也十分重要。
[0009]细胞因子具有广泛的生物学活性,能够通过结合相应受体调节细胞生长、分化和效应,调控免疫应答。
[0010]体液免疫的中和抗体能够结合新冠病毒表面蛋白,并阻断病毒蛋白与细胞表面特异性受体ACE

2结合,进而阻止病毒入侵细胞(非中和抗体无此功能)。
[0011]然而目前对于疫苗接种后形成的保护免疫力的应答状态的评估方法仅检测当前特异性抗体含量,具有覆盖面窄、不够全面,无法评估免疫系统其他重要组分和无法评估疫苗介导的保护免疫力潜力的。
[0012]因此,本领域迫切需要开发一种具有高准确性且能够全面疫苗接种后形成的保护
免疫力的应答状态的方法。

技术实现思路

[0013]本专利技术的目的是提供一种具有高准确性且能够快速评估疫苗接种后形成的保护免疫力的应答状态的方法。
[0014]本专利技术的第一方面,提供了一种检测疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法,包括:
[0015](a)提供一待测样品,所述待测样品为血液样品,所述待测样品为疫苗接种后的样品;
[0016](b)测定所述的待测样品中的免疫细胞亚群的百分比或免疫细胞表面功能标志物的表达强度;和
[0017](c)加入抗原刺激物,从而获得经抗原刺激的待测样品;
[0018](d)检测所述经抗原刺激的待测样品中的细胞因子的含量和特异性抗体的含量;
[0019](e)根据免疫细胞亚群的百分比或免疫细胞表面功能标志物的表达强度、细胞因子的含量和特异性抗体的含量,从而获得疫苗介导的保护免疫力应答状态。
[0020]在另一优选例中,所述所述待测样品来自疫苗接种后的人员。
[0021]在另一优选例中,所述疫苗包括灭活疫苗、RNA疫苗、重组蛋白疫苗。
[0022]在另一优选例中,所述血液样品为全血样品。
[0023]在另一优选例中,所述血液样品包括外周血。
[0024]在另一优选例中,所述疫苗包括冠状病毒疫苗。
[0025]在另一优选例中,所述冠状病毒包括新型冠状病毒。
[0026]在另一优选例中,所述免疫细胞亚群的百分比包括免疫细胞亚群在外周血总白细胞(CD45+总白细胞)或免疫细胞父群细胞(比如,CD3+T细胞、CD4+ T细胞、CD8+T细胞、CD19+B细胞等)中的百分比。
[0027]在另一优选例中,所述免疫细胞包括先天性免疫细胞和/或适应性免疫细胞。
[0028]在另一优选例中,所述先天性免疫细胞包括粒细胞及其亚群、单核细胞及其亚群、树突状细胞(DC)及其亚群、自然杀伤细胞(NK细胞)及其亚群。
[0029]在另一优选例中,所述适应性免疫细胞包括T细胞及其亚群、B细胞及其亚群,较佳地,CD4+T细胞、CD4+记忆T细胞、幼稚CD4+T、CD8+T细胞、CD8+ 效应T细胞、记忆B细胞、浆母细胞。
[0030]在另一优选例中,所述免疫细胞表面功能标志物选自下组:CD25、CD69、 CD28、CD38、HLADR、CCR7、CD64、CD57、ICOS、CD39、CD86、CD24、NKp46、 NKG2D或其组合。
[0031]在另一优选例中,通过下组的一种或多种方法对所述免疫细胞亚群的百分比进行检测:流式细胞术。
[0032]在另一优选例中,通过下组的一种或多种方法对所述免疫细胞表面功能标志物的表达强度进行检测:流式细胞术、蛋白质免疫印迹(Western Blot)。
[0033]在另一优选例中,所述抗原选自下组:严重急性呼吸综合征冠状病毒2棘突蛋白受体结合区域(Recombinant receptor binding domain,RBD)、严重急性呼吸综合征冠状病毒2棘突蛋白S1亚基(Spike S1)或其组合。
[0034]在另一优选例中,所述抗原的序列如SEQ ID NO.:1或2所示。
[0035]在另一优选例中,所述细胞因子选自下组:IFN

g、TNF

a、IL

2、IL

6、 IL

10、或其组合。
[0036]在另一优选例中,所述细胞因子含量包括细胞因子在经抗原刺激的待测样品中的浓度。
[0037]在另一优选例中,通过下组的一种或多种方法对所述细胞因子含量进行检测:酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、基于微球的多因子检测(Cytokine Bead Assays)、基于Luminex平台的多因子检测、基于MS本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法,其特征在于,包括:(a)提供一待测样品,所述待测样品为血液样品,所述待测样品为疫苗接种后的样品;(b)测定所述的待测样品中的免疫细胞亚群的百分比或免疫细胞表面功能标志物的表达强度;和(c)加入抗原刺激物,从而获得经抗原刺激的待测样品;(d)检测所述经抗原刺激的待测样品中的细胞因子的含量和特异性抗体的含量;(e)根据免疫细胞亚群的百分比或免疫细胞表面功能标志物的表达强度、细胞因子的含量和特异性抗体的含量,从而获得疫苗介导的保护免疫力应答状态。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述疫苗包括冠状病毒疫苗。3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,通过下组的一种或多种方法对所述免疫细胞亚群的百分比进行检测:流式细胞术。4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,通过下组的一种或多种方法对所述免疫细胞表面功能标志物的表达强度进行检测:流式细胞术、蛋白质免疫印迹(Western Blot)。5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,通过下组的一种或多种方法对所述细胞因子含量进行检测:酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、基于微球的多因子检测(Cytokine Bead Assays)、基于Luminex平台的多因子检测、基于MSD(Meso Scale Discovery)平台的电化学发光超敏多因子检测。6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,通过下组的一种或多种方法对所述特异性抗体的含量进行检测:酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、基于微球的多因子检测(Cytokine Bead Assays)、基于Luminex平台的多因子检测、基于MSD(Meso Scale Discovery)平台的电化学发光超敏多因子检测。7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述疫苗介导的保护免疫力应答状态包括低应答状态、中应答状态、高应答状态。8.一种确定疫苗介导的保护免疫力应答状态的方法,其特征在于,包括:(a)提供用于所述分析的数据集,所述数据集包括:来自免疫细胞亚群的百分比或免疫细胞表面功能标志物的表达强度的第1数据集、来自细胞因子的含量的第2数据集和来自特异性抗体的含量的第3数据集,所述各数据集来自疫苗接种后的样品,并且所述第2和第3数据集还来自经抗原刺激的待测样品;(b)对各个所述数据集进行统计分析,从而获得各个数据集对应的低应答范围、中应答范围、高应答范围的数据;(c)基于所述各个数据集对应的低应答范围、中应答范围、高应答范围的数据,从而确定疫苗介导的保护免疫力应答状态。9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述步骤(b)中,用如下计算方式对各个所述数据集进行统计分析:1)定义和计算以下对象:

第一三分位数,等于该数据集中最大值+(最...

【专利技术属性】
技术研发人员:钱峰高健罗雅丽韩静轩
申请(专利权)人:上海国际人类表型组研究院
类型:发明
国别省市:

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