一种左亚叶酸钙的质量控制方法技术

本发明专利技术提供了一种左亚叶酸钙的质量控制方法，涉及药品质量控制领域。本发明专利技术首先提供了一种左亚叶酸钙，所述左亚叶酸钙中杂质哌嗪的重量百分比含量≤0.1％。本发明专利技术还提供了一种定性和/或定量检测左亚叶酸钙中杂质的方法。本发明专利技术方法对供试品溶液进行简单的前处理后直接进样，采用气相色谱法进行检测，该检测方法易于操作，影响因素少，重现性好，运行时间短，成本低；并且所用试剂对环境破坏小，对操作人员健康影响小；此外本发明专利技术检测方法的灵敏度高，可准确检测出左亚叶酸钙中杂质的含量，尤其是哌嗪的含量。采用本发明专利技术检测方法可以对左亚叶酸钙进行质量控制，具有良好的应用前景。具有良好的应用前景。具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种左亚叶酸钙的质量控制方法


[0001]本专利技术涉及药品质量控制领域，具体涉及一种左亚叶酸钙的质量控制方法。

技术介绍

[0002]左亚叶酸钙，又名左旋甲酰四氢叶酸钙，常以五水合物形式存在，分子式C
20
H
21
CaN7O7·
5H2O，分子量601.58，化学名为6S(
‑
)
‑
N
‑
[4
‑
[(2
‑
氨基
‑5‑
甲酰基
‑
1，4，5，6，7，8
‑
六氢
‑4‑
氧代
‑6‑
蝶啶基)甲基]氨基]苯甲酰
‑
L
‑
谷氨酸钙盐五水化合物，为白色至浅黄色结晶或无定形粉末。左亚叶酸钙是肿瘤辅助用药，用于大剂量使用甲氨喋呤治疗骨肉瘤后的中毒解救；与5
‑
氟尿嘧啶合用，用于治疗胃癌和结直肠癌。其结构式为：
[0003][0004]左亚叶酸钙的生产工艺为化学合成，现有的合成工艺在制备亚叶酸钙粗品的最后一步，以及从粗品中提纯左亚叶酸钙时，常常需要用到试剂哌嗪，容易导致哌嗪在终产品中的残留。一方面，亚叶酸钙由5,10
‑
亚甲基四氢叶酸经碱水解开环制得，哌嗪为该步骤中常用的碱试剂，反应路线如下，例如可参见公开号为CN104045640A的专利申请：
[0005][0006]另一方面，从亚叶酸钙粗品中提纯左亚叶酸钙时(与其光学异构体右亚叶酸钙分离)，也涉及到哌嗪的使用，例如可参见公开号为WO1993017022A1和WO1995033749A1的专利申请。因此，有必要检测哌嗪是否存在左亚叶酸钙中。哌嗪又名对二氮己环，为白色或淡黄色固体，分子式C4H
10
N2，分子量86.14，结构式为：
[0007][0008]哌嗪含量多少直接影响左亚叶酸钙作为原料药的质量，因此哌嗪含量控制对于左亚叶酸钙的产品质量控制方面具有重要的意义。
[0009]然而，目前尚未见对左亚叶酸钙中哌嗪进行检测及质量控制的报道。经检索，公开号为CN110927091A的专利申请公开了一种检测哌嗪水溶液中哌嗪含量的方法，其采用苯醌和哌嗪分子产生氧化还原反应，对苯醌进行显色，通过比色法测定哌嗪分子的含量，该检测
方法要进行化学反应，过程复杂，反应转化率影响检测结果，且仅适用于哌嗪作为主成分的检测，不适用于哌嗪作为左亚叶酸钙中杂质含量的检测，因为左亚叶酸钙中哌嗪含量较低，导致供试品浓度过大，无法直接进样，且采用苯醌和少量哌嗪分子产生氧化还原反应，对苯醌进行显色时，会被左亚叶酸钙颜色(淡黄色)干扰，同时苯醌和哌嗪反应时可能会发生苯醌和左亚叶酸钙反应，影响检测结果。公开号为CN113514565A的专利申请公开了一种高哌嗪中残留物哌嗪的检测方法，但是该检测方法的检测限为6.25μg/ml，供试品浓度为100mg/ml，本专利技术的专利技术人在探索检测方法时发现，供试品浓度太大并不适用于左亚叶酸钙中哌嗪的检测，会干扰哌嗪出峰，甚至造成色谱柱堵塞，且该检测方法的灵敏度有待进一步提高。总而言之，现有的哌嗪检测方法并不适用于左亚叶酸钙中哌嗪的检测。

技术实现思路

[0010]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种左亚叶酸钙的质量控制方法。具体涉及一种左亚叶酸钙的质量控制标准及左亚叶酸钙中杂质的检测方法，用于对左亚叶酸钙中杂质的含量进行检测，进一步对左亚叶酸钙进行质量控制。
[0011]本专利技术提供了一种左亚叶酸钙，所述左亚叶酸钙中杂质哌嗪的重量百分比含量≤0.1％。
[0012]本专利技术还提供了一种定性和/或定量检测左亚叶酸钙中杂质的方法，它包括如下步骤：
[0013](1)配制供试品溶液：称取左亚叶酸钙供试品，加入水和丙酮，混合均匀后离心，取上清液，即得；
[0014](2)采用气相色谱法检测。
[0015]进一步地，所述杂质为哌嗪。
[0016]本专利技术的专利技术人在探索检测方法时发现，如果参考现有的哌嗪检测方法，以单一溶剂溶解左亚叶酸钙样品并稀释制备的供试品溶液，进样后哌嗪往往不会出峰。专利技术人因此对供试品溶液的制备方法作了改进，并经过考察，在水和丙酮混合体系中进行前处理能够有效改善对哌嗪出峰的干扰，为左亚叶酸钙中哌嗪的准确检测提供可能。
[0017]进一步地，步骤(1)中，所述供试品溶液的制备方法包括以下步骤：
[0018]1)称取左亚叶酸钙供试品，加水至完全溶解；
[0019]2)加入丙酮混合均匀，离心，取上清液，即得。
[0020]进一步地，步骤(1)中，水：丙酮的体积比为2：(2.4～3.6)；
[0021]和/或，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为4～6mg/ml。
[0022]进一步地，步骤(1)中，水：丙酮的体积比为2：3；
[0023]和/或，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为5mg/ml。
[0024]本专利技术中，所述供试品溶液的浓度以左亚叶酸钙供试品的取用量计。
[0025]进一步地，步骤(2)中，所述气相色谱法采用5％苯基
‑
95％甲基
‑
聚硅氧烷固定相色谱柱；
[0026]所述气相色谱法的升温程序如下：初始柱温105～115℃，维持2～4min，以20～30℃/min速率升温至195～205℃，维持2～4min。
[0027]进一步地，所述色谱柱为CP
‑
Sil 8CB；
[0028]和/或，所述升温程序如下：初始柱温110℃，维持2min，以30℃/min速率升温至200℃，维持4min。
[0029]进一步地，所述CP
‑
Sil 8CB的长度为30m；和/或，所述CP
‑
Sil 8CB的内径为0.32mm；和/或，所述CP
‑
Sil 8CB的膜厚为1μm。
[0030]进一步地，步骤(2)中，所述气相色谱法的进样体积1～2μl，分流比2:1；
[0031]和/或，所述气相色谱法的载气为氮气，流速为0.8～1.2ml/min；
[0032]和/或，所述气相色谱法的进样口温度为220～240℃；
[0033]和/或，所述气相色谱法的检测器温度为230～250℃；
[0034]和/或，所述气相色谱法采用外标法计算杂质含量；
[0035]优选地，所述进样体积2μl，分流比2:1；
[0036]和/或，所述流速为1.0ml/min；
[0037]和/或，所述气相色谱法的进样口温度为240℃；
[0038]和/或，所述气相色谱法的检测器温度为250℃。
[0039]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0040](1)采用本专利技术方法对待测样品进行前处理，能够有效减少样品成分对杂质哌嗪检测的干扰，进行处理后的供试品溶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种左亚叶酸钙，其特征在于：所述左亚叶酸钙中杂质哌嗪的重量百分比含量≤0.1％。2.一种定性和/或定量检测左亚叶酸钙中杂质的方法，其特征在于：它包括如下步骤：(1)配制供试品溶液：称取左亚叶酸钙供试品，加入水和丙酮，混合均匀后离心，取上清液，即得；(2)采用气相色谱法检测。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述杂质为哌嗪。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述供试品溶液的制备方法包括以下步骤：1)称取左亚叶酸钙供试品，加水至完全溶解；2)加入丙酮混合均匀，离心，取上清液，即得。5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，水：丙酮的体积比为2：(2.4～3.6)；和/或，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为4～6mg/ml。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，水：丙酮的体积比为2：3；和/或，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为5mg/ml。7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述气相色谱法采用5％苯基
‑
95％甲基
‑
聚硅氧烷固定相色谱柱；所述气相色谱法的升温程序如下：初始柱温105～115℃，维持2～4min，以20...

【专利技术属性】
技术研发人员：董泽科，付李，胡和平，丁兆，李晓芬，
申请(专利权)人：四川汇宇海玥医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：