一种同型半胱氨酸检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种同型半胱氨酸检测试剂盒，包含试剂R1、试剂R2、试剂R3和试剂R4，所述试剂R1中包含S

【技术实现步骤摘要】
一种同型半胱氨酸检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及体外检测
，涉及一种同型半胱氨酸检测试剂盒。

技术介绍

[0002]同型半胱氨酸(HCY)是一种含硫氨基酸，由细胞内的甲硫氨酸脱甲基生成。同型半胱氨酸在体外循环时，大部分以与血浆蛋白结合的氧化形式存在，即通过二硫键与血浆中的白蛋白结合形成蛋白
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HCY。只有少量还原型同型半胱氨酸和二硫化物同型半胱氨酸(HCY
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SS
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HCY)存在于血液中。总同型半胱氨酸是指血清或血浆中所有类型的同型半胱氨酸(游离HCY和白蛋白结合型)。
[0003]总同型半胱氨酸浓度极度增高的情况见于高胱氨酸尿症，它是一种罕见的同型半胱氨酸代谢酶遗传性缺陷。高胱氨酸尿症的症状表现为智力障碍、早期动脉粥样硬化及动静脉血栓。除此之外，一些非重度遗传缺陷也会引起总同型半胱氨酸水平的中度增高。对同型半胱氨酸水平上升与心血管疾病(CVD)之间的关系进行了调查研究，结果发现同型半胱氨酸是风险评估中的重要标志物。现已证明存在已知冠状动脉疾病(CAD)情况下，同型半胱氨酸是CAD相关死亡的独立标志物。对于中度风险患者，同型半胱氨酸水平升高与冠状动脉钙化的程度相关。这些患者体内同型半胱氨酸水平升高是冠心病(CHD)的独立危险因素。
[0004]目前，HCY多采用生化酶循环法进行检测。但这方法存在不足：灵敏度不高、容易收到干扰，无法满足临床大量样本准确检测的要求。
[0005]化学发光免疫分析法是近年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分技术。检测原理是以发光物质作为检测基础。该方法灵敏度高、检测范围宽，是免疫学检测的重要发展方向。
[0006]中国专利文献(CN 114813712 A)公开了一种同型半胱氨酸检测试剂盒及同型半胱氨酸的检测方法，所述同型半胱氨酸检测试剂盒包括第一试剂、第二试剂、第三试剂以及第四试剂，所述第一试剂为包被有SAH抗体的磁微粒工作液，所述第二试剂为碱性磷酸酶标记的SAH衍生物酶标工作液，所述第三试剂为还原剂缓冲液，所述还原剂为DTT、TCEP和β巯基乙醇中的至少一种，所述第四试剂为SAHH和Ado的缓冲液。但该技术方案中的同型半胱氨酸检测试剂盒的稳定性仍不高。
[0007]中国专利文献(CN 109001462 A)公开了一种同型半胱氨酸检测试剂盒，包括试剂R1、试剂R2，试剂R1组分为丝氨酸0.5
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20mmol/L、HCY还原剂0.5
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10mmol/L、NADH 0.5
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1.8g/L、LDH 10
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200KU/L、缓冲液20
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100mmol/L；试剂R2组分为胱硫醚β
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合成酶0.5
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10KU/L、胱硫醚β
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分解酶10
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50KU/L、缓冲液20
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100mmol/L。该技术方案中同型半胱氨酸检测试剂盒的灵敏度与稳定性仍不高。
[0008]因此，适用于HCY检测的、具有灵敏度高、准确性高、稳定性高的化学发光免疫检测试剂盒，依然是目前需要解决的问题。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的是提供一种同型半胱氨酸检测试剂盒，具有稳定性高、灵敏度高、准确性高。
[0010]为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是，该同型半胱氨酸检测试剂盒，包含试剂R1、试剂R2、试剂R3和试剂R4，所述试剂R1中包含S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸抗体包被的磁微粒和基础缓冲液一；所述试剂R2中包含重组S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸水解酶(SAHH)和基础缓冲液二；所述试剂R3中包含被可检测标记物标记的S
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腺苷
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L
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半胱氨酸结合物和基础缓冲液三；试剂R4中包含二硫苏糖醇(DTT)和基础缓冲液四。
[0011]采用上述技术方案，在试剂R1中含有消泡剂丙三醇，防止与磁微粒混匀时出现气泡而影响加样，提高了检测体系的稳定性；此外，同型半胱氨酸检测试剂盒用于HCY检测，具有灵敏度高和准确性高。
[0012]优选地，所述基础缓冲液一、基础缓冲液二、基础缓冲液三和基础缓冲液四均包括pH值调节剂、无机盐离子和表面活性剂，所述pH值为磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液和HEPES缓冲液中的一种或多种混合；所述无机盐离子为氯化钠或/和氯化钾；所述表面活性剂为Tween、SPAN、曲拉通、EMULGEN系列表面活性剂中的一种或几种混合。对于pH值调节剂的用量，可自行选择；无机盐离子是指一类维持溶液的离子浓度处于相对稳定平衡状态的试剂。对于无机盐离子的种类，本专利技术选自氯化钠、氯化钾中的一种或多种；对于无机盐离子的用量，可自行选择；pH值调节剂是指保持溶液的pH值相对稳定的试剂；表面活性剂是指加入少量能够使其溶液体系的界面状态发生明显变化的物质，其具有固定的亲水亲油基团且在溶液的表面能够定向排列；对于表面活性剂用量，可自行选择。
[0013]优选地，所述基础缓冲液一、基础缓冲液二和基础缓冲液三还包括稳定剂，所述稳定剂中包括牛血清白蛋白，所述牛血清白蛋白的含量为10～20g/L；所述基础缓冲液一中还包括消泡剂，所述消泡剂为丙三醇。在试剂R1中含有消泡剂丙三醇，防止与磁微粒混匀时出现气泡而影响加样，提高了检测体系的稳定性；此外，该同型半胱氨酸检测试剂盒具有稳定性高、灵敏度高、准确性高。
[0014]优选地，所述试剂R1中的S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸抗体包被的磁微粒的用量为0.01～2.5mg/mL；所述S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸抗体为特异性结合S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸的免疫球蛋白分子及其片段。
[0015]优选地，所述试剂R2中的重组S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的浓度为0.1～50μg/mL。
[0016]优选地，所述试剂R3中的可检测标记物标记的S
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腺苷
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L
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半胱氨酸结合物是指吖啶酯标记的S
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腺苷
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L
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半胱氨酸结合物的用量浓度为0.2～2μg/mL。“可检测标记物”为“吖啶类化学发光物质”；“吖啶类化学发光物质”是指吖啶酯及其衍生物、吖啶磺酰胺化学发光物质和光泽精，其适用于化学发光免疫分析系统。在碱性H2O2溶液中，分子受到过氧化氢离子进攻时，生成不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2和电子激发态的N
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甲基吖啶酮，当其本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，包含试剂R1、试剂R2、试剂R3和试剂R4，所述试剂R1中包含S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸抗体包被的磁微粒和基础缓冲液一；所述试剂R2中包含重组S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸水解酶和基础缓冲液二；所述试剂R3中包含被可检测标记物标记的S
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腺苷
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L
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半胱氨酸结合物和基础缓冲液三；试剂R4中包含二硫苏糖醇和基础缓冲液四。2.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述基础缓冲液一、基础缓冲液二、基础缓冲液三和基础缓冲液四均包括pH值调节剂、无机盐离子和表面活性剂，所述pH值为磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液和HEPES缓冲液中的一种或多种混合；所述无机盐离子为氯化钠或/和氯化钾；所述表面活性剂为Tween、SPAN、曲拉通、EMULGEN系列表面活性剂中的一种或几种混合。3.根据权利要求2所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述基础缓冲液一、基础缓冲液二和基础缓冲液三还包括稳定剂，所述稳定剂中包括牛血清白蛋白，所述牛血清白蛋白的含量为10～20g/L；所述基础缓冲液一中还包括消泡剂，所述消泡剂为丙三醇。4.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸抗体包被的磁微粒的用量为0.01～2.5mg/mL；所述S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸抗体为特异性结合S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸的免疫球蛋白分子及其片段。5.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的重组S
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腺苷
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L
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同型半胱氨酸水解酶的浓度为0.1～50μg/mL。6.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R3中的可检测标记物标记的S
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腺苷
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半胱氨酸结合物是指吖啶酯标记的S
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腺苷
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L
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半胱氨酸结合物的用量浓度为0.2～2μg/mL。7.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：许行尚，杰弗瑞，
申请(专利权)人：江苏华控生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：