鉴定IL-17途径的调节剂的方法技术

描述了鉴定调节白介素

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】鉴定IL
‑
17途径的调节剂的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据35U.S.C.
§
119(e)要求2020年4月30日提交的美国临时申请号63/017,960的优先权，其全部公开内容据此以引用方式并入本文。


[0003]专利技术涉及用于鉴定调节IL
‑
17途径的药剂的方法、组合物和试剂盒。

技术介绍

[0004]白介素
‑
17(IL
‑
17)是由活化的T辅助性17(Th17)细胞、CD8+ T细胞、γδT细胞、ILC3和NK细胞响应于细胞因子诸如IL
‑
23、IL
‑
1β和TGF
‑
β而分泌的细胞因子。Il
‑
17调节介体的产生，该介体诸如来自多种细胞类型的抗微生物肽、促炎性细胞因子和趋化因子，该多种细胞类型包括参与炎症或宿主防御中的组织损伤的中性粒细胞和病理学的募集的成纤维细胞和滑膜细胞。IL
‑
17也与其他细胞因子(诸如TNF
‑
α和IL
‑
Iβ)协同作用，以增强促炎性环境。
[0005]由于其参与免疫调节功能，正在研究IL
‑
17的抑制剂作为自身免疫疾病诸如银屑病、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎和多发性硬化症的可能治疗。银屑病是常见的慢性炎性皮肤病，其病因复杂，涉及遗传风险因素和环境触发因素。银屑病是由过度增生的角质细胞和浸润的活化免疫细胞之间的慢性相互作用引起的(Harden J.等人，J Autoimmun.2015；64：66
‑
73)。IL
‑
17是银屑病中白介素
‑
23(IL
‑
23)下游的促炎性细胞因子和主要介体。IL
‑
17直接作用于角质细胞以引起炎症反应，并且中和IL
‑
17或阻断其受体的抗体已成为银屑病患者的高效药物(Ha H.
‑
L.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2014；111(33)：E3422
‑
3431。虽然口服小分子IL
‑
17途径拮抗剂尚未进入后期临床试验，但它们仍然是有吸引力的发现领域，因为它们的开发可能会为许多无法获得生物制剂的患者拓宽治疗选择。因此，鉴定抑制IL
‑
17途径的小分子将为银屑病以及其他IL
‑
17驱动的自身免疫疾病提供治疗机会。

技术实现思路

[0006]因此，需要开发鉴定IL
‑
17途径的抑制剂的方法。本专利技术通过提供用于鉴定调节IL
‑
17途径的药剂的组合物和方法来满足这种需要。
[0007]在一般方面，本文公开了鉴定调节IL
‑
17途径的药剂的方法。
[0008]在一些实施方案中，该方法包括：
[0009]a)使细胞与IL
‑
17，优选地IL
‑
17A，或T细胞条件培养基接触；
[0010]b)使细胞与药剂接触；
[0011]c)将细胞与IL
‑
17或T细胞条件培养基和药剂一起孵育；
[0012]d)在孵育步骤后收集细胞上清液；
[0013]e)检测细胞上清液中粒细胞集落刺激因子(G
‑
CSF)的水平；以及
[0014]f)将与药剂接触的细胞上清液中的G
‑
CSF水平与对照细胞上清液进行比较，其中
与对照细胞上清液相比，与药剂接触的细胞上清液中的G
‑
CSF水平的调节表明药剂能够调节IL
‑
17途径。
[0015]在某些实施方案中，在细胞与药剂接触后24小时收集细胞上清液。
[0016]在某些实施方案中，该方法还包括：
[0017]a)收集细胞；
[0018]b)在孵育步骤后，检测细胞中选自DEFB4A、S100A7A、SAA2、CCL20、RNASE7、SAA4、IL
‑
23A、S100A12、DEFB103A、C15orf48、ZC3H12A、SAA1、SPRR2B、PRSS22、CXCL1、IL
‑
36G、NFKBIZ、IL
‑
8、PLAT、CXCL5、PDZK1IP1、RSAD2、KRT78、SLC39A2、CSF3、LCN2、SPRR3、DHRS9、GLUL、RHCD、CXCL2、SERPINB3和S100P的一个基因或一组基因的表达水平；
[0019]c)将与药剂接触的细胞的一个基因或一组基因的表达水平与对照细胞进行比较，其中与对照细胞相比，与药剂接触的细胞中一个或多个基因的表达水平的调节证实该药剂能够调节IL
‑
17途径。
[0020]在另一个实施方案中，该方法包括：
[0021]a)使细胞与IL
‑
17，优选地IL
‑
17A，或T细胞条件培养基接触；
[0022]b)使细胞与药剂接触；
[0023]c)将细胞与IL
‑
17或T细胞条件培养基和药剂一起孵育，优选地持续6至72小时；
[0024]d)在孵育步骤后收集细胞；
[0025]e)在孵育步骤后，检测细胞中选自DEFB4A、S100A7A、SAA2、CCL20、RNASE7、SAA4、IL
‑
23A、S100A12、DEFB103A、C15orf48、ZC3H12A、SAA1、SPRR2B、PRSS22、CXCL1、IL
‑
36G、NFKBIZ、IL
‑
8、PLAT、CXCL5、PDZK1IP1、RSAD2、KRT78、SLC39A2、CSF3、LCN2、SPRR3、DHRS9、GLUL、RHCD、CXCL2、SERPINB3和S100P的一个基因或包含1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个或更多个基因的组的表达水平；以及
[0026]f)将与药剂接触的细胞的1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个或更多个基因的表达水平与对照细胞进行比较，其中与对照细胞相比，与药剂接触的细胞的一个或多个基因的表达水平的调节指示该药剂能够调节IL
‑
17途径。
[0027]在某些实施方案中，药剂选自小分子、多肽、抗体和多核苷酸。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种鉴定调节白介素
‑
17(IL
‑
17)途径的药剂的方法，所述方法包括：a)使细胞与IL
‑
17，优选地IL
‑
17A，或T细胞条件培养基接触；b)使所述细胞与所述药剂接触；c)将所述细胞与所述IL
‑
17或所述T细胞条件培养基和所述药剂一起孵育；d)在孵育步骤后收集细胞上清液；e)检测所述细胞上清液中粒细胞集落刺激因子(G
‑
CSF)的水平；以及f)将与所述药剂接触的所述细胞上清液中的所述G
‑
CSF水平与对照细胞上清液进行比较，其中与所述对照细胞上清液相比，与所述药剂接触的所述细胞上清液中的所述G
‑
CSF水平的调节表明所述药剂能够调节所述IL
‑
17途径。2.根据权利要求1所述的方法，其中在所述细胞与所述药剂接触后24小时收集所述细胞上清液。3.根据权利要求1所述的方法，其中G
‑
CSF的水平使用抗体来测量。4.根据权利要求1所述的方法，其中G
‑
CSF的水平使用均相时间分辨荧光测定来测量。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述药剂降低所述细胞上清液中的所述G
‑
CSF的水平。6.根据权利要求1所述的方法，还包括a)收集所述细胞；b)在所述孵育步骤后，检测所述细胞中选自DEFB4A、S100A7A、SAA2、CCL20、RNASE7、SAA4、IL
‑
23A、S100A12、DEFB103A、C15orf48、ZC3H12A、SAA1、SPRR2B、PRSS22、CXCL1、IL
‑
36G、NFKBIZ、IL
‑
8、PLAT、CXCL5、PDZK1IP1、RSAD2、KRT78、SLC39A2、CSF3、LCN2、SPRR3、DHRS9、GLUL、RHCD、CXCL2、SERPINB3和S 100P的一个基因或一组基因的表达水平；c)将与所述药剂接触的所述细胞的所述一个基因或一组基因的所述表达水平与对照细胞进行比较，其中与所述对照细胞相比，与所述药剂接触的所述细胞中的所述一个或多个基因的所述表达水平的调节证实所述药剂能够调节所述IL
‑
17途径。7.一种鉴定调节白介素
‑
17(IL
‑
17)途径的药剂的方法，所述方法包括：a)使细胞与IL
‑
17，优选地IL
‑
17A，或T细胞条件培养基接触；b)使所述细胞与所述药剂接触；c)将所述细胞与所述IL
‑
17或所述T细胞条件培养基和所述药剂一起孵育，优选地持续6至72小时；d)在所述孵育步骤后收集所述细胞；e)在所述孵育步骤后，检测所述细胞中选自DEFB4A、S100A7A、SAA2、CCL20、RNASE7、SAA4、IL
‑
23A、S100A12、DEFB103A、C15orf48、ZC3H12A、SAA1、SPRR2B、PRSS22、CXCL1、IL
‑
36G、NFKBIZ、IL
‑
8、PLAT、CXCL5、PDZKlIP1、RSAD2、KRT78、SLC39A2、CSF3、LCN2、SPRR3、DHRS9、GLUL、RHCD、CXCL2、SERPINB3和S100P的一个基因或包含1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个或更多个基因的组的表达水平；以及f)将与所述药剂接触的所述细胞的所述1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个或更多个基因的所述表达水平与对照细胞进行比较，其中
与所述对照细胞相比，与所述药剂接触的所述细胞的所述一个或多个基因的所述表达水平的调节指示所述药剂能够调节所述IL
‑
17途径。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述方法包括使所述细胞与IL
‑
1...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛晓华，K，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：