一种外生菌根真菌分离培养基及其制备方法技术

本发明专利技术涉及真菌培养技术领域，具体公开了一种外生菌根真菌分离培养基及其制备方法，每1000mL外生菌根真菌分离培养基由马铃薯汁300

【技术实现步骤摘要】
一种外生菌根真菌分离培养基及其制备方法


[0001]本专利技术涉及真菌培养
，具体涉及一种外生菌根真菌分离培养基及其制备方法。

技术介绍

[0002]外生菌根真菌是一类与宿主植物根系共生并有益于植物生长发育的高等真菌，具有较强的生态适应性和可塑性，可以提高宿主植物的抗病性和抗逆性。外生菌根菌是真菌与高等植物的根部形成的菌根合体，宿主和菌根菌的代谢产物经过哈氏网的网络作双向运转。我国有外生菌根的主要树木有栎、松、柳、椴、枫、胡桃及桦科等；外生菌根真菌中有许多是珍贵的食用菌，如：牛肝菌、松茸(松口蘑)、松乳菇等经常出现于松林及栎林。这种具有共生共栖作用的菌根菌，具有明显的经济效益和环境效益。不仅木材的产量提高40％，而且还能提供大量美味可口的蘑菇。
[0003]有些外生菌根真菌有药用价值，且难分离，如有硬皮地星，花脸香蘑，小笠原须腹菌等；目前外生菌根真菌最常用的分离培养基为MMN培养基，但是对少数外生菌根真菌分离有难度，菌丝生长慢，生物量小，分离难度大。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种外生菌根真菌分离培养基及其制备方法，制备得到的分离培养基能够促进外生菌根真菌的菌丝体生长，提高了分离效率。
[0005]本专利技术的第一个目的是提供一种外生菌根真菌分离培养基，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：
[0006]马铃薯汁300
‑
500mL、葡萄糖10
‑
20g、酵母粉3
‑
>5g、蛋白胨3
‑
5g、氯化铁0.01
‑
0.03g、维生素B
1 1
‑
2mg、氨苄青霉素50
‑
100μg、硫酸链霉1
‑
4mg、孟加拉红2
‑
3mg、琼脂15
‑
20g，余量为蒸馏水。
[0007]进一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：
[0008]马铃薯汁400mL、葡萄糖18g、酵母粉4g、蛋白胨4g、氯化铁0.02g、维生素B
1 1.8mg、氨苄青霉素60μg、硫酸链霉2mg、孟加拉红3mg、琼脂18g，余量为蒸馏水。
[0009]进一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：
[0010]马铃薯汁300mL、葡萄糖20g、酵母粉5g、蛋白胨5g、氯化铁0.01g、维生素B
1 2mg、氨苄青霉素50μg、硫酸链霉4mg、孟加拉红2mg、琼脂20g，余量为蒸馏水。
[0011]进一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：
[0012]马铃薯汁500mL、葡萄糖10g、酵母粉3g、蛋白胨3g、氯化铁0.03g、维生素B
1 1mg、氨苄青霉素100μg、硫酸链霉1mg、孟加拉红2.5mg、琼脂15g，余量为蒸馏水。
[0013]进一步地，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：
[0014]马铃薯汁450mL、葡萄糖15g、酵母粉3.5g、蛋白胨3.5g、氯化铁0.02g、维生素B
1 1.4mg、氨苄青霉素80μg、硫酸链霉1mg、孟加拉红2mg、琼脂16g，余量为蒸馏水。
[0015]进一步地，所述马铃薯汁的制备过程为：将马铃薯削皮切成块加蒸馏水，马铃薯蒸馏水的用量比为200
‑
300g:800
‑
900mL，煮至马铃薯将烂时过滤，获得滤液即为马铃薯汁。
[0016]本专利技术的第二个目的是提供上述外生菌根真菌分离培养基的制备方法，包括如下步骤：
[0017]S1，马铃薯汁的制备：将马铃薯削皮切成块加蒸馏水，马铃薯和蒸馏水的用量比为200
‑
300g:800
‑
900mL，煮至马铃薯将烂时过滤，获得滤液即为马铃薯汁；
[0018]S2，在100mL蒸馏水中按量加入葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、氯化铁和维生素B1搅拌溶解，溶解完全后再按量加入琼脂，然后加入马铃薯汁混合均匀，再加蒸馏水定容至1000mL，115℃，0.07MPa高温高压灭菌20min，冷却至60℃后按量加入氨苄青霉素、硫酸链霉和孟加拉红，获得外生菌根真菌分离培养基。
[0019]进一步地，S1中，所述马铃薯和蒸馏水的用量比为300g:900mL。
[0020]进一步地，S1中，利用两层纱布过滤。
[0021]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0022]1、本专利技术制备得到的外生菌根真菌分离培养基能够从黄山松共生的柳氏硬皮地星(Astraeus ryoocheoninii)S01，日本冷杉共生的花脸香蘑(Lepista sordida)S02和马尾松共生的小笠原须腹菌(Rhizopogon boninensis)S2021021分离出外生菌根真菌，且分离能力强，能够有效抑制杂菌。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0024]图1表示本专利技术中从柳氏硬皮地星S01子实体分离到的菌株情况；
[0025]其中，图A为柳氏硬皮地星S01的子实体；
[0026]图B为从柳氏硬皮地星S01子实体分离到的真菌菌落；
[0027]图2表示本专利技术中从花脸香蘑S02子实体分离到的菌株情况；
[0028]其中，图A为花脸香蘑S02的子实体；
[0029]图B为从花脸香蘑S02的子实体分离到的真菌菌落；
[0030]图3表示本专利技术中从小笠原须腹菌S2021021子实体分离到的菌株情况；
[0031]其中，图A为小笠原须腹菌S2021021子实体；
[0032]图B为从小笠原须腹菌S2021021子实体分离获得的真菌菌落；
[0033]图4表示本专利技术中从彩色豆马勃S2021202子实体分离到的菌株情况；
[0034]其中，图A为彩色豆马勃S2021202子实体；
[0035]图B为从彩色豆马勃S2021202子实体分离到的菌株菌落。
具体实施方式
[0036]下面对本专利技术的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性
劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0037]实施例1：
[0038]本实施例提供了一种外生菌根真菌分离培养基及其制备方法
[0039]一、材料和方法
[0040本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外生菌根真菌分离培养基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：马铃薯汁300
‑
500mL、葡萄糖10
‑
20g、酵母粉3
‑
5g、蛋白胨3
‑
5g、氯化铁0.01
‑
0.03g、维生素B
1 1
‑
2mg、氨苄青霉素50
‑
100μg、硫酸链霉1
‑
4mg、孟加拉红2
‑
3mg、琼脂15
‑
20g，余量为蒸馏水。2.根据权利要求1所述的外生菌根真菌分离培养基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：马铃薯汁400mL、葡萄糖18g、酵母粉4g、蛋白胨4g、氯化铁0.02g、维生素B
1 1.8mg、氨苄青霉素60μg、硫酸链霉2mg、孟加拉红3mg、琼脂18g，余量为蒸馏水。3.根据权利要求1所述的外生菌根真菌分离培养基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：马铃薯汁300mL、葡萄糖20g、酵母粉5g、蛋白胨5g、氯化铁0.01g、维生素B
1 2mg、氨苄青霉素50μg、硫酸链霉4mg、孟加拉红2mg、琼脂20g，余量为蒸馏水。4.根据权利要求1所述的外生菌根真菌分离培养基，其特征在于，每1000mL所述外生菌根真菌分离培养基由以下组分制成：马铃薯汁500mL、葡萄糖10g、酵母粉3g、蛋白胨3g、氯化铁0.03g、维生素B
1 1mg、氨苄青霉素100μg、硫酸链霉1mg、孟加拉红2.5mg、...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙启彪，何贞英，欧阳建萍，何刚，季晓红，陈晔，
申请(专利权)人：九江学院，
类型：发明
国别省市：