一种放线菌培养物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种放线菌培养物及其制备方法与应用，该放线菌培养物通过马杜拉放线菌发酵酿酒酵母培养物制备得到；所述酿酒酵母培养物通过酿酒酵母菌SC

【技术实现步骤摘要】
一种放线菌培养物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及微生物及其应用
，具体涉及一种放线菌培养物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]现代高密度集约化养殖，会向环境中直接排放或通过粪便发酵大量氨气、甲烷、硫化氢、二氧化硫等恶臭气体，这些对养殖现场和周围的空气、水体和土壤都会造成不同程度的污染。我国针对畜禽养殖污染防治的法规性文件《畜禽规模养殖污染防治条例》2014年1月1日施行，国家和各地纷纷出台不同畜禽养殖环境污染防治法规和办法，重视养殖生态环境保护，提倡标准化、现代化的绿色健康养殖。饲料原料价格飙升、养殖减抗大势所趋，面对养殖环境管理各项法规，我国畜禽养殖企业面临经营和环保的双重压力。只有通过饲料营养技术手段，才能在不增加生产运营成本的条件下，在较短时间内实现最大化利用饲料价值、降低环境污染。
[0003]近年来，放线菌在饲料、畜禽领域主要作为发酵饲料菌剂(刘晓飞，2020)、环境除臭剂(周美君，2016)；主要同枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌、酿酒酵母菌等一种或多种微生物混合，以混合菌剂(周美君，2016；李家勤，2022，刘玲子，2019)，制备除臭剂或发酵饲料(张春青，2022；崔梦鸽，2021)等产品。关于放线菌作为饲料添加剂的研究和产品，目前尚未发现放线菌的培养物、或利用酿酒酵母培养物、或放线菌同微生物培养物混合的研究和产品报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种放线菌培养物及其制备方法与应用，该放线菌培养物通过结合精准营养、低蛋白日粮等饲料营养技术手段，可实现饲料利用率提高、肠道微生物结构改善，进而达到降低有害气体、病原微生物和过量营养元素的排放，提高养殖环保和生产效益。
[0005]为此，本专利技术的第一方面提供了一种放线菌培养物，其通过放线菌发酵酿酒酵母培养物制备得到；所述放线菌为马杜拉放线菌(Actinomadura sp.)；所述酿酒酵母培养物通过酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)SC
‑
HKB100发酵大豆糖蜜制备得到。
[0006]根据本专利技术的技术方案，所述马杜拉放线菌的菌种保藏号为CGMCC No. 17015。所述酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)SC
‑
HKB100于2019年9 月30日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址为中国湖北省武汉市武昌区珞珈山路16号武汉大学，菌种保藏号为CCTCC NO：M 2019769。
[0007]进一步，所述酿酒酵母培养物的制备方法包括，将所述酿酒酵母菌 SC
‑
HKB100的种子液接种到大豆糖蜜液体培养基中进行有氧发酵，制备得到酵母菌液体发酵培养物；将所述酵母菌液体发酵培养物接种至固体培养基中进行厌氧发酵，制备得到酵母菌固体发酵培养物；对所述酵母菌固体发酵培养物进行破壁，即制备得到所述酿酒酵母培养物。
[0008]进一步，所述种子液的接种量为18％
‑
25％。
[0009]进一步，所述有氧发酵的温度为28℃
‑
32℃，发酵时间为24
‑
36h，通气量为1
‑
4L/min。
[0010]进一步，所述大豆糖蜜液体培养基通过将大豆糖蜜用水稀释2
‑
3倍，并调节pH值为5.8
‑
6.8制备得到。
[0011]进一步，所述厌氧发酵的温度为28
‑
35℃，发酵时间28
‑
36h。
[0012]进一步，所述厌氧发酵具体包括：按重量份数将大豆糖蜜2份、液体发酵酵母菌培养物3份混合均匀制备得到发酵剂；按重量份数将玉米胚芽粕1
‑
2份、麦麸5
‑
6份，玉米芯5
‑
6份混合均匀，经灭菌制备得到固体培养基；将所述发酵剂和所述固体培养基按照质量比1：2进行混匀，调节水分含量为50％；然后进行厌氧发酵。
[0013]进一步，通过以下步骤进行所述破壁：向所述酵母菌固体发酵培养物加入破壁剂进行处理。
[0014]进一步，所述加入所述破壁剂的质量百分比为1
‑
5％，例如1％、1.2％、2％、 3％、4％、5％等；所述处理时间为3
‑
6h，例如3h、4h、5h、6h等。
[0015]进一步，所述破壁剂按重量份数计包括：β
‑
葡聚糖酶5份、甘露聚糖酶5 份、纤维素酶10份，氯化锌8份。
[0016]进一步，所述放线菌发酵酿酒酵母培养物的条件包括：发酵温度为28℃
ꢀ‑
35℃，发酵时间为12
‑
24h。
[0017]本专利技术的第二方面，提供所述放线菌培养物的制备方法，其包括：
[0018]S1、对所述放线菌进行菌种活化，制备得到活化后的放线菌；
[0019]S2、将所述活化后的放线菌接种至种子液培养基中，经种子液扩大培养制备得到放线菌种子液；
[0020]S3、将所述放线菌种子液接种至液体培养基中，进行液体扩大培养；制备得到放线菌培养液；
[0021]S4、将所述放线菌培养液接种至所述酿酒酵母培养物中，进行固体发酵，制备得到放线菌固体发酵培养物；对所述放线菌固体发酵培养物进行干燥及粉碎处理，即制备得到所述放线菌培养物。
[0022]进一步，所述菌种活化采用斜面培养，所述菌种活化的培养基为高氏1号培养基，其含可溶性淀粉20g/L、KNO
3 1g/L、NaCl 0.5g/L、K2HPO
4 0.5g/L、 MgSO
4 0.5g/L、FeSO
4 0.01g/L、琼脂2％。
[0023]进一步，所述菌种活化步骤中，培养温度为28℃
‑
30℃，培养时间为24
‑
48 h。
[0024]进一步，所述种子液培养基含可溶性淀粉24g/L、牛肉膏3g/L、葡萄糖1 g/L、酵母水解物5g/L、蛋白胨3g/L、碳酸钙4g/L，pH值为7.0。
[0025]进一步，所述种子液扩大培养步骤中，培养条件为28℃恒温摇床培养，转速为180r/min，培养时间为36
‑
60h。
[0026]进一步，所述液体扩大培养步骤中，液体培养基含可溶性淀粉18g/L、牛肉膏3g/L、葡萄糖1g/L、酵母水解物5g/L、蛋白胨3g/L、碳酸钙4g/L，pH 值为7.2。
[0027]进一步，所述液体扩大培养步骤中，所述活化后的放线菌的接种量为5％，发酵条件为28℃恒温，转速180r/min，发酵时间为36
‑
60h。
[0028]进一步，所述固体发酵步骤中，所述放线菌培养液的接种量为5％
‑
8％，发酵温度为28℃
‑
35℃，发酵时间为12
‑
24h。
[0029本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种放线菌培养物，其特征在于，所述放线菌培养物通过放线菌发酵酿酒酵母培养物制备得到；所述放线菌为马杜拉放线菌；所述酿酒酵母培养物通过酿酒酵母菌SC
‑
HKB100发酵大豆糖蜜制备得到。2.如权利要求1所述的放线菌培养物，其特征在于，所述酿酒酵母培养物的制备方法包括，将所述酿酒酵母菌SC
‑
HKB100的种子液接种到大豆糖蜜液体培养基中进行有氧发酵，制备得到酵母菌液体发酵培养物；将所述酵母菌液体发酵培养物接种至固体培养基中进行厌氧发酵，制备得到酵母菌固体发酵培养物；对所述酵母菌固体发酵培养物进行破壁，即制备得到所述酿酒酵母培养物。3.如权利要求2所述的放线菌培养物，其特征在于，所述有氧发酵的温度为28℃
‑
32℃，发酵时间为24
‑
36h，通气量为1
‑
4L/min；优选地，所述大豆糖蜜液体培养基通过将大豆糖蜜用水稀释2
‑
3倍，并调节pH值为5.8
‑
6.8制备得到。4.如权利要求2所述的放线菌培养物，其特征在于，所述厌氧发酵的温度为28
‑
35℃，发酵时间28
‑
36h；优选地，所述厌氧发酵具体包括：按重量份数将大豆糖蜜2份、液体发酵酵母菌培养物3份混合均匀制备得到发酵剂；按重量份数将玉米胚芽粕1
‑
2份、麦麸5
‑
6份，玉米芯5
‑
6份混合均匀，经灭菌制备得到固体培养基；将所述发酵剂和所述固体培养基按照质量比1：2进行混匀，调节水分含量为50％；然后进行厌氧发酵。5.如权利要求1所述的放线菌培养物，其特征在于，所述放线菌发酵酿酒酵母培养物的条件包括：发酵温度为28℃
‑
35℃，发酵时间为12
‑
24h。6.权利要求1
...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋林树，刘明，方洛云，王文欢，童津津，夏冰，赵玉超，
申请(专利权)人：北京中农弘科生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：