阿法替尼在防治二型糖尿病中的新用途制造技术

本发明专利技术提供一种阿法替尼或其药学上可接受的盐在治疗和/预防二型糖尿病中的新用途，属于医药技术领域。本发明专利技术实验结果表明Afatinib可以通过PKC和AMPK上调L6肌细胞中GLUT4的表达及转位及葡萄糖摄取，为治疗和/预防二型糖尿病的提供了一种新药物和思路。防二型糖尿病的提供了一种新药物和思路。防二型糖尿病的提供了一种新药物和思路。

【技术实现步骤摘要】
阿法替尼在防治二型糖尿病中的新用途


[0001]本专利技术属于医疗领域，具体的说，涉及一种阿法替尼在防治二型糖尿病中的用新途。

技术介绍

[0002]二型糖尿病(Type 2diabetes mellitus,T2DM)作为糖尿病的主要发病类型，占该疾病的90％以上。随着社会经济的发展和生活方式的改变，二型糖尿病的发病率在过去几十年中都显著增加。二型糖尿病是一种多基因遗传性复杂疾病，其特征为胰岛素抵抗和胰岛素分泌不足，伴随因胰岛素分泌或作用缺陷所引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱。大多数二型糖尿病为多个基因和多种环境因素共同参与并相互作用的多基因多环境因素复杂病。胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能缺陷是二型糖尿病的基本特征。葡萄糖转运体4(Glucose Transporter 4,GLUT4,SLC2A4)是一种跨膜的大分子蛋白，主要在骨骼肌和脂肪组织表达。GLUT4在胰岛素调控下快速响应机体的血糖变化，对维持体内的血糖稳态具有重要作用。在餐后，人体内血液中葡萄糖的增加导致胰岛素的分泌，这种激素反应会防止肝脏中的糖异生，并通过调控GLUT4表达，从细胞储存囊泡(GLUT4 storage vesicle,GSV)转运到质膜上以调控葡萄糖摄取到肌肉组织和脂肪组织中。GLUT4是正常葡萄糖稳态和胰岛素抵抗的关键参与者。目前的研究证明二型糖尿病与葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达和转位缺陷有关。因此，可以针对GLUT4为靶点寻找筛选出治疗二型糖尿病的新药物。
[0003]阿法替尼(Afatinib,BIBW2992)是一种口服的、不可逆的酪氨酸激酶抑制剂，在许多肿瘤细胞中具有药物活性。其化学式为C
24
H
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ClFN5O3，相对分子质量为485.94。至今为止，阿法替尼在临床上主要用于治疗肺癌及宫颈癌等癌症，其作用机制主要是由于阿法替尼是不可逆转的ErbB受体酪氨酸激酶家族阻断剂，能够阻断癌细胞生长和分裂的相关通道。利用Afatinib促进GLUT4表达及转运从而治疗二型糖尿病的研究，国内外尚未有相关的报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了一种阿法替尼或其药学上可接受的盐在治疗和/或预防二型糖尿病中的用途。
[0005]本专利技术还提供了阿法替尼或其药学上可接受的盐在制备GLUT4活性促进剂中的用途，且该GLUT4活性促进剂用于治疗和/或预防二型糖尿病。
[0006]本专利技术还提供了阿法替尼或其药学上可接受的盐在制备PKC激活剂中的用途，且该PKC激活剂用于治疗和/或预防二型糖尿病。
[0007]本专利技术还提供了阿法替尼或其药学上可接受的盐在制备AMPK激活剂中的用途，且该AMPK激活剂用于治疗和/或预防二型糖尿病。
[0008]本专利技术提供一种用于治疗二型糖尿病的药，该药包含阿法替尼或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的药物载体。
[0009]进一步地，该药的剂型为片剂、散剂、汤剂、丸剂、胶囊剂。
[0010]进一步地，所述药物载体包括：表面活性剂、润滑剂、吸收促进剂、稀释剂。
[0011]进一步地，所述GLUT4活性促进剂，其剂型为片剂、散剂、汤剂、丸剂、胶囊剂。
[0012]进一步地，所述激活剂，其剂型为片剂、散剂、汤剂、丸剂、胶囊剂。
[0013]本专利技术的有益效果：本专利技术发现了阿法替尼用于治疗和/预防二型糖尿病的新用途。
附图说明
[0014]图1为Afatinib促进L6肌细胞的葡萄糖摄取实验中，测得的吸光度柱状图；
[0015]图2为Afatinib促进L6肌细胞GLUT4表达图；
[0016]图3为Afatinib促进L6肌细胞GLUT4转运图；
[0017]图4为Afatinib对L6肌细胞及GLUT4
‑
ko
‑
L6肌细胞葡萄糖摄取的影响；
[0018]图5为Afatinib可以通过调控L6肌细胞中PKC及AMPK的磷酸化，从而促进L6肌细胞内GLUT4的表达；
[0019]图6为Afatinib促进L6肌细胞的葡萄糖摄取与Ca
2+
相关；
[0020]图7为Afatinib在L6肌细胞中调控GLUT4转运及葡萄糖摄取机制总结图；
[0021]图中，Control表示对照组，Metformin表示盐酸二甲双胍阳性药物组，PMA表示佛波酯(phorbol ester，PMA)，Insulin表示胰岛素给药组，Afatinib(30μM，50μM，100μM)表示Afatinib的三个高中低剂量给药组。
具体实施方式
[0022]下述是结合具体实施例和实验例，进一步阐述本专利技术。但这些实施例仅限于说明本专利技术而不是用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体实验条件的实验方法，通常按照常规条件。
[0023]实施例
[0024]测试Afatinib对L6肌细胞GLUT4转膜与葡萄糖摄取的影响
[0025]1、实验试剂及材料
[0026]Afatinib购自Selleck公司，α
‑
MEM培养基、胰蛋白酶(美国Gibco公司)，FBS胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司)，细胞培养皿、96孔板、6孔板(Nest公司)，2
‑
NBDG葡萄糖试剂盒(英科新创科技股份有限公司)，激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss Jena公司)，荧光酶标仪(Thermo Fisher公司)，BCA蛋白定量检测试剂盒、特超敏ECL化学发光试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)，SDS
‑
PAGE凝胶快速配制试剂盒(上海雅酶生物科技有限公司)。
[0027]2、测试Afatinib对L6肌细胞的葡萄糖摄取的影响
[0028]使用葡萄糖(GLU
‑
OX)测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)检测药物对细胞葡萄糖摄取活性的影响。将生长状态良好的细胞以1
×
104‑5×
104个细胞/孔的密度接种于96孔板中。待细胞生长至80
‑
90％后，将培养基更换为分化培养基(2％FBS)诱导细胞分化为肌管细胞，每24h换液(2％FBS分化培养基)一次，连续培养7天。每个药物浓度设置6个重复孔，同时设置阴性空白对照组和阳性对照胰岛素组。将分化好的细胞用无血清α
‑
MEM培养基饥饿2h，然后吸出所有旧液，每孔加入100μL的无血清α
‑
MEM(空白对照)、100nM胰岛素(阳性对照)、三个梯度浓度Afatinib(30μM、50μM、100μM)共五组。药物作用30min后另取一个新的96孔板，用
葡萄糖摄取测定试剂盒中的方法测定L6肌细胞的葡萄糖摄取量。酶标仪测量OD 505nm值。结果如附图1所示。
[0029]3、利用Western Blotting检测Afatinib对L6肌细胞中GLUT4蛋白的表达的影响
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.阿法替尼或其药学上可接受的盐在治疗和/或预防二型糖尿病中的用途。2.阿法替尼或其药学上可接受的盐在制备GLUT4活性促进剂中的用途，且该GLUT4活性促进剂用于治疗和/或预防二型糖尿病。3.阿法替尼或其药学上可接受的盐在制备PKC激活剂中的用途，且该PKC激活剂用于治疗和/或预防二型糖尿病。4.阿法替尼或其药学上可接受的盐在制备AMPK激活剂中的用途，且该AMPK激活剂用于治疗和/或预防二型糖尿病。5.一种用于治疗二型糖尿病的药，其特征在于：该药包含阿法替...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵平，陈欢，杨新洲，
申请(专利权)人：中南民族大学，
类型：发明
国别省市：