一种提取纯化及快速检测苹果皮中特异性多酚含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种提取纯化及快速检测苹果皮中特异性多酚含量的方法，主要步骤为：1)苹果皮样品前处理；2)苹果皮多酚提取；3)检测苹果皮提取液中总多酚含量；4)吸附剂活化；5)多酚吸附纯化过程；6)多酚解析纯化过程；7)检测苹果皮纯化液中总多酚含量；8)苹果皮多酚纯化液稀释；9)利用荧光光谱检测苹果皮多酚纯化液中特异性多酚含量。本发明专利技术采用超声强化苹果皮多酚提取，融合静态大孔树脂吸附解析高效纯化苹果皮多酚，并结合多酚物质的自荧光特性提出了利用荧光光谱快速准确定量检测特异性多酚含量的一种方法，满足更快速、操作更简单且成本更低的有效定量检测样品中多种特异性多酚的需求。酚的需求。酚的需求。

【技术实现步骤摘要】
一种提取纯化及快速检测苹果皮中特异性多酚含量的方法


[0001]本专利技术涉及多酚提取纯化检测
，尤其涉及一种提取纯化及快速检测苹果皮中特异性多酚含量的方法，为一种高效的提取纯化及快速定量检测多酚的方法。

技术介绍

[0002]苹果中含有大量的多酚类物质，这些多酚化合物位于细胞的质体/液泡中，与苹果的物理特性有关，因此不同品种的苹果之间的差异有关。而且苹果果皮中总多酚化合物的含量远高于果肉，尤其是原花青素、黄酮醇和二氢查尔酮。大量功效研究显示苹果多酚成分具有很好的抗氧化、抗肿瘤、预防心脑血管疾病、保肝和增强记忆等作用，因此高效的提取纯化苹果多酚，特别是选择合适的提取纯化方法选择性的高效增值化苹果皮多酚具有重要意义。
[0003]食品中多酚含量的测定方法多种多样，主要包括几种分光光度法和一些涉及分离的有用的仪器技术。在这些方法中，Folin
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Ciocalteu方法被因其芳芳简单被广泛用于测定总酚，但只能给出总酚含量的估计，并不能对其中的单一多酚类物质进行定量检测。这是因为任何可氧化的酚羟基都会发生显色反应，而Folin
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Ciocalteu就是利用此显色反应表征总多酚含量的。目前高效液相色谱与吸光度、质谱或荧光法检测相结合，特别是高效液相色谱法是量化单个酚类物质最常用的方法之一。但由于灵敏度低，在检测复杂样品时存在局限性且操作过程相对繁琐复杂和成本高。与其他光谱技术相比，荧光光谱具有更高的灵敏度和选择性，它显著降低了光谱复杂性，抑制了光散射干扰。由于其独特的优势，荧光光谱技术在研究存在干扰的复杂食物样品中的微量成分时特别有用。通常情况下，荧光强度的测量是同时扫描发射和激发波长的函数。近十年来，荧光光谱技术已成为食品中营养物质检测分析的热点方法。

技术实现思路

[0004]为了克服现有技术的上述缺点与不足，本专利技术的目的在于提供一种提取纯化及快速检测苹果皮中特异性多酚含量的方法。融合超声强化多酚提取，大孔树脂吸附解析纯化多酚及利用多酚物质的自荧光特性，采用荧光光谱选择性快速定量检测苹果皮中特异性多酚含量，克服传统的检测方法只能进行总多酚含量检测或者检测繁琐昂贵等缺点，可满足样品中多种特异性多酚快速定量检测的需求。
[0005]本专利技术公开的一种提取纯化及快速检测苹果皮中特异性多酚含量的方法，其特征在于包括步骤如下：
[0006]1)苹果皮样品前处理：苹果皮切割成相同大小，烘箱烘干后，粉碎为粉末；
[0007]2)苹果皮多酚提取：将步骤1)获取的苹果皮粉末添加至50％乙醇水溶液中，首先超声辅助30min强化提取，后在恒温水浴搅拌条件下提取2.5小时提取苹果皮中的多酚类物质；
[0008]3)检测苹果皮提取液中总多酚含量：利用Folin
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Ciocalteu方法检测步骤2)获得
的苹果皮提取液中的总多酚含量；
[0009]4)吸附剂活化：将大孔树脂吸附剂依次浸泡在乙醇水溶液、盐酸水溶液和氢氧化钠水溶液中6小时进行醇活化、酸活化和碱活化，再次利用蒸馏水不停的冲洗直至洗出液澄清，最终将冲洗干净的活化好的吸附剂放在烘箱中烘干；
[0010]5)多酚吸附纯化过程：取步骤3)获得的大孔树脂吸附剂添加到步骤2)获得的苹果皮多酚提取液中，在恒温水浴搅拌条件下吸附4小时，将苹果皮提取液中的多酚物质充分吸附在大孔树脂表面；
[0011]6)多酚解析纯化过程：将步骤4)处理后饱和的大孔树脂加入到乙醇水溶液中浸泡3小时，将大孔树脂表面的多酚全部洗脱到解析液中；
[0012]7)检测苹果皮纯化液中总多酚含量：利用Folin
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Ciocalteu方法检测步骤6)获得的苹果皮纯化液中的总多酚含量；
[0013]8)苹果皮多酚纯化液稀释：将步骤6)获得的苹果皮多酚纯化液稀释后进行荧光光谱检测；
[0014]9)利用荧光光谱检测苹果皮多酚纯化液中特异性多酚含量：利用荧光光谱在激发波段260nm和散射波段320nm下快速定量检测苹果皮纯化液中特异性多酚
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芦丁含量，在激发波段280nm和散射波段312nm下快速定量检测苹果皮纯化液中特异性多酚
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儿茶素，在激发波段280nm和散射波段316nm下快速定量检测苹果皮纯化液中特异性多酚
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表儿茶素的含量，及在激发波段290nm和散射波段330nm下快速定量检测苹果皮纯化液中特异性多酚
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根皮素含量；
[0015]10)利用常规高效液相色谱法检测苹果皮多酚纯化液中特异性多酚含量：利用高效液相色谱法检测苹果皮多酚纯化液中特异性多酚的含量；
[0016]11)比较利用荧光光谱和高效液相色谱检测苹果皮多酚纯化液中特异性多酚含量：分析两种方法获得检测结果的误差。
[0017]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点和有益效果：
[0018]本专利技术在苹果皮特异性性多酚提取纯化和检测种具有切实的意义，采用超声辅助强化苹果皮多酚的提取，融合静态大孔树脂吸附解析高效纯化提取的苹果皮多酚，并结合多酚物质的自荧光特性确定了苹果皮中主要特异性多酚(芦丁、儿茶素、表儿茶素和槲皮素)相应的激发波段和散射波段，提出了利用荧光光谱快速准确定量检测特异性多酚含量的一种有效新方法，为更省时、操作更简单且成本更低的有效定量检测特异性多酚提供一种新方法。
附图说明
[0019]图1是本专利技术所述的苹果皮中特异性多酚提取纯化及快速检测主要流程图；
具体实施方式
[0020]下面结合实施例，对本专利技术作进一步地详细说明，但本专利技术的实施方式不限于此。
[0021]实施例
[0022]1)苹果皮预处理：苹果皮切割为大小10mm*10mm*2mm的相似小块后放入105℃的烘箱中24小时去除水分，将烘干后的苹果皮利用研磨机研磨1分钟磨碎成粉末。
[0023]2)苹果皮多酚提取：取30g步骤1)获取的苹果皮粉末添加到300mL50％浓度的乙醇水溶液中，在室温400w超声条件下处理30分钟(3s超声2s间歇)辅助提取苹果皮中的多酚类物质，随后转移到50℃恒温条件下300r转速下搅拌2.5小时充分提取苹果皮中的多酚类物质。
[0024]3)检测苹果皮提取液中总多酚含量：利用Folin
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Ciocalteu方法检测步骤2)获得的苹果皮提取液中的总多酚含量。
[0025]4)吸附剂活化：将30g大孔树脂吸附剂(XAD
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16)浸泡在300mL95％浓度的乙醇水溶液中6小时，随后利用蒸馏水不停的冲洗直至洗出液澄清；再将冲洗干净的吸附剂浸泡在5％浓度的盐酸水溶液中6小时进行酸活化，再次利用蒸馏水不停的冲洗直至洗出液澄清；再将冲洗干净的吸附剂浸泡在5％浓度的氢氧化钠水溶液中6小时进行碱活化，再次利用蒸馏水不停的冲洗直至洗出液澄清；最终将冲洗干净的活化好的吸附剂放在70℃烘箱中烘干24小时。
[0026]5)多酚吸附纯化过程：本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提取纯化及快速检测苹果皮中特异性多酚含量的方法，其特征在于包括步骤如下：1)苹果皮样品前处理：苹果皮切割成相同大小，烘箱烘干后，粉碎为粉末；2)苹果皮多酚提取：将步骤1)获取的苹果皮粉末添加至50％乙醇水溶液中，首先超声辅助30min强化提取后，在恒温水浴搅拌条件下继续提取2.5小时提取苹果皮中多酚类物质；3)检测苹果皮提取液中总多酚含量：检测步骤2)获得的苹果皮提取液中的总多酚含量；4)吸附剂活化：将大孔树脂吸附剂依次浸泡在乙醇水溶液、盐酸水溶液和氢氧化钠水溶液中6小时进行醇活化、酸活化和碱活化，再次利用蒸馏水不停的冲洗直至洗出液澄清，最终将冲洗干净的活化好的吸附剂放在烘箱中烘干；5)多酚吸附纯化过程：取步骤3)获得的大孔树脂吸附剂添加到步骤2)获得的苹果皮多酚提取液中，在恒温水浴搅拌条件下吸附4小时，将苹果...

【专利技术属性】
技术研发人员：范建华，王璐，李小华，张亮，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：