一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法及其应用，该发酵制备方法包括种子液培养和胞内产依克多因发酵液。使用本发明专利技术提供的依克多因发酵制备方法获得的发酵液中，具有依克多因含量高的优点，发酵液中的依克多因含量在10

【技术实现步骤摘要】
一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及化妆品材料制备
，具体涉及一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]依克多因(Ectoin)，别名为(S)
‑2‑
甲基
‑
1，4，5，6
‑
四氢甲基嘧啶
‑4‑
羧酸，化学式为C6H
10
N2O2，是一种沙漠嗜盐菌来源的保湿成分，在高温、干燥、强UV照射、高盐度环境下，会在细胞外层生成一种天然保护成分
‑
氨基酸衍生物，从而让肌肤开启自我修护的功能；同时，依克多因是一种保湿、抗炎、修护的添加剂和综合体的天然保湿剂，亲肤性能极佳。
[0003]目前的依克多因生产方法基本是“细菌挤奶”工艺，即让嗜盐菌菌株在高浓度(如100g/L)的盐培养液中进行生长繁殖，Ectoine作为透压补偿溶质在嗜盐菌内大量的累积，以抵抗外界环境高渗透压的改变，进而产生保湿效果。
[0004]大多数的敏感肌肤问题在角质层受损、水分流失过快两方面，即毛细血管壁不正常扩张而引发红血丝问题和皮肤耐受性差而在外界刺激下产生的过敏性问题。而目前的舒缓修修护活性物质仅针对单一症状，并未有全方位修护皮肤的性能。
[0005]可见，提供一种具有保湿、舒缓、修护功能且能够应用在化妆品中的化合物具有重要意义。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的上述不足，本专利技术提供了一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法及其应用，使用本专利技术提供的依克多因发酵制备方法获得的发酵液中，具有依克多因含量高的优点，发酵液中的依克多因含量在10
‑
16g/L之间；该发酵制备方法，具有成本经济、合成工艺简单且高效的优点。将本专利技术提供的依克多因制成组合物应用，具有保湿舒缓的性能。
[0007]本专利技术的技术方案如下：
[0008]一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，过程如下：
[0009](1)种子液培养：
[0010]将菌株FL
‑
2423接种于种子培养基中摇床培养，培养温度为26
‑
32℃，培养时间为16
‑
30小时，得种子液；
[0011]其中，种子培养基的组分及含量：味精20
‑
50g/L，磷酸氢二钾5
‑
15g/L，磷酸二氢钾1
‑
5g/L，硫酸镁0.2
‑
1g/L，硫酸锰0
‑
0.05g/L，酵母粉1
‑
10g/L，氯化钠20
‑
60g/L，pH值在7.0；
[0012](2)有氧发酵的胞内产依克多因发酵液：
[0013]将步骤(1)的种子液以5
‑
10％的接种量(体积比)接种于发酵培养基中，于25
‑
30℃的温度条件下培养24
‑
96小时，得到胞内产依克多因的发酵液；
[0014]其中，发酵培养基的组分包括碳源、无机盐和氮源，谷氨酸钠为唯一碳源；无机盐中包含氯化钠，发酵培养基中，氯化钠的浓度为：50
‑
100g/L，胞内合成依克多因，发酵产率
达到10
‑
16g/L。
[0015]进一步的，菌株FL
‑
2423为嗜盐菌菌株通过化学、物理复合诱变育种，并在实验室大量筛选获得，具有工业化生产依克多因的能力，还有稳定的遗传特性；该嗜盐菌为中高度，在发酵培养中降低了盐的使用浓度，找到胞内产依克多因的盐的平衡，在中度盐条件下，分泌于胞内，利于后期的提取。
[0016]进一步的，所述嗜盐菌菌株分离自日照沿海海泥中。
[0017]进一步的，嗜盐菌菌株的分离及培养过程为：将采集于日照沿海海域的海泥样品于无菌水中进行稀释，稀释液涂布于含不同NaCl浓度的培养基平板上，28℃培养，待菌落长出后挑选单菌落，继续分离纯化，直至获得纯菌，初筛生长速度快，适应盐浓度范围广的菌株，复筛利用HPLC法测定依克多因产量，通过实验室筛选得到依克多因产量为2.4g/L的菌株。
[0018]进一步的，在步骤(1)中，种子培养基组分及含量为：味精25g/L，磷酸氢二钾5g/L，磷酸二氢钾3g/L，硫酸镁0.4g/L，硫酸锰0.01g/L，酵母粉1g/L，氯化钠30g/L，pH值在7.0。
[0019]进一步的，在步骤(2)中，发酵培养基中的无机盐还包括磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的组合或者包括硫酸镁、硫酸锰和硫酸铵的组合；氮源为酵母粉或者蛋白胨中的一种。
[0020]在高盐、高温、高紫外线辐射的极端条件下，依克多因使嗜盐菌免受伤害。依克多因是耐盐生物为维持渗透压平衡而在细胞内产生的一种相容性溶质。体内外研究表明(S)
‑2‑
甲基
‑
1，4，5，6
‑
四氢嘧啶
‑4‑
羧酸(依克多因)能通过体内合成和体外转运两种途径在细胞内积累，调节细胞内外渗透压平衡。
[0021]本专利技术方法制备的小分子氨基酸衍生物依克多因，进一步纯化和结晶程度更高，具有保湿和舒缓作用的小分子氨基酸衍生物依克多因在用于具有化妆品深度保湿、舒缓炎症应对。实验结果显示依克多因具有好的保湿、舒缓、抗炎功效。
[0022]上述依克多因的应用，具体为含有依克多因组合物的应用。
[0023]进一步的，在上述应用中，组合物包括多元醇、透明质酸钠、依克多因和泛醇。
[0024]进一步的，在上述应用中，组合物中各组分的重量百分比为：透明质酸钠0.4％、依克多因0.5％、泛醇2％，余量为多元醇。
[0025]进一步的，上述应用中，组合物的制备方法为：常温下，在多元醇里加入0.4％透明质酸钠，搅拌分散均匀，升温至85℃，保温搅拌溶解均匀；然后冷却至38℃，继续加入0.5％依克多因和2％泛醇，搅拌溶解完全，得到组合物；该组合物具有保湿舒缓修护皮肤功效。
[0026]相对于现有技术，本专利技术的有益效果在于：
[0027]1、使用本专利技术提供的依克多因发酵制备方法获得的发酵液中，具有依克多因含量高的优点，发酵液中的依克多因含量在10
‑
16g/L之间。
[0028]2、本专利技术提供的依克多因发酵制备方法，具有成本经济、合成工艺简单且高效的优点。
[0029]3、将本专利技术提供的依克多因制成组合物应用，具有保湿舒缓的性能。依克多因能更有效提升皮肤细胞的免疫防护能力，增加细胞修复能力，使皮肤能有效对抗微生物及过敏原的入侵，对于皮肤脱皮、泛红、发热等状态能起到良好的修复效果，加速皮肤健康的恢复。
附图说明
[0030]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，过程如下：(1)种子液培养：将菌株FL
‑
2423接种于种子培养基中摇床培养，培养温度为26
‑
32℃，培养时间为16
‑
30小时，得种子液；其中，种子培养基的组分及含量：味精20
‑
50g/L，磷酸氢二钾5
‑
15g/L，磷酸二氢钾1
‑
5g/L，硫酸镁0.2
‑
1g/L，硫酸锰0
‑
0.05g/L，酵母粉1
‑
10g/L，氯化钠20
‑
60g/L，pH值在7.0；(2)有氧发酵的胞内产依克多因发酵液：将步骤(1)的种子液以5
‑
10％的接种量(体积比)接种于发酵培养基中，于25
‑
30℃的温度条件下培养24
‑
96小时，得到胞内产依克多因的发酵液；其中，发酵培养基的组分包括碳源、无机盐和氮源，谷氨酸钠为唯一碳源；无机盐中包含氯化钠，发酵培养基中，氯化钠的浓度为：50
‑
100g/L，胞内合成依克多因，发酵产率达到10
‑
16g/L。2.如权利要求1所述的小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，菌株FL
‑
2423为将该嗜盐菌菌株通过化学、物理复合诱变育种后，并经筛选后获得。3.如权利要求2所述的小分子氨基酸衍生物依克多因的发酵制备方法，其特征在于，所述嗜盐菌菌株分...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴坤杰，莫婵娟，李旺凤，李钰城，彭雅娟，
申请(专利权)人：济生上海实业有限公司，
类型：发明
国别省市：